Biologia dos Vírus
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Biologia dos Vírus Prof. Everlon Cid Rigobelo Prof. Rigobelo Vírus Envelopados • Presença de Membrana nucleocapsídeo circundando • Maioria afeta animais - influenza • Minoria infecta bactérias e plantas Prof. Rigobelo o Vírus Envelopados Constituição do Envelope Bicamada Lipídica Proteínas Glicoproteínas Prof. Rigobelo Lipídeos – Provenientes de Células Hospedeiras (HO) • Proteínas – Responsáveis pela Adesão HO Prof. Rigobelo Adesão Viral Prof. Rigobelo Qual é a função do envelope? • Componente responsável pelo contato – Relacionados • Especificidade da infecção • Aspectos da penetração viral no HO Prof. Rigobelo Envelope regula a penetração Prof. Rigobelo Vírus Complexos • Constituídos por várias partes • Geralmente são bacteriófagos – T4 de E. coli Prof. Rigobelo Vírus Complexos Prof. Rigobelo Vírus Complexos - Herpes Prof. Rigobelo Vírus Complexo – Febre Amarela Prof. Rigobelo Estrutura dos Vírus Complexos • Cauda – estrutura complexa – Contem 20 proteínas diferentes • Cabeça – Contem outras 20 proteínas diferentes • Formação – Cauda e cabeça separadamente Prof. Rigobelo Enzimas Virais • Partículas virais não realizam metabolismo – Parasitas obrigatórios – Metabolicamente inertes • Penetração viral no HO – Exige a presença de enzimas – Realizam orifício na parede celular bacteriana – Entrada do ácido nucléico viral Prof. Rigobelo Enzimas virais • Estágios Tardios da Infecção – Síntese de grande quantidade de lisozima – Lise celular – Liberação de virions Prof. Rigobelo Enzimas virais Entricitabine Inibe a síntese da enzima viral Vírus de RNA • Enzimas – Transcriptase reversa – DNA polimerase dependente de RNA • RNA polimerase viral – Célula HO possuem RNA polimerase – RNA incompetente para sintetizar DNA ou RNA – Quando o MOLDE RNA viral Prof. Rigobelo Enzimas • Auxiliam a liberação do vírus no HO – Neuraminidases – Vírus de animais • Agem em células animais – Clivando ligações glicosídicas – Glicoproteínas e glicosídeos TECIDO CONECTIVO Prof. Rigobelo Promovem a liberação do vírus Enzimas Virais • Substituem ausência ou enzimas não funcionais HOSPEDEIRO Ausência de Enzimas Ausência de Replicação Viral Brotamento Saída do Vírus Hospedeiro Viral • Vírus são parasitas obrigatórios – Replicação exige HO apropriados • Enzimaticamente falando – O vírus precisa carregar toda enzima – Que seu HO não tem Prof. Rigobelo Três Tipos de Hospedeiros Virais Prof. Rigobelo Hospedeiros Virais • Podem estar em culturas puras – Meios liquídos ou semi-sólidos (ágar) • Culturas de tecidos – Facilitou os estudos de vírus – Animais e plantas – Plantas exigem a planta inteira Prof. Rigobelo Planta inteira • Células possuem metabólitos diferenciados • Estágio independentes – Cada estágio de desenvolvimento – Ocorre a síntese de metabolitos diferentes Prof. Rigobelo Estágios Metabolismos Cultura de Células Animais • Células retiradas de animais experimentais – Órgãos dos animais – Remoção asséptica de partes do tecido – Dissociação das células – Remoção do cimento intracelular – Semeadura da suspensão sob superfície de garrafa – Placa de Petri Prof. Rigobelo Culturas de Células Animais • Formação de monocamada – Meio de cultura adequado – Meios complexos – Amino ácidos – Vitaminas – Sais – Glicose – Sistema de tambonamento CaHCO3 – Soros sanguíneo Cultura de células Prof. Rigobelo Cultura de Célula Animal Prof. Rigobelo Cultura de células eucarióticas Prof. Rigobelo Tecido da Pele Animal Prof. Rigobelo Diversidade de células Prof. Rigobelo Cultura de Célula Vegetal Prof. Rigobelo Piadas Prof. Rigobelo Cultura de Células • Uso de antibióticos – Evitar contaminação bacteriana • Algumas culturas podem crescer subcultivadas – Crescem indefinidademente – Células Hela Prof. Rigobelo Em alguns casos • Cultura não cresce indefinidamente • Exige o cultivo de novas culturas • Preparadas frescas • Processo de altos custos Prof. Rigobelo Uso de órgãos • Inteiros ou partes • Permitem a inserção da cultura viral • Condições laboratoriais controladas – Sintomatologia da infecção na célula HO Prof. Rigobelo Quantificação dos Vírus • Necessário quantificar o n. de partículas virais • Pode-se usar microscópio eletrônico • Medir seus efeitos sobre a célula hospedeira Prof. Rigobelo Unidade Infecciosa Viral (UIV) • Menor unidade capaz de promover efeito – Detectável • Quando inoculada em um hospedeiro – Susceptível Prof. Rigobelo Unidade Infecciosa Viral • Pode corresponder somente a um vírion • Geralmente exige um inoculo maior • Determinar o número de UI por volume • Medida da quantidade de vírus • Uma medida é denominada TÍTULO Prof. Rigobelo UIV • UIV por volume • Capaz de causar um infecção • Determinada por placa de lise Prof. Rigobelo Placas de Lise • Infecção viral em uma camada celular • Células hospedeiras crescendo em uma superfície plana • Formação da zona de lise Prof. Rigobelo Zona de lise • Área clara • Convenção – surge pela infecção de um único virion • São janelas cortando o crescimento confluente Prof. Rigobelo Bacteriófago • Fina camada de bactérias hospedeiras • Espalhadas na forma de sobrecamada • Agar – meio sólido • Presença de vírus Prof. Rigobelo Bacteriófagos • Com o crescimento bacteriano • Surge uma camada turva • Regiões onde há infecção • Ocorrerá lise celular Prof. Rigobelo Contar Lise • Unidade Formadoras de Placas de Lise • Contar UFPL – determinar • Número de Unidades Virais da Amostra Prof. Rigobelo Ensaio de formação de placas de lise Replicação Curva de crescimento de Bacteriófagos: Período de eclipse: partículas virais em replicação dentro das células Ensaios de Formação de Placas de Lise • Permite isolar culturas puras • Identificar vírus geneticamente puros Prof. Rigobelo Vírus Animais • Usar células animais como hospedeiras • Placas de lise – zonas de destruição • Pelo número de placas formadas • Estima-se o título viral Prof. Rigobelo Sazonalidade de mortalidade Prof. Rigobelo Ciclo celular Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Prof. Rigobelo Apoptose Prof. Rigobelo Apoptose Prof. Rigobelo Necrose – morte Apoptose morte programada Prof. Rigobelo por trauma Autólise • A autólise ou citólise -- A ruptura dos lisossomos no interior da célula pode digerir as organelas celulares. • É a autodissolução celular (autólise) • A Autólise é a autodestruição celular por ativação das lisosimas em decorrência da falta de nutrientes e O2. É a desorganização progressiva até a desintegração completa. Prof. Rigobelo Gripe Espanhola Prof. Rigobelo Gripe Espanhola Prof. Rigobelo AIDS Gripe aviária Gripe aviária Gripe aviária Cultura de células Papilomatose Papilomatose Prevenção/vacinação Vírus Intestinais de Maior Ocorrência • Rotavírus – Vírus entéricos – Dores abdominais – Contaminação por alimentos – Pessoa pessoa Prof. Rigobelo Mecanismo de Ação Viral Prof. Rigobelo CANSEI !
