UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO DECANATO DE ENSINO DE GRADUAÇÃO DEPARTAMENTO DE ASSUNTOS ACADÊMICOS E REGISTRO GERAL DIVISÃO DE REGISTROS ACADÊMICOS PROGRAMA ANALÍTICO DISCIPLINA CÓDIGO: IV 219 BACTERIOLOGIA VETERINÁRIA CRÉDITOS: 05 Cada Crédito corresponde a 15h/ aula (2T-3P) INSTITUTO DE VETERINÁRIA DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA VETERINÁRIA OBJETIVO DA DISCIPLINA: Proporcionar aos estudantes noções básicas das principais famílias bacteriológicas de importância veterinária. EMENTA: Grupos bacterianos de importância em Medicina Veterinária. Princípios de isolamento e identificação. Características morfológicas, bioquímicas e sorológicas. Patogenicidade para animais de laboratório e para o homem. Prevenção de infecções no laboratório de Bacteriologia. Mecanismos de ação de antibióticos e quimioterápicos. Biogás como fonte energética - bactérias metanogênicas do rúmen. CONTEÚDO PROGRÁMATICO: AULAS TEÓRICAS 1. A Importância da Bacteriologia Veterinária: 1.1. Os princípios da classificação. 1.2. As características empregadas na classificação. 2. Principais Grupos Bacterianos de Interesse Veterinário: Em cada grupo serão citadas apenas as características peculiares ao grupo enquanto que as características gerais, abaixo relacionadas, serão estudadas sem, serem enumeradas novamente em cada grupo: 2.1. Morfologia e reações tintoriais 2.2. Características culturais, bioquímicas e sorológicas 2.3. Patogenicidade para animais de laboratório 2.4. Patogenicidade para homem (infecções laboratoriais) 2.5. Sensibilidade a antibióticos e quimioterápicos 3. Os Grupos 3.1. Cocos piogênicos: 3.1.1. Gênero Staphylococcus - características gerais: S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus, S. xylosus, S. delphine, S. intermedius, S. hyicus etc. Toxinas: hemotoxina, leucocidina, enterotoxina, TSST-1 (toxina 1 da síndrome do choque tóxico), toxina necrotizante. Enzimas: coagulase, estafiloquinase, proteases, fosfatase, hialuronidase, Dnase e lipase. Resistência à penicilina (plasmídeo) e outros antibióticos. Fagotipagem. Intoxicação alimentar. Identificação: API Staphi. 3.1.2. Gênero Streptococcus - características gerais: S. agalactiae, S. uberis. S. dysgalactiae, S. caprinus, S. pyogenes, S. equisimilis, S. Zooepidermidis, S. equi, S. bovis etc. Toxinas eritrogênica, estreptolisinas. Enzimas: estreptoquinase, estreptodomase, hialuronidase, proteinase. Diferenciação bioquímica e sorológica. Estreptococos causadores de mastites. Identificação: API 20 Strept. 3.2. Bactérias do grupo corineforme - características gerais: 3.2.1.Gênero Corynebacterium C. pseudotuberculosis, C. renale, C.cystitidis, C. bovis , C . grupo D 2, Rhodococcus equi) Exotoxina: hemolítica (com ativ. fosfolípase D). Identificação API Coryne Test. 3.2.2. Gênero Adtinomyces - características gerais: A. pyogenes (C. pyogenes) - piobacilose A. suis comb. nov. A. bovis. Toxina: hemolisina: piolosina Identificação API Coryne test 3.2.3. Gênero Listeria - características gerais: L. monocytogenes, L. ivanovii, etc Toxina: listeriolisina 0 Identificação API Listeria 3.2.4. Gênero Erysipelothrix - características gerais: E. rhusiopathiae - bacilo da erisipela suína; infecção erisipelóide. Exames sorológicos Identificação. 3.2.5. Gênero Brucella: características gerais: B. abortus, B. melitensis, B. suis, B. canis, B. ovis e B. neotomae. Diferenciação entre as espécies. Testes sorológicos. 3.2.6. Gênero Campylobacter - características gerais: C. fetus, C. sputorum, C. fecalis Diferenciação entre as espécies. Microaerofilismo. 3.2.7. Gênero Bacillus - características gerais: B. anthracis, B. subtilis, B. cereus, B. megaterium B. anthracis; carbúnculo hemático B. subtilis: infecções, B. cereus: intoxicação alimentar. 3.2.8. Gênero Clostridium - caracaterísticas gerais: Clostrídios neurotóxicos - Cl. tetani (tétano) Cl. botulinum (botulismo). Clostrídios histotóxicos: gangrena gasosa Cl. chauvoei, Cl. septicum, Cl. perfringens, Cl. novyi Cl. sordelli, Cl. sporogenes. Toxina tetânica e toxina botulínica Identificação API 20 A (anaeróbicos) 3.3. Família Enterobacteriaceae - caracaterísticas gerais: 3.3.1. Gêneros: Escherichia, Proteus, Salmonella, Providencia, Shigella, Citrobacter, Enterobacter, Klebisiella, Edwardsiella, Morganella, Hafnia, Serratia, Yesinia. Isolamentos em meios de enriquecimento, seletivos e diferenciais Identificação bioquímica. Fagotipagem. Sorologia. Endotoxinas, invasinas e enterotoxinas. Plasmídeos. Identificação: API 10 S; API 20 E, Rapid 20 E. 3.3.2. Gênero Haemophilus - características gerais: H. equigenitalis, H. agni (septicemia nos cordeiros) (metrite equina contagiosa). Haemophilus suis (influenza dos suínos) H. gallinarum (coriza das aves) Identificação: API Haemophilus 3.3.3. Gênero Pasteurella - características gerais: P. haemolytica, P. anapestifer, P. multocida Diferenciação entre as espécies Septicemia hemorrágica Cólera aviária. Septicemia aguda dos patos, perus e aves aquáticas. 3.4. Família Mycobacteriaceae 3.4.1.Gênero Mycobacterium - características gerais: M. tuberculosis, M. bovis, M. avium, M. leprae, M. paratuberculosis. Micobactérias atípicas. Micobactérias saprófitas. M. simiae, M. gordonae, M. intracellulare, M. ulcerans, M. fortuitum, M.phei. Diferenciação entre as espécies Coloração de Ziehl - Neelsen Meios seletivos e sintéticos 3.5. Família Spirochaetaceae 3.5.1. Gênero Leptospira L. icterohaemorhagiae, L. canicola, L. pomona, L. pyogenes Colorações Meios de enriquecimento Testes sorológicos Gênero: Borrelia - características gerais: B. burgdorferi, B. theileri, B. anserina Meios de enriquecimento Microscopia de campo escuro e contraste de fase. 3.5.2. Gênero Fusobacterium: características gerais: F. necrophorum: necrobacilose Endotoxina Bioquimismo 3.6. Classe Mollicutes Gênero Mycoplasma: características gerais: M. bovirhinis, M. bovis, M. bovigenitalium, M. arginini, M. agalactiae Entomoplasma, Mesoplasma e Acholeplasma. AULAS PRÁTICAS: 1. Técnicas para a coleta do material destinado ao exame laboratorial. 2. Isolamento primário e identificação de gêneros e espécies. 3. Estafilococos: Isolamento em meio de Chapman e agar manitol vermelho de fenol. Cultivo em agar sangue. Coloração de Gram. Identificação entre as espécies: prova de coagulase (livre e ligada), VP, meio de Martin, fermentação de açucares (manitol). Dnase, prova da catalase. API Staph. 4. Estreptococos: Determinação do tipo hemolítico em agar sangue. Coloração de Gram. Isolamento em meios de cultura com azida sódica e cristal violeta. Diferenciação entre as espécies: hidrólise do hipurato, hidrólise da esculina, fermentação de lactose sorbitol, trealose, salicina e inulina, redução do leite mais azul de metileno. API Strepto. 5. Bactérias do grupo corineforme e Actinomyces Coloração de Gram Agar sangue - tipo de hemólise. Identificação: crescimento no meio de Loeffler (liquefação ou não) redução do nitrato, produção de gelatinase, produção de urease, ação das bactérias sobre o leite. Fermentação de açucares. API. Coryne teste. 6. Gênero Brucella Isolamento em agar Brucella, agar Albimi, agar dextrose Isolamento primário em atmosfera de CO2 Diferenciação entre as espécies: cromobacteriostase, produção de urease e H2S, fermentação de açúcares. Observação do tipo colonial (S - R) com luz transmitida oblíqua. Teste com tripaflavina ou acriflavina da suspensão de brucelas. 7. Campylobacter C. fetus: cultivo em microaerofilia (tubo de agar em pé semi-líquido) Microscopia de contraste de fase. Identificação: catalase e H2S. 8. Gênero Bacillus Cultivo em agar sangue. Coloração de Gram. Diferenciação entre as espécies: teste de motilidade (meio de SIM, meio de Edwards), fusão e tipo de crescimento em gelatina, ação das bactérias sobre o leite, redução do nitrato, fermentação de açúcares. 9. Gênero Clostridium Cultivo em agar Columbia + sangue. Isolamento em tubos com agar em camada alta (método de Veillon) e em placas com meio (em jarra de anaerobiose - Gaspak). Método de Zeissler, placa de gradiente de O2. Identificação: API (anaeróbios). 10. Enterobactérias Isolamento em meios de enriquecimento, seletivos e diferenciais. Meios de transporte. Identificação: TSI, SIM, H2S, fermentação de açúcares, malonato, fenilalanina, IMViC, hidrólise da uréia. API 10 S, API 20 e Rapid 20 E. 11. Gênero Mycobacterium Isolamento em meio de Loweinstein - Jensen Caracteres Culturais: aspecto das colônias, pigmentação, etc. Coloração de Ziehl - Neelsen Diferenciação entre as espécies: reducão do nitrato, produção de niacina, hidrólise do Tween 80, catalase: temperatura ambiente a 68º C, fermentação de açúcares hidrólise da uréia etc. 12. Espiroquetas 12.1. Leptospira: Cultivo no meio de Fletcher, meio de Stuart e EMJH. Microscopia de campo escuro e contraste de fase. Coloração de Fontana, por fluorescência e de Warthin - Stary 12.2. Borrelia Meio de BSK, PMR, meios semi-sólidos e semi-líquidos. Coloração de Giemsa e toluidina. 13. Mycoplasmataceae Mycoplasma Morfologia colonial: meio PPLO (meio líquido e sólido) Corante de Dienes 14. Bactérias produtoras de metano: Técnica de produção de metano a partir do conteúdo do rúmen e do esterco de animais domésticos. BIBLIOGRAFIA: BIER, O. Bacteriologia e Imunologia. 19a ed. São Paulo: Melhoramentos, 1978. BRUNER, D.W.; GILLESPIE, J.H. 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