Resumos do 49° Congresso Brasileiro de Genética Águas de Lindóia, SP, 16 a 19 de Setembro de 2003 www.sbg.org.br A UTILIDADE DOS MARCADORES GENÉTICOS XNOT E XBRA NA APRENDIZAGEM DE NOVOS CONCEITOS DA BIOLOGIA DO DESENVOLVIMENTO Valério, Marcelo; Cofre, Gonzalo Jaime Cofre Universidade Federal de Santa Catarina [email protected] / [email protected] Palavras-chave: marcadores genéticos; embriologia; hibridação in situ Acreditamos que Biologia do desenvolvimento passa por um momento importante de renovação conceitual. Dentre esses novos conceitos da embriologia moderna, têm -se demonstrado que os territórios embrionários estão especificados precocemente e que os grandes movimentos morfogenéticos, como a gastrulação, somente localizam, permitem ou favorecem interações que levam a mecanismos moleculares de diferenciação final em um determinado tecido, órgão o sistema dentro do embrião. Este trabalho propõe a utilização de marcadores genéticos como instrumento didático no ensino de alunos de graduação, apresentando-se como facilitador no processo de ensinoaprendizagem destes conceitos, de maneira a contribuir à compreensão dos novos saberes frente à biologia do desenvolvimento. Neste contexto, fizemos uso de embriões de Xenopus laevis marcados por hibridização in situ , e utilizamos sondas especificas marcadas com digoxigenina para os genes homeobox XNot e Brachyury. As sondas foram produzidas por transcrição in vitro mediante protocolos de rotina, e para a sua revelação usou-se um anticorpo anti-digoxigenina acoplado a fosfatasse alcalina. Como substrato foi usada uma mistura de NBT/BCIP. Através desta técnica podemos elucidar a definição de mesoderma presuntivo, bem como reconhecer a localização do centro organizador de Spemann e do futuro sítio de formação da notocorda . No estágio de gástrula precoce em Xenopus laevis (estágio 10), detectamos a presença do gene Brachyury, um marcador mesodérmico geral. Este gene homeobox é expresso em todas as células do mesoderma presuntivo, apresentando uma expressão somente na região equatorial do embrião, permitindo visualizar todas as células que irão posteriormente gastrular. Assim, podemos ensinar de forma convincente para os alunos de graduação como o território mesodérmico está especificado antes mesmo do processo de gastrulação. Ainda neste estágio, detectamos a presença do gene Xnot, um gene homeobox específico da notocorda e que se expressa neste estágio na região do organizador de Spemann. Apesar de a notocorda ser formada posteriormente no desenvolvimento embrionário, os sinais da sua formação podem ser assim precocemente identificados. Definimos assim, uma abordagem metodológica inovadora para o ensino em embriologia, fornecendo aos estudantes de graduação um contato direto com conhecimentos avançados em genética molecular, a fim de capacitá-los a responder questões básicas no estudo do desenvolvimento embrionário. Apoio financeiro: FUNGRAD/2002 1308