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ESPECTRO DE AÇÃO DE ENTEROCINAS CONTRA BACTÉRIAS DE LEITE,
ANIMAIS E AMBIENTES
Rocha, K. R.1; Marcelino, A. H. 1; Santana, G. C. 1; Furlaneto, M. C.1; Furlaneto-Maia, L.2
1
Departamento de Microbiologia, Universidade Estadual de Londrina, Paraná, Brasil.
2
Departamento de Tecnologia de Alimento, Universidade Tecnológica Federal de Londrina,
Paraná, Brasil. *e-mail: [email protected]
Bacteriocinas são peptídios antimicrobianos que destroem ou inibem o crescimento de outras
bactérias taxonomicamente relacionadas com a cepa produtora. Por esta capacidade, tem sido
atribuída sua utilização como bioconservadores em alimentos. Dentre as bacteriocinas
estudadas, encontra-se as enterocinas produzidas por Enterococcus spp, e a busca por novas
bacteriocinas tem sido foco de muitos estudos científicos. O objetivo do trabalho foi avaliar a
ação das enterocinas contra bactérias isoladas de alimentos, água e animais. Foram analisados
5 isolados de enterococos (Efm20, Efm22, Efm24, Efm25 e Efs27) conhecidamente
produtores de enterocinas contra Listeria inoccua. O perfil genotípico dos genes produtores
de enterocinas (entA , entB , entP, entX , LB50A , LB50B , ent1071, entQ , entX, ent e AS48)
foram analisados via PCR. O espectro antimicrobiano e a unidade arbitrária foi testado contra
cepas ATCC (5), bactérias provenientes de alimento (9), água (3) e animais (2). O
sobrenadante livre de célula (CFS) foi obtido após o cultivo dos enterococos em meio MRS
por 18 h à 37°C, centrifugados, ajustados pH para 6,5, filtrados em membrana 0,22 µm e
armazenados em freezer -20°C. A atividade antimicrobiana de cada CFS foi feita por difusão
em ágar (spot on the law); para avaliar a unidade arbitrária, os CFS foram diluídos 1:2 (v/v), e
100 µL de cada diluição foi depositada em uma microplaca com 100 µL da bactéria
indicadora (108 UFC mL-1), e incubada à 37ºC. O crescimento foi determinado por
espectrofotômetro (600nm). A unidade de atividade arbitrária (AU ml -1) foi definida como a
reciproca da última diluição que mostrou inibição de crescimento comparado com o controle
negativo sem CFS multiplicado por 100. Os 5 produtores de enterocinas apresentaram genes
entA , entB , entP e entX. O halo de inibição foi observado em 3 cepas ATCCs, em 4 das
bactérias de leite, enquanto as demais bactérias provenientes de água e animais não
apresentaram halo de inibição. Mesmo na máxima diluição do CFS (6400 AU mL -1), foi
observado inibição de crescimento da maioria das bactérias indicadoras. Estes dados sugerem
ser os enterococos como um potencial produtor de enterocinas para inibição de bactérias
contaminantes em alimentos.
Palavras-chaves: bacteriocinas, sobrenadante livre de células, unidade arbitrária.
Suporte financeiro: Fundação Araucária, CAPES
Área de conhecimento: Microbiologia Alimento