Imuno-histoquímica IHQ em material fixado em formol e incluído em parafina ð Método de escolha Vantagens: material coletado, fixado e processado convencionalmente: biópsias incisionais e excisionais, “core biopsy”, peças cirúrgicas radicais e preparados citopatológicos permite utilização de material arquivado por muitos anos permite a avaliação morfológica lâminas permantentes custo acessível Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Imuno-histoquímica Métodos de detecção / amplificação ABC - complexo avidina-biotina-enzima (mais comum) Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Célula de Langerhans ativação/ inflamação migração para linfonodo Célula de Langerhans Célula indeterminada, “velada” (veiled) Célula dendrítica interdigitante CD1a + S100 + CD45 (LCA) + CD68 + Fascina neg. CD1a + S100 + CD45 (LCA) + CD68 + Fascina + (?) CD1a neg. S100 + CD45 (LCA) + CD68 + Fascina + Grânulos de Birbeck + Grânulos de Birbeck neg. Grânulos de Birbeck neg. OBS: na HCL, a fascina é positiva! Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Antígeno CD1a Glicoproteína da superfície celular, expressa em associação com a b2 microglobulina. Função na apresentação de antígenos (?) Expressa em Células de Langerhans: Em tecidos normais (pele, amígdala, timo) Na histiocitose de células de Langerhans Na linfadenopatia dermatopática e outras linfadenopatias reacionais Timócitos corticais (linfócitos T imaturos) Leucemia linfóide aguda / linfoma linfoblástico de células T Marcação na membrana celular (e < no citoplasma) Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - células de Langerhans da epiderme Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Célula indeterminada (“velada”) Anticorpo anti CD1a – linfonodo com linfadenopatia dermatopática Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Histiocitose de células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - histiocitose de células de Langerhans Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Histiocitose de células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - histiocitose de células de Langerhans Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Histiocitose de células de Langerhans Anticorpo anti CD1a - histiocitose de células de Langerhans Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Proteína S100 Proteína intracelular relacionada com a diferenciação celular, regulação da motilidade, transcrição de sinais, transdução e ciclo celular Expressa em: Células de Langerhans Células dendríticas interdigitantes Células gliais e de Schwann Melanócitos Condrócitos Adipócitos etc Marcação citoplasmática e nuclear Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Histiocitose de células de Langerhans Proteína S100 - histiocitose de células de Langerhans Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Antígeno CD68 Glicoproteína transmembranar da família da sialomucina, de função desconhecida Expressa em grânulos citoplasmáticos de: Células de Langerhans Células dendríticas interdigitantes Macrófagos e monócitos Células mielóides progenitoras e granulócitos Marcação citoplasmática Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Histiocitose de células de Langerhans CD68 - histiocitose de células de Langerhans Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Histiocitose de células de Langerhans Diagnóstico definitivo: Exame anatomopatológico com reconhecimento morfológico das células de Langerhans em microambiente apropriado (número variável de eosinófilos, histiócitos, neutrófilos e pequenos linfócitos) Exame imuno-histoquímico com positividade com os marcadores CD1a e proteína S100 Confirmação adicional: Grânulos de Birbeck (microscopia eletrônica) Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica Prof. Andréa Rodrigues Cordovil Pires - Fonte Medicina Diagnóstica