Disciplina de Bioquímica ( DB-105 ) Aula Teórica 18/06/2001 Tópico 18 - Metabolismo do Dna O DNA e o RNA são os reservatórios moleculares da informação genética. Estas moléculas contêm as informações para a síntese de todas as proteínas e constituintes celulares. O DNA contendo os genes são as maiores macromoléculas nas células, empacotadas nos cromossomos. O DNA é armazenado nos cromossomos de maneira muito organizada, denominada forma superespiralada do DNA. O genoma celular é a soma dos genes e DNA intergênico em todos os cromossomos da célula. REPLICAÇÃO: duplicação do DNA, acontece com grau refinado de precisão. REPARO: correção de seqüências erradas. RECOMBINAÇÃO: rearranjo da informação genética para manter a diversidade genética; fornece novas combinações de alelos. RNAm Polipeptídeo Amino terminal Replicação Transcrição Tradução Proteína Carboxi terminal As propriedades fundamentais e mecanismos enzimáticos para a replicação são essencialmente idênticos em todos os organismos. 1) A replicação é SEMICONSERVATIVA: cada fita do DNA funciona como molde para a síntese de uma nova fita. Ao final resultam duas fitas, cada uma com uma fita parental (velha) e uma fita filha (nova). 2) A replicação começa na origem e prossegue BIDIRECIONALMENTE. 3) A síntese prossegue de 5’3’ e é SEMIDESCONTÍNUA, tendo uma fita líder e uma fita atrasada. Na fita atrasada o DNA é sintetizado descontinuamente. 4) O DNA é sintetizado pela DNA POLIMERASE. Existem vários tipos de DNA polimerases. Todas as DNA polimerases requerem um MOLDE - fita de DNA única e despareada. É necessário um INICIADOR - segmento complementar ao molde, com um grupo OH-3’ livre. Enzimas que sintetizam -1- RNA têm a capacidade de iniciar a síntese, e, portanto, os iniciadores são OLIGONUCLEOTÍDEOS DE RNA. As DNA polimerases são muito precisas. SISTEMA DE REPLICASE OU REPLISSOMO: envolve não apenas as DNA polimerases, mas 20 ou mais enzimas e proteínas diferentes (E. coli). MECANISMOS PARA GARANTIR A FIDELIDADE DA REPLICAÇÃO 1) Seleção das Bases pela DNA Polimerase - Pontes de H: discriminação entre nucleotídeos corretos e incorretos adicionados. 2) Mecanismos Enzimáticos. 3) Atividade Revisora 3’5’. ENZIMAS ENVOLVIDAS NA REPLICAÇÃO 1) Nucleases ou DNAses: enzimas que degradam o DNA, separando as duas fitas. 2) Helicases: movem-se ao longo do DNA e separam as fitas, usando a energia química do ATP. 3) Topoisomerases: aliviam estresse topológico criado na estrutura helicoidal do DNA pela separação das fitas. 4) Proteínas de Ligação do DNA: estabilizam as fitas separadas. 5) Iniciases: depositam os iniciadores. 6) DNA Ligases: unem os fragmentos de Okazaki. -2-