15/10/2009 PROCARIOTOS X EUCARIOTOS UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE BACTERIOLOGIA I, II e III Cloroplasto Parede celular (PG) Mitocôndria FARMÁCIA, ODONTOLOGIA E VETERINÁRIA Membrana citoplasmática Lisossoma Citoplasma DNA: Nucleóide Núcleo Ribossoma CITOLOGIA Retículo endoplasmático Prof. Renata F. Rabello 2º Semestre/2009 Aparelho de Golgi Envoltório: 1. Membrana citoplasmática Membrana citoplasmática 2. Parede celular 3. Cápsula Citoplasma: 1. Estrutura delgada que envolve à célula. Separa o interior da célula do ambiente. Cromossoma (nucleóide) 2. Ribossoma 3. Corpúsculos de inclusão Periplasma 4. Vacúolos gasosos Endosporo Apêndices de superfície: 1. Flagelo 2. Pili / fímbria Composição química: Função: bicamada fosfolipídica; barreira de permeabilidade; proteínas. ancoragem de proteínas: Meio extracelular H2 O Fosfolipídeos hidrofílica Região hidrofóbica Região hidrofílica Proteínas Meio intracelular Ácidos graxos ex. enzimas, proteínas de transporte; Região H2 O Fosfato Glicerol F o s f o l i p í d e o produção de energia. Mesossoma (organela ou artefato?): invaginações da membrana citoplasmática; respiração e divisão celular. 1 15/10/2009 Parede celular Estrutura: Presente na maioria das bactérias, exceto em micoplasmas. Método de coloração de bactérias (Christian Gram, 1884): Funções: Coloração de Gram forma; Gram-positivos (roxo) x Gram-negativos (vermelho) barreira de proteção; papel na patogênese. Coloração de Gram Membrana externa Peptideoglicana Parede celular Parede celular Composição: Gram-negativos Peptideoglicana (mureína) Gram-positivos NAM NAM NAG NAM NAG NAM NAG NAG L-Alanina L-Alanina Ác. D-glutâmico Ác. D-glutâmico L-Lisina D-Alanina L-Lisina DAP (Gli)5 D-Alanina D-Alanina L-Lisina D-Alanina L-Lisina DAP Ác. D-glutâmico Ác. D-glutâmico L-Alanina L-Alanina NAG NAG NAM NAG NAM NAG NAM NAM NAM: ácido N-acetilmurâmico; NAG: N-acetilglicosamina; Gli: glicina. NAM: ácido N-acetilmurâmico; NAG: N-acetilglicosamina; DAP: ácido diaminopimélico. 2 15/10/2009 Ácidos teicóico e lipoteicóico (Gram-positivas) Gram-positivos NAM Gram-negativos NAG NAM L-Alanina D-Alanina polissacarídeos ácidos; passagem de íons. L-Alanina Ác. D-glutâmico L-Lisina NAG Ác. D-glutâmico (Gli)5 D-Alanina DAP L-Lisina D-Alanina D-Alanina Ác. D-glutâmico Ácido lipoteicóico Ác. D-glutâmico L-Alanina NAG Ácido teicóico Proteínas DAP L-Alanina NAM NAG Peptideoglicana NAM n n Membrana citoplasmática NAM: ácido N-acetilmurâmico; NAG: N-acetilglicosamina; DAP: ácido diaminopimélico; Gli: glicina. Membrana externa (Gram-negativas) LPS: Polissacarídeo O (variável) Proteínas Polissacarídeo interno Lipídeo A (endotoxina) Porinas Lipopolissacarídeo (LPS) Membrana externa Fosfolipídeos e lipoproteínas Periplasma porinas: Micoplasmas: não possuem parede celular; esteróis na membrana citoplasmática (rigidez) → proteção. proteínas transmembrânicas → canais: Peptideoglicana Membrana citoplasmática substâncias hidrofílicas PM; específicas e não específicas Micobactérias: rica em lipídeos → não coram bem pelo Gram; coloração de Ziehl Neelsen: bactérias ácido-álcool resistentes (BAAR). Porinas Proteínas de superfície Outros lipídeos Ácidos micólicos Arabinogalactana Lipoarabinomanana Peptideoglicana Membrana citoplasmática 3 15/10/2009 Cápsula Função: Camada externa à parede celular. ligação às células do hospedeiro; Composição: dificulta a fagocitose; polissacarídica; ↑ protéica (rara). resistência ao dessecamento (armazena grandes quantidades de água); fonte de nutrientes; proteção contra bacteriófagos ou interação com anticorpos. Periplasma ou espaço periplasmático Citoplasma Bactérias Gram-negativas. Substância Gel com proteínas periplasmáticas (ex. enzimas hidrolíticas, proteínas de ligação, quimiorreceptores, enzimas envolvida pela membrana diferentes estruturas; que degradam antibióticos). fluída citoplasmática: composição química: água → 80% lipídeos, proteínas, polissacarídeos, moléculas de PM, nucleotídeos → 20% Cromossoma (nucleóide) Plasmídeos Informação genética essencial: Informação genética extra-cromossômica. Genes não essenciais (ex. resistência antimicrobiana, 1 cromossoma circular de DNA* virulência, outros). Genoma: Ausência de membrana nuclear Célula procariótica conteúdo genético total. Célula eucariótica * Exceções: ex. Borrelia (linear) e Rhodobacter sphaeroides (2 cromossomas). 4 15/10/2009 Ribossoma Síntese de proteínas. Grande número. Composição: rRNA (60%); proteínas (40%). Polissomos ou polirribossomos S = unidades Svedberg (taxa de sedimentação sob força centrífuga). No e tipo variam com meio e estado funcional da Grânulos/inclusões citoplasmáticas célula. Podem estar presentes. Tipos: Microscopia óptica com colorações especiais. poli- β-hidroxibutirato (PHB): Natureza química variável. • composto lipídico; Função: • um dos mais comuns; reserva (nutriente); subunidades de macromoléculas → estruturas glicogênio; celulares. Vacúolos gasosos polifosfatos (metacromáticos ou volutina): coloração diferente do corante usado; Corynebacterium, amido; Yersinia pestis Mycobacterium. Procariotos que flutuam em lagos ou mares. e Membrana: unidades repetidas de proteína; estrutura rígida; Corynebacterium diphteriae Coloração de Albert permeável somente a gases. 5 15/10/2009 Flagelo Apresentação (arranjo): Apêndices longos e finos (A) Monotríquio (ex. Vibrio cholerae) Origem na membrana citoplasmática. (B) Lofotríquio Geralmente, em bactérias Gram-negativas. (C) Anfitríquio Motilidade celular. (D) Anfilotríquio Diferem quanto ao no e (E) Peritríquio (ex. Escherichia coli) organização. Flagelos periplasmáticos Estrutura: 1) Filamento (flagelina) 2) Gancho 3) Estrutura basal (motor flagelar) entre a membrana externa e peptideoglicana, - bastão central ligados às extremidades, no variável; - anéis motilidade ↑em ambientes viscosos. Visualização: - Mot e Fli Contraste de fase arranjo → classificação de bactérias. microscopio óptico: Campo claro Campo escuro Coloração de Leifson (específica para flagelos) → diâmetro 6 15/10/2009 microscópio eletrônico: Motilidade: polar → rápido, volteios e arremessos; peritríquio → linha reta, lenta e firme. Respostas comportamentais: Pili ou fimbria quimiotaxia; fototaxia; outros. Pili sexual (pili F): Projeções finas, curtas e mais numerosas na superfície de algumas bactérias. Complexos de PO4-CHO-PTN (pilina). transferência de material genético (conjugação); F+ → macho (doador); F- → fêmea (receptora). Vistos apenas ao Fímbrias: microscópio eletrônico. adesão; Pili Endosporo (esporo) Poucos gêneros: ex. Clostridium e Bacillus). Célula vegetativa → esporulação → esporo. colonização → doença; Forma de resistência: calor, dessecação, radiações e agentes químicos. Desenvolvimento de métodos de esterilização adequados ( ex. meios de cultura, alimentos). Condições desfavoráveis: ex. escassez de nutrientes e água; Latência. 7 15/10/2009 Estrutura: Esporogênese: Exospório Capa (proteínas) (envoltório fino - proteínas) Membrana externa Córtex (moléculas de PG frouxamente associadas) Parede celular Núcleo do esporo Membrana (nucleóide, ác. dipicolínico, interna Ca2+ e PPASs*) * pequenas proteínas ác. solúveis Auxilia na identificação de algumas bactérias Métodos de coloração: (presença, localização e tamanho). Coloração de Gram Coloração especial Localização: Central Terminal Subterminal Endosporo > célula vegetativa (↑ da célula no local) Verde de malaquita (corante 1ário)//água/safranina (contracorante) Importância: espécies importantes na saúde humana/animal: alguns processos destroem apenas a forma vegetativa; resistência ao calor: • Bacillus anthracis (antraz); • Clostridium tetani (tétano); grau de desidratação e dipicolinato de cálcio; resistência a substâncias químicas: • Clostridium perfringens (gangrena gasosa); • Clostridium botulinum (botulismo). < susceptibilidade a agentes que causam hidrólise de proteínas, enzimas, ácidos nucléicos. 8