Sensibilidade de Diferentes Primers na Detecção da bactéria

54º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Sensibilidade de Diferentes Primers
na Detecção da bactéria Wolbachia
em Moscas das Frutas do Gênero Anastrepha
Marcon, HS1; Coscrato, VE1; Selivon, D2; Perondini, ALP2; Marino, CL1
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Instituto de Biociências, Departamento de Genética, UNESP, Botucatu – SP
Instituto de Biociências, Departamento de Genética e Biologia Evolutiva, USP, São Paulo/SP
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Palavras-chave: Wolbachia, wsp, 16S, ftsZ, mosca das frutas
A bactéria endossimbionte Wolbachia é estudada devido ao grande número de infecções em artrópodes e nematóides,
causando alterações reprodutivas como a incompatibilidade citoplasmática, feminização e partenogênese. A transmissão
desta bactéria é feita via vertical e também horizontal, podendo levar a um desvio sexual na prole. O gênero Wolbachia é
dividido em seis supergrupos taxonômicos, de A a F, os grupos A e B são mais freqüentes em insetos, e os outros grupos
foram descobertos recentemente em outros invertebrados. Este estudo teve como objetivo identificar o tipo de grupo
de Wolbachia presente em 3 populações de moscas de frutas do gênero Anastrepha sp, utilizando seis pares de diferentes
primers, wsp A e B, 16S A e B e ftsZ A e B. Com a utilização dos primers wsp A e B observou-se dupla infecção com
os grupos A e B de Wolbachia em todos os indivíduos estudados. Dados da literatura indicam que o primer wsp pode
gerar fragmentos como pertencentes ao grupo B devido a efeito de reação cruzada. Dessa forma, com a utilização dos
primers 16S A e B e ftsZ A e B pode-se confirmar que as moscas analisadas estavam infectadas somente com o grupo
A, o que indica que houve um falso positivo na detecção da bactéria para o grupo B. Os primers 16S A e B mostraramse mais sensíveis na detecção da bactéria, sendo que os primers wsp A e B e ftsZ A e B foram menos sensíveis, sendo
necessárias algumas alterações na reação de PCR. Um dos primers mais utilizado, em diferentes organismos para se
descobrir a Wolbachia é o wsp, no entanto seu comportamento de reação cruzada e menor sensibilidade faz com que
seja necessário à utilização de outros primers para confirmar a presença da bactéria, para que não sejam gerados dados
de falso positivo ou negativo. Este problema poderia ser resolvido se fossem feitos primers específicos para os diferentes
subgrupos em que a bactéria é subdividida, porém isso se torna impossível, devido o grande número de primers que
seriam necessários.
Apoio Financeiro: Processo: 07/52828-1 - FAPESP.
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