PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS – PUC GOIÁS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CURSO DE ENGENHARIA DE ALIMENTOS Disciplina: MICROBIOLOGIA APLICADA Profa: Ana Maria da Silva Curado Lins, MSc. 2a. AULA DATA_____/_______/2010 TÍTULO: TÉCNICAS DE LIMPEZA E ESTERILIZAÇÃO Conceitos e definições: => Limpeza: é a remoção da sujidade de qualquer superfície, reduzindo o número de microrganismos presentes. Esse procedimento deve obrigatoriamente ser realizado antes da desinfecção e/ou esterilização. =>Esterilização: destruição de todo e qualquer tipo de microrganismo (bactérias, fungos e vírus, protozoários), patogênicos ou não, sob forma vegetativa ou esporulada (esporos, cistos, etc). => Desinfecção: destruição de microrganismos patogênico, sob forma vegetativa, em objetos inanimados e locais (instalações). =>Anti-sepisia: destruição de microrganismos patogênicos, sob forma vegetativa em tecidos vivos. => Saneamento: redução do número de microrganismos em objetos inanimados ou locais (instalações) =>Ação microbiana (germicida, bactericida, fungicida, etc): ação mortal direta em curto intervalo de tempo. =>Ação microbiostática (germiostática, barteriostática, fungiostática, etc): inibição do processo de reprodução, com ação mortal em tempo mais ou menos longo. Métodos de Limpeza: =>Lavagem: descontaminação ou saneamento (redução de microrganismos) de mãos, pele, objetos =>Ultra-som: descontaminação de instrumentos delicados. Ineficaz em uso isolado. Métodos de Esterilização: => Calor Úmido (Autoclave): vapor sob pressão (1 à 2 atmosferas). Tempo de 15 à 30 minutos. Temperatura de 121 à 132 °C. Esterilização de instrumentos, roupas, utensílios, meios de culturas e outros líquidos. Coagula proteínas, mata, maior poder de penetração de ao vapor de água. => Fervura ou Ebulição (vapor fluente): destruição de germes patogênicos ou esporulados. Saneamento de roupas e utensílios; => Calor Seco (Estufa): tempo de 1 hora à 170°C ou 2 horas à 160°C, sem a abertura da mesma durante o processo. Esterilização de materiais impermeáveis ou sensíveis ao vapor. Oxida enzimas, menos penetrante, necessário maior temperatura e tempo. => Flambagem: exposição de objetos inanimados à chama durante curto intervalo de tempo, causa morte dos microrganismos, devido queima da matéria orgânica. => Processos Químicos: óxido de etileno por 4 horas; glutaraldeído 2% por 10 horas e solução de formaldeído 38% por 18 horas. => Radiação Ultra-violeta: controle de infecções veiculadas pelo ar. Ação superficial,pouco penetrante, irritante para os olhos, altera a composição das bases nitrogenadas dos ácidos nucléicos. A faixa germicida de UV fica entre 200 e 280 nanômetros. A UV iozoniza o oxigênio. => Radiação Ionizante: esterilização de materiais termo sensíveis, custo mais elevado, ioniza as moléculas dos microrganismos. Objetivo: Conhecer as técnicas mais usuais de limpeza e esterilização de utensílios de laboratório. Material: Auto clave, estufa de esterilização, capela, luz ultra-violeta, lamparina, placas de Petri, pape pardo, bucha, escova, detergente, bandeja Procedimentos: a) Lavar as placas de Petri com escova, bucha e detergente b) Enxaguar sob água correte c) Escorrer o excesso de água e colocar numa bandeja d) Secar as placas de Petri na estufa (previamente aquecida) a uma temperatura de 70°C durante 20 minutos e) Embrulhar as placas em papel pardo e amarrar com barbante f) Colocar os pacotes com as placas no autoclave numa temperatura de 120°C,em 1,5 ATM, durante 20 minutos. g) Esperar esfriar e retirar os pacotes do auto-clave. BOA AULA !!!!!