avaliação da toxicidade causada por 5-fluorouracil

AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE CAUSADA POR 5-FLUOROURACIL NOS
INTESTINOS DELGADO E GROSSO EM MODELOS MURINOS
João Victor Silva Araújo (bolsista do PIBIC/UFPI), Airton Mendes Conde Júnior (Orientador,
Depto de Morfologia - UFPI)
INTRODUÇÃO
O carcinoma de intestino é um dos tumores malignos mais frequentes na região ocidental, a
quarta neoplasia maligna mais prevalente no Brasil, e possui um alto índice mortalidade (FELIN, 2008).
O diagnóstico precoce é a maneira mais eficiente para diminuir a mortalidade associada ao câncer
(PINTO, 2010). Segundo o INCA (Instituto Nacional do Câncer), tantos homens quanto mulheres são
semelhantemente afetados por esse tumor, sendo possível tratamento curável, quando este se
encontra apenas no intestino (DENIPONTE et al, 2010). Existem proteínas reguladoras do ciclo celular
que têm por função garantir que não ocorram erros durante a divisão celular (PIMENTA et al, 2013). A
ausência ou inativação dessas proteínas, por algum fármaco e/ou mutação genética, provocam
anomalias que levam a neoplasias, visto que, essas perdem a capacidade de regular o ciclo celular,
provocando uma proliferação desordenada nas células com produção de genes defeituosos (BORDIN
et al, 2008). Entre elas está a proteína p53, que tem a função de “monitorar” a integridade do genoma
(PIMENTA et al, 2013), ou seja, trata-se de genes que codificam proteínas inibidoras da divisão e/ou
proliferação celular, ou podendo estar relacionadas com a apoptose. A p53 regula o DNA entre as fases
G1 e S (CASTRO JUNIOR, 2005). Outra proteína importante é a retinoblastoma (pRb) que regula a
progressão do ciclo celular na diferenciação final deste entre as fases G1 e S, assim como a morte
programada da célula (BORGES et al, 2006). A pRb bloqueia o avanço do ciclo celular pela interação
com o fator de transcrição E2F. Quando a pRB fosforila, o fator E2F é liberado e ocorre a estimulação
para que ocorra a proliferação celular. Além da p53 e pRB, outras proteínas também atuam na
regulação do ciclo celular, como por exemplo, as caspases que ajudam na atividade realizada pela pRb
(ANAZETTI E MELO, 2007). Existem tratamentos quimioterápicos capazes de minimizar os efeitos
provocados pelas alterações nessas proteínas. Entre esses, o 5-Fluorouracil (5-FU) é bastante utilizado
no tratamento de diversos tipos de neoplasias, principalmente colorretal, mama, cabeça e pescoço. O
5-FU é um antimetabólito da classe das fluoropirimidinas que vai atuar inibindo o metabolismo dos
ácidos nucléicos, pois quando fosforilado é incorporado de maneira errônea levando ao bloqueio da
replicação ou tradução (MAUTO, 2008;). Visto isso, objetivou-se avaliar a ação dessas proteínas na
inflamação da mucosa intestinal submetidos a terapia com 5-Fluorouracil em modelos murinos normais
(wild type) e geneticamente modificados (Mi/Mi e p53).
METODOLOGIA
A manutenção da genotipagem e a eutanásia dos animais foram previamente feitas na
Universidade Federal do Rio de janeiro (UFRJ). Os animais foram inicialmente pesados e foi
administrado 5-Fluouracil (Fauldfluor 2,5g-LIBBS Farmacêutica), na concentração de 50mg/ml, cuja
dose final foi de 450mg/kg de peso por animal, administrados em dose única por via intraperitoneal. Os
animais foram avaliados diariamente, durante três dias até a constatação da mucosite por meio da
observação de perda de peso e diarreia aquosa. Os animais foram eutanasiados e por meio de
dissecação, os intestinos foram removidos posteriormente fragmentados para então serem fixados em
formaldeído tamponado a 10% por 48 horas e posteriormente mantidos em álcool a 70% e então
transportados para UFPI. Após 24 horas os tecidos foram processados e submetidos à rotina de
coloração por hematoxilina e eosina (HE). As lâminas, após foram observadas em microscópio de Luz
e registrados por meio de fotomicrografias digitais.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
FIGURA 01 – Fotomicrografia de intestino delgado de camundongos Wild Type, Mi/Mi e p53 do grupo
controle e tratado com 5-fluorouracil.
Legenda: Observa-se no grupo controle uma preservação das vilosidades, porém
apresentando uma hipercelularidade. Já no grupo tratado com 5-fu há redução das vilosidades, perda
na estrutura tecidual das criptas. Tamanho - 100x. Barra equivale a 50µm
FIGURA 02 - Fotomicrografia de intestino grosso de camundongos Wild Type, Mi/Mi e p53 do grupo
controle e tratado com 5-fluorouracil.
Legenda: Observa-se no grupo controle uma preservação das criptas. Já no grupo tratado
com 5-fu há uma grande quantidade de células caliciformes, formação de edemas e irregularidades na
estrutura epitelial. Tamanho - 100x. Barra equivale a 50µm.
Nos grupos tratados (Mi/Mi e p53) é possível observar que o intestino delgado foi mais afetado
que o intestino grosso. Em todos os modelos tratados, o intestino delgado (Fig. 01) se mostrou de forma
similar, com um intenso processo inflamatório, redução das vilosidades e da estrutura da mucosa. Já o
intestino grosso (Fig. 02) no grupo tratado apresentou uma grande quantidade de células caliciformes,
edemas e certa irregularidade na estrutura das criptas.
CONCLUSÃO
As alterações clínicas registradas demonstram que a citotoxidade do quimioterápico
empregado, promoveu o processo carcinogênico caracterizado por lesões, irregularidades e/ou perda
da integridade epitelial.
Palavras-Chave: Carcinoma, Quimioterápico, Proteínas
REFERÊNCIAS
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ISSN 0004-2803.