XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015 Dimensões Tecnológicas e Sociais da Zootecnia Fortaleza – CE, 27 a 29 de maio de 2015 Avaliação Microbiológica Em Secreção Vulvar De Suínas1 Microbiological Evaluation In Vulvar secretion of swine Glaudérica Queiroz Gomes2, Vanessa de Souza Caldas3, Andréa do Nascimento Barreto3, Carissa Michelle Goltara Bichara4 1 Trabalho elaborado para submissão no XXV Congresso Brasileiro de Zootecnia Graduanda em Zootecnia da Universidade Federal Rural da Amazônia – UFRA, Belém-PA, E-mail: [email protected] 3 Graduanda em Zootecnia da Universidade Federal Rural da Amazônia – UFRA, Belém-PA 4 Professora, UFRA, Belém-PA 2 Resumo: O objetivo deste estudo foi determinar os aspectos microbiológicos presente em uma suína com suspeita clínica de infecção e estabelecer o perfil de sensibilidade a antibióticos que podem acometem as fêmeas de uma estação de Suinocultura Experimental, localizada na Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA). Utilizou-se técnicas laboratoriais de inoculação em meio de cultura de semeadura líquido e sólido, microscópio, catalase e coloração de Gram. As análises laboratoriais de coloração (observada em microscopia) e catalase, deram positivos para a bactéria Staphylococcus sp. gram positivo, onde posteriormente foi realizado o antibiograma mostrando sensibilidade para os antibióticos Gentamicina e Norfloxacim. Palavras–chave: antibiótico, agentes bacterianos, infecção, Staphylococcus sp. Abstract: The objective of this study was to determine the microbiological aspects present in a swine with clinical suspicion of infection and establish the sensitivity profile to antibiotics that may affect females of Experimental Swine station , located at the Federal Rural University of Amazonia ( UFRA ) . Was used laboratory techniques inoculated in a medium of liquid and solid seeding culture, microscopy, catalase and gram color. Laboratory analyzes staining (observed on a microscope ) and catalase were positive for the bacteria Staphylococcus sp . gram positive, which was later performed antibiogram showing sensitivity to gentamicin and Norfloxacim antibiotics. Keywords: antibiotic, bacterial agents, infection, Staphylococcus sp Introdução Em geral, os microrganismos envolvidos, com maior frequência, nas infecções urinárias em suínas são Escherichia coli, Proteus mirabilis, Staphylococcus sp., Streptococcus sp., Aeromonas hydrophila e Actinobaculum suis (Menin, 2008), e a condições inadequadas de higiene, principalmente nos locais onde os animais habitualmente sentam, promove uma alta pressão infectiva ambiental, possibilitando maior ocorrência deste tipo de infecção. A presença dessas infecções podem indicar endometrites em suínas, sendo eliminadas por falha reprodutiva (grau grave). E segundo Girotto et al. (2002), a endometrite pode ser caracterizada como uma inflamação do revestimento interno uterino, o que prejudica o retorno ao cio e alguns casos, se mal cuidado, pode ocorrer abortos, as infecções por microrganismo são as principais causas de falhas reprodutivas que influem na produtividade do rebanho por afetarem, principalmente, a saúde geral das matrizes e aumentarem consideravelmente a taxa de reposição. A infecção urinária mantém elevada relação com a ocorrência de problemas puerperais, se caracterizando como um grande fator de risco para as patologias puerperais. Assim, reforça-se a recomendação para a realização de um monitoramento das porcas à entrada da maternidade, através de um teste rápido para diagnostico de infecções. Nos animais positivos recomenda-se sua medicação, por exemplo, com antibiótico de longa ação no dia do parto. O combate às infecções urinárias só será possível, quando associadas várias medicações de controle e tratamento. Como a correção dos fatores de risco envolvendo simultaneamente a utilização de quimioterápicos (Pôrto et al., 2003). O objetivo deste trabalho foi aprofundar os conhecimentos na área de microbiologia com vistas à identificação de bactérias de espécimes clínicos, inoculando-o em meio de cultura líquido e sólido, para identificação de bactérias patogênicas que -1- XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015 -2- Dimensões Tecnológicas e Sociais da Zootecnia Fortaleza – CE, 27 a 29 de maio de 2015 acometem os suínos, assim como a realização de um antibiograma para verificar quais medicamentos são mais indicados para tal infecção. Material e Métodos O experimento foi conduzido no setor de suinocultura experimental da Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), campus Belém, onde escolheu se uma fêmea com secreção vulvar. Fez-se a antissepsia da região com soro e coletou-se com um tubo de ensaio a secreção da região vulvar, inoculando-o em meio de cultura de semeadura líquido (caldo BHI- Brain Heart Infusion), depois de incubado por 24 horas, foi retirado uma alíquota e inoculado em meio de cultura de semeadura sólido contendo Ágar MacConkey (meio seletivo e diferencial para detecção de bacilos entéricos gramnegativos, fermentadores ou não da lactose) e Ágar sangue (isolamento de microrganismos não fastidiosos, verificação de hemólise dos Streptococcus sp. e Staphylococcus sp. e usado na prova de satelitismo - para identificação presuntiva de Haemophilus sp.), em placas de Petri e incubado por 24 horas à 35 ºC. No final da semeadura, fez-se uma picada do meio com a alça para verificar hemólise em profundidade e em posteriormente espalhou-se numa lâmina para fazer a técnica de coloração de Gram e, em seguida, visualização em microscópio óptico. A técnica faz a diferenciação de microrganismos através das cores, onde por observação em microscópio óptico, as bactérias Gram-positivas, que têm a parede celular composta por mureína (peptídeoglicano - peptídeo de ácido n-acetil murâmico), durante o processo de descoloração com álcool etílico, retém o corante, permanecendo com a coloração conferida pelo corante primário (roxo). Já as bactérias Gram-negativas, com parede celular composta predominantemente por ácidos graxos (lipopolissacarídeos e lipoproteínas), perdem o complexo iodopararosanilina, são incapazes de reter o violeta de Genciana, assumindo a cor do corante de fundo (vermelha). Depois foi realizado o teste da catalase, que é utilizado para identificação dos gêneros Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria, Corynebacterium, Micrococcus, Bacillus, Moraxella catarrhalis. E por último foi feito o antibiograma no qual escolheu-se 12 antibiótico aleatoriamente para verificar a sensibilidade e resistência das bactérias aos antibióticos determinados. Resultados e Discussão Conforme as técnicas laboratoriais, o meio de cultura líquido, com a secreção vulvar no tubo, apresentou turvação, o que indica o crescimento bacteriano, e o meio de cultura sólido em Placa de Petri apresentou crescimento da bactéria em meio Ágar sangue onde verificou-se a hemólise dos gêneros Streptococcus sp. e Staphylococcus sp. e para diferenciação das bactérias foi utilizado a técnica de Gram, juntamente com o microscópio óptico e a catalase que deram como resultado o Staphylococcus sp. (Gram – Positivos). Então foi feito o antibiograma saber a qual antibiótico o Staphylococcus sp. era sensível ou resistente, como mostra a tabela 1 abaixo. Tabela 1. Resposta do Staphylococcus sp. aos antibióticos. Antibiótico Resultado Amicacina Resistente Cefalotina Resistente Cloranfenicol Resistente Gentamicina Sensível Nitrofurantoina Resistente Sensível Norfloxacim Rifampicina Resistente Sulfonamidas Resistente Tetraciclina Resistente Oxacilina Resistente Sulfazotrim Resistente Cefotaxina Resistente -2- XXV CONGRESSO BRASILEIRO DE ZOOTECNIA ZOOTEC 2015 Dimensões Tecnológicas e Sociais da Zootecnia Fortaleza – CE, 27 a 29 de maio de 2015 Conclusão A amostra da secreção vulvar da suína após métodos de identificação de microrganismos patogênicos revelou que continha a bactéria do gênero Staphylococcus sp., sendo sensível a dois antibióticos: Gentamicina e Norfloxacim. E como as vias urinárias da fêmea suína são naturalmente mal protegidas, a distância da vulva até a uretra é relativamente curta. Estes tornam a bexiga a suína mais predisponente à ascensão de bactérias particularmente, aquelas da flora retal ou vulvar. Literatura citada GIROTTO, A. F.; SOBESTIANSKY, J.; DALLA COSTA, O.A.; MATOS, M.P.C. Avaliação econômica de alta incidência de infecção urinária em fêmeas suínas em produção. Acta Scientiae Veterinariae. v. 30, n. 2, p. 87-92, 2002. PÔRTO, R. N. G.; SOBESTIANSKY, J; MATOS, M.P.C. GAMBARINI, M.L. Aspectos físicos químicos e microbiológicos da urina de matrizes suínas descartadas. Ciência Rural, v.33, n.2, p.319-324, 2003. MENIN, A.; RECK, C.; CAPELLI, J.C.; FERRAZ, S.M.; VAZ, E.K. Diagnóstico de Infecção Urinária Em Fêmeas Suínas Produtivas em Granjas Comerciais no Sul do Brasil. Ciência Animal Brasileira, v. 9, n. 1, p. 199-206, 2008. -3-