50º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 50º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2004 Costão do Santinho • Florianópolis • Santa Catarina • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-04-6 [email protected] Palavras-chave: esterases, resistência a inseticidas, malathion. Rissato, DF; Lapenta, AS; Ruvolo-Takasusuki, MCC Universidade Estadual de Maringá- UEM, Departamento de Biologia Celular e Genética- DBC Estudo da toxicidade do malathion em Lasioderma serricorne (Coleoptera: Anobiidae) e as alterações no padrão das esterases em insetos expostos Lasioderma serricorne é a espécie de inseto mais freqüente entre as pragas de produtos armazenados. Uma estratégia de controle de insetos praga é o emprego de inseticidas, incluindo os organofosforados como o malathion. Mecanismos de resistência metabólica aos inseticidas mediados por esterases têm evoluído em muitas espécies de insetos. Dois tipos de esterases estão envolvidos neste processo de resistência aos inseticidas, as carboxilesterases e as colinesterases. Este trabalho foi conduzido a fim de se estudar o mecanismo de resistência ao organofosforado malathion, verificando a LC50 (menor dose de inseticida que causa morte em 50% dos indivíduos submetidos) e as alterações na atividade das esterases em insetos desta espécie expostos a este composto. Quatro linhagens (LP, LE, LD e LR) foram submetidas a bioensaios com o malathion. Em cada ensaio foram colocados 25 insetos em 50 g de meio contendo diferentes concentrações do organofosforado. Para a LP foram testadas sete concentrações com quatro repetições cada, sendo estas, 10 x 10-4, 8 x 10-4, 6 x 10-4, 4 x 10-4, 2 x 10-4, 1 x 10-4e 0,4 x 10-4ml/g. As LR, LE e LD foram testadas somente nas concentrações 6 x 10-4 e 4 x 10-4 ml/g. Após 24 horas os insetos sobreviventes eram contados e separados para análise eletroforética. A eletroforese foi realizada em gel de poliacrilamida a 13% e como substratos da identificação das esterases foram utilizados o alfa-naftil acetato e o beta-naftil acetato. A porcentagem estimada como LC50 para a LP foi de 5,2 x 10-4ml/g de malathion, sendo que em presença de 4 x 10-4ml/g de malathion morreram 44% dos indivíduos. A porcentagem de mortalidade da LE quando os insetos foram submetidos a 4 x 10-4ml/g de malathion, foi de 64% e a LD em presença desta mesma concentração apresentou 18% de mortalidade. Já a LR, apresentou 100% de sobrevivência em presença de 4 x 10-4ml/g de malathion. Portanto, a LR e a LD foram mais resistentes, apresentando menores índices de mortalidade. Esta resistência foi associada a alterações na atividade relativa de quatro esterases, entre a quatorze já verificadas neste inseto, sendo estas a EST-6, uma carboxilesterase e as EST-10, 11 e 13, colinesterases. Em insetos expostos ao inseticida de todas as linhagens verificou-se inibição parcial da EST-6, inibição total da EST-11 e aumento na frequência da EST-10. Já a EST-13 foi parcialmente inibida em insetos das linhagens mais sensíveis e não apresentou nenhuma alteração em insetos das linhagens mais resistentes, possivelmente modificações qualitativas desta enzima estão relacionadas com o processo de resistência. Nas últimas décadas as bases moleculares dos mecanismos de resistência tem sido gradualmente elucidadas, e neste sentido, nosso trabalho visou colaborar estudando as esterases, um dos principais sistemas envolvidos na resistência aos inseticidas. 311