Baixar o trabalho
Propaganda
ESPECTRO DE AÇÃO DE ENTEROCINAS CONTRA BACTÉRIAS DE LEITE, ANIMAIS E AMBIENTES Rocha, K. R.1; Marcelino, A. H. 1; Santana, G. C. 1; Furlaneto, M. C.1; Furlaneto-Maia, L.2 1 Departamento de Microbiologia, Universidade Estadual de Londrina, Paraná, Brasil. 2 Departamento de Tecnologia de Alimento, Universidade Tecnológica Federal de Londrina, Paraná, Brasil. *e-mail: [email protected] Bacteriocinas são peptídios antimicrobianos que destroem ou inibem o crescimento de outras bactérias taxonomicamente relacionadas com a cepa produtora. Por esta capacidade, tem sido atribuída sua utilização como bioconservadores em alimentos. Dentre as bacteriocinas estudadas, encontra-se as enterocinas produzidas por Enterococcus spp, e a busca por novas bacteriocinas tem sido foco de muitos estudos científicos. O objetivo do trabalho foi avaliar a ação das enterocinas contra bactérias isoladas de alimentos, água e animais. Foram analisados 5 isolados de enterococos (Efm20, Efm22, Efm24, Efm25 e Efs27) conhecidamente produtores de enterocinas contra Listeria inoccua. O perfil genotípico dos genes produtores de enterocinas (entA , entB , entP, entX , LB50A , LB50B , ent1071, entQ , entX, ent e AS48) foram analisados via PCR. O espectro antimicrobiano e a unidade arbitrária foi testado contra cepas ATCC (5), bactérias provenientes de alimento (9), água (3) e animais (2). O sobrenadante livre de célula (CFS) foi obtido após o cultivo dos enterococos em meio MRS por 18 h à 37°C, centrifugados, ajustados pH para 6,5, filtrados em membrana 0,22 µm e armazenados em freezer -20°C. A atividade antimicrobiana de cada CFS foi feita por difusão em ágar (spot on the law); para avaliar a unidade arbitrária, os CFS foram diluídos 1:2 (v/v), e 100 µL de cada diluição foi depositada em uma microplaca com 100 µL da bactéria indicadora (108 UFC mL-1), e incubada à 37ºC. O crescimento foi determinado por espectrofotômetro (600nm). A unidade de atividade arbitrária (AU ml -1) foi definida como a reciproca da última diluição que mostrou inibição de crescimento comparado com o controle negativo sem CFS multiplicado por 100. Os 5 produtores de enterocinas apresentaram genes entA , entB , entP e entX. O halo de inibição foi observado em 3 cepas ATCCs, em 4 das bactérias de leite, enquanto as demais bactérias provenientes de água e animais não apresentaram halo de inibição. Mesmo na máxima diluição do CFS (6400 AU mL -1), foi observado inibição de crescimento da maioria das bactérias indicadoras. Estes dados sugerem ser os enterococos como um potencial produtor de enterocinas para inibição de bactérias contaminantes em alimentos. Palavras-chaves: bacteriocinas, sobrenadante livre de células, unidade arbitrária. Suporte financeiro: Fundação Araucária, CAPES Área de conhecimento: Microbiologia Alimento
