Editorial BOLETIM INFORMATIVO TÉCNICO DA MERIAL
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4. Melhoria de desempenho usando VAXXITEK HVT+IBD Foi realizado um estudo de avaliação em grande escala, através da análise de dados de monitoria compilados da indústria aviária colombiana (9), de março a dezembro de 2007 e 2008. Os parâmetros estudados incluíram a taxa de mortalidade (Figura 1), o ganho de peso diário (g), o índice de conversão alimentar (Figura 2), peso final (kg), taxa de condenação (Figura 3), idade de abate (dias), índice de eficiência e custos de medicação (em centavos norte-americanos / kg) (Figura 4). O programa de vacinação foi alterado da tradicional vacinação no campo, com combinação de diferentes vacinas contra a doença de Gumboro, para a VAXXITEK HVT+IBD. Granjas com elevado desafio contra a doença de Gumboro foram identificadas devido a sinais clínicos de infecções com vírus muito virulento da doença de Gumboro e confirmadas por caracterização de RT PCR. Os parâmetros de desempenho de produção foram estabelecidos utilizando o Índice Europeu de Desempenho (EPI), em granjas com desafio no campo da doença de Gumboro com um total de 35.655.852 aves de 2.377 lotes em 2007 e 38.306.065 aves de 2.553 lotes em 2008. O percentual de casos de Gumboro clínicos relatados e de casos de vírus muito virulento da doença de Gumboro descritos foram comparados de 2007 para 2008. Foi igualmente avaliado o benefício econômico no que diz respeito aos custos de produção. A análise da taxa de mortalidade demonstrou uma diminuição de 6,76% para 6,23%; o ganho de peso diário aumentou de 55 g para 57 g; o índice de conversão alimentar diminuiu de 1,88 para 1,83; o peso final aumentou de 2,340 kg para 2,374 kg; a taxa de condenação diminuiu de 0,58% para 0,39%; a idade de abate diminuiu de 43 dias para 42 dias; o EPI aumentou de 268 para 287 e os custos de medicação diminuíram de 1,36 centavos norte-americanos/kg para 0,91 centavos norte-americanos/kg. De 2007 a 2008, o percentual de casos clínicos relatados da doença de Gumboro caiu de 4,33% para 0,19%. O benefício econômico foi analisado como sendo de 8 centavos norte-americanos por ave e de 3,3 centavos norte-americanos por kg de carne de frango produzida. % de taxa de mortalidade Sem VAXXITEK HVT+IBD Com VAXXITEK HVT+IBD Figura 1 - Taxa de mortalidade - Ensaios colombianos % de taxa de condenação Índice de conversão alimentar Sem VAXXITEK HVT+IBD Com VAXXITEK HVT+IBD Figura 2 - Índice de conversão alimentar – Ensaios colombianos Editorial Sem VAXXITEK HVT+IBD Com VAXXITEK HVT+IBD Sem VAXXITEK HVT+IBD Com VAXXITEK HVT+IBD Figura 3 - Taxa de condenação - Ensaios colombianos Figura 4 - Custos de medicação (em pesos colombianos) - Ensaios colombianos Isto representa para o montante produzido de março a dezembro de 2008, um ganho total de 3,1 milhões de dólares norte-americanos para a indústria, devido à mudança para a VAXXITEK HVT+IBD, para a produção de 90.939 toneladas de carne de frango em 2008. Na Hungria, foram também demonstrados os benefícios da VAXXITEK HVT+IBD em aves coloridas, especialmente a melhoria no ganho de peso, 2,15 kg em média em aves vacinadas aos 72 dias de idade e 1,58 kg em aves de controle criadas nas mesmas condições e com a mesma idade num estudo de campo clínico que incluiu 37.000 aves em granjas que utilizavam métodos de criação mais tradicionais (10). A integridade da bolsa de Fabricius após a vacinação com VAXXITEK HVT+IBD foi igualmente demonstrada, no contexto de estudos clínicos de campo realizados em frangos no Marrocos (11). Foi observada melhoria na integridade da bolsa de Fabricius com o uso de VAXXITEK HVT+IBD, em comparação com programas de vacinação no campo baseados em vacinas vivas de Gumboro e um nível superior de soroconversão após vacinação contra a doença de Newcastle, demonstrando o benefício induzido pela vacinação com VAXXITEK HVT+IBD. isolamento e em frangos de campo vacinados com VAXXITEK HVT+IBD com um dia de idade. Foram colhidas duas penas da asa, por ave, para teste. Foi observada recuperação máxima do vírus vacinal nas amostras das penas por volta do 28º dia após a vacinação. A validação da técnica de amostragem de duas penas por ave foi baseada na especificidade e no limite de detecção da matriz da amostra. Numa segunda série de estudos na França, frangos Referências 1. Jay ML, Bizzini S, Duboeuf M, Goutebroze S, LeGros FX. Compatibility of a novel vector vaccine HVT-Gumboro with Newcastle and infectious bronchitis vaccination at one day of age. Cartaz. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p341. 2. Wong YS, Saint-Gerand AL, Liao GA, Toh PL, Lim CC, Lemiere S. Compatibility of VAXXITEK HVT+IBD with inactivated in oil emulsion Newcastle disease (ND) vaccine administered by sub-cutaneous route at day old using a challenge against very virulent infectious bolsa de Fabriciusl disease virus (vvIBDv) and using serology. Apresentação oral. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p167. 3. Perozo F, Villegas P, Fernandez R, Cruz J. Protection against variant strains conferred by the recombinant HVT-IBDV vaccine VAXXITEK HVT+IBD. Apresentação oral. 58ª Western Poultry Conference, Sacramento, CA, Estados Unidos da América. 2009; p85-86. 4. Perozo F, Villegas P, Purvis L, Fernandez R, Cruz J. Efficacy of Single dose recombinant HVT-IBDV vaccination (VAXXITEK HVT+IBD) against classical and variant IBDV strains. Apresentação oral. AAAP/ AMVA Symposium, Seattle, WA, Estados Unidos da ® Número 2 Custo de medicamentos (em pesos colombianos) 5. Monitoria de vacinação e diagnóstico da infecção no campo Um ensaio de PCR quantitativo (qPCR) da vacina VAXXITEK HVT+IBD com uma sonda de detecção foi desenvolvido e validado para monitoria do uso da vacina VAXXITEK HVT+IBD em frangos (12). O alvo foi uma zona específica da estrutura entre o ligante e o gene do vírus IBD VP2 (243 pares de bases de comprimento). Um primeiro conjunto de estudos clínicos foi realizado em frangos convencionais criados em unidades de BOLETIM INFORMATIVO TÉCNICO DA MERIAL América. 2009; p65. 5. Perozo F, Villegas P, Fernandez R, Cruz J, Pritchard N. Efficacy of single dose recombinant herpesvirus of turkey infectious bolsa de Fabriciusl disease virus (IBDV) vaccination against a variant IBDV strain. Avian Dis., 2009, 53:624-628. 6. van Nijhuis L, de Wit JJ, Westerbeek FR, Ratsma J, Molenaar RJ, Prandini F. Evaluation of the use of VAXXITEK HVT+IBD in day-old pullets under Dutch field conditions. Cartaz. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p340. 7. Rautenschlein S, Simon B, Jung A, Pöppel M, Prandini F, Lemiere S. Protective efficacy of VAXXITEK HVT+IBD in commercial layers and broilers against challenge with very virulent infectious bolsa de Fabriciusl disease virus. Apresentação oral. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p166. 8. Montiel E. Vaccination of broiler breeders against infectious bolsa de Fabriciusl disease: seroconversion, progeny protection and impact of breeder revaccination with live vaccines. Apresentação oral. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, FTA é uma marca comercial registada da Whatman Limited nos Estados Unidos da América e em outros países. Marrocos, 2009; p220. 9. Botero LA, Fernandez R, Rojo F, Orrego JC, Lemiere S. Colombian chicken meat industry performance further to the use of VAXXITEK HVT+IBD vector vaccine. Apresentação oral. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p169. 10. Körösi L, Povazsan J, Penzes L, Sari I. Field results of VAXXITEK HVT+IBD vaccination in coloured birds in Hungary. Cartaz. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p339. 11. El Houadfi M, Cluzel B, Rawi T. Does VAXXITEK HVT+IBD vector vaccine improve antibody response to ND vaccines? Cartaz. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p356. 12. Lemiere S, Bublot M, de Saint-Vis B, Le-Gros FX, Dancer A, Bollart A, Carlotti A. Validation of VAXXITEK HVT+IBD vaccine intake in chickens using vHVT13-specific qPCR by processing different tissue samples. Apresentação oral. 16º Congresso da World Veterinary Poultry Association, Marraquexe, Marrocos, 2009; p165. -4- convencionais criados em condições de campo foram vacinados com VAXXITEK HVT+IBD no primeiro dia de idade. Em condições laboratoriais, foram colhidas amostras de sangue e, posteriormente, extraídas camadas leucoplaquetárias após centrifugação, e foram igualmente analisadas amostras de tecidos da bolsa de Fabricius e do baço aos 4, 8, 11, 15 e 18 dias de idade. Este estudo constatou que a replicação do vírus da vacina podia ser detectada em tecidos do baço, quer frescos ou transferidos em cartões FTA® para expedição, a partir dos 11 dias de idade. Tecidos frescos da bolsa de Fabricius ou de camada leucoplaquetária puderam igualmente ser analisados por PCR quantitativo (qPCR) do vírus vacinal a partir dos 11-15 dias de idade. Tal qual a primeira edição da VAXXITEK NEWS, esta apresenta uma visão atualizada sobre as recentes publicações sobre a VAXXITEK HVT+IBD, a vacina vetorial da Merial contra a Doença de Marek e Gumboro. Estudos de compatibilidade realizados comprovaram a utilização concomitante com vacinas vivas para Bronquite Infecciosa e para a doença de Newcastle e de vacinas inativadas para a doença de Newcastle em países onde os vírus velogênicos constituem um risco. Isto facilita o desenvolvimento de programas abrangentes de vacinação, de acordo com as restrições epidemiológicas locais, conforme solicitado pela indústria avícola. Esta edição mostra que a proteção induzida pela VAXXITEK HVT+IBD contra o surgimento de variantes de IBD, tais como a variante E, também foi identificada fora dos Estados Unidos . Também estão incluídas atualizações sobre os benefícios da utilização da VAXXITEK HVT+IBD nas futuras poedeiras comerciais e reprodutoras de frango de corte. Os benefícios da VAXXITEK HVT+IBD na produção de frango de corte foram também objeto de atenção a nível mundial no último ano. Foram feitos progressos relativos à utilização de novas tecnologias no desenvolvimento de ferramentas de diagnóstico, tais como PCR para a recuperação da cepa vacinal com o uso de iniciadores produzidos especificamente para detectar a estrutura do vetor. Como resultado, a recuperação relativa ao vírus da vacina VAXXITEK HVT+IBD após vacinação foi validada, proporcionando-nos mais uma forma de garantir a rastreabilidade da vacina, em adicional aos métodos mais tradicionais, como é o caso da sorologia. Esperamos que aprecie a leitura da segunda edição da VAXXITEK NEWS. Stéphane LEMIÈRE Diretor Técnico da Avian Global MERIAL Saúde Animal Ltda. Avenida Carlos Grimaldi, 1701 – 4º andar 13091-908 Campinas – SP Tel.: (19) 3578-5018 - Fax: (19) 3578-5101 www.merial.com.br VAXXITEK® é uma marca registada da Merial nos Estados Unidos e em outros países. -1- VAXXITEK HVT+IBD, uma vacina com ampla proteção contra Gumboro para frangos de corte, poedeiras e matrizes Esta edição analisa os artigos publicados sobre a VAXXITEK HVT+IBD. Os estudos mostram que a associação de vacinas contra quatro das principais patologias aviárias; doença de Marek (MD), doença de Newcastle (ND), Bronquite infecciosa (IB) e Doença de Gumboro (IBD); é possível a partir da vacinação in ovo ou no primeiro dia de idade, recorrendo a uma combinação da vacina VAXXITEK HVT+IBD e de vacinas tradicionais contra a doença de Newcastle e Bronquite Infecciosa, bem como a vacina inativada para a doença de Newcastle. Está disponível uma atualização sobre proteção contra o surgimento de variantes do vírus de Gumboro, tais como a variante E. A VAXXITEK HVT+IBD pode ser recomendada para a vacinação de futuras poedeiras comerciais, resolvendo o dilema de segurança/eficácia da vacinação viva contra a doença de Gumboro nestas aves, que são particularmente susceptíveis a este vírus. A VAXXITEK HVT+IBD pode também ser recomendada como preparação para futuras reprodutoras, antes da revacinação com vacinas inativadas contra a doença de Gumboro. Provou-se que é possível a rastreabilidade da vacinação utilizando métodos alternativos à sorologia para a recuperação direta e específica do vírus vacinal em órgãos - alvo, nos quais esta vacina se multiplica, tais como o canhão da pena, com início na terceira semana de idade. Novas provas têm sido desenvolvidas, atestando que a VAXXITEK HVT+IBD pode ser utilizada em todos os tipos de produção avícola, incluindo frango caipira (colour broilers na China). 1. Introdução A VAXXITEK NEWS nº1 tinha como objetivo sintetizar a literatura científica disponível na época sobre a vacina. Esta destacava as principais características da VAXXITEK HVT+IBD, a sua segurança e a proteção contra duas das principais doenças imunossupressoras que têm um impacto significativo na indústria avícola, a doença de Marek e a Doença de Gumboro, incluindo uma variedade de vírus da doença de Gumboro, entre os quais cepas clássicas, muito virulentas e variantes. Esta edição da VAXXITEK NEWS dá sequência às análises de 2009, um ano produtivo em publicações sobre a VAXXITEK HVT+IBD. A vacina VAXXITEK HVT+IBD tem sido cada vez mais utilizada a nível mundial em vários locais, incluindo mais recentemente, na Ásia. 2. A VAXXITEK HVT+IBD, um vacina compatível com outras vacinas, de modo a adequar-se aos diferentes programas de vacinação 2.1.Compatibilidade com vacinas vivas administradas em pintos de um dia de idade. A compatibilidade da VAXXITEK HVT+IBD, injetada por via subcutânea juntamente com vacinas vivas contra a Doença de Newcastle e a Bronquite Infecciosa aplicadas via spray, foi estudada em pintos de um dia e comprovada em três ensaios (1). No primeiro ensaio foram vacinados frangos com uma dose da vacina AVINEW (ND) e H120 (IB) simultâneo com uma dose de VAXXITEK HVT+IBD. Pintos não vacinados da mesma origem foram utilizados como controle. Vinte aves de cada grupo foram colocadas em grupos separados aos 21/22 e 42 dias de idade para inoculação do vírus da Doença de Newcastle e Bronquite Infecciosa, conforme os respectivos requisitos da Farmacopeia Europeia. O segundo e terceiro ensaios tinham como objetivo analisar a proteção contra a Doença de Gumboro e a Doença de Marek em aves livres de patógenos específicos (SPF). No segundo ensaio, 80 pintos com um dia de idade foram vacinados da seguinte forma: 30 pintos receberam apenas uma dose da vacina VAXXITEK HVT+IBD, 20 pintos receberam uma dose da vacina combinada contra Doença de Newcastle/ Bronquite Infecciosa e 30 pintos receberam ambos os tratamentos. As aves foram inoculadas 14 dias após a vacinação com a cepa virulenta clássica da Doença de Gumboro, a cepa F52/70. No terceiro ensaio, três grupos de 36 aves com um dia de idade receberam os mesmos tratamentos de vacinação que os três grupos no ensaio 2, contudo foram inoculados 9 dias depois com a cepa virulenta da Doença de Marek, a cepa GA22. Foi realizada a observação macroscópica pós-inoculação das aves aos 79 dias de idade. Observou-se a conversão sorológica e proteção contra as respectivas inoculações: Doença de Gumboro (Tabela 1) e Doença de Marek (Tabela 2), em todos os três tratamentos. Em grupos vacinados, mais de 90% das aves ficaram protegidas. Não foram observados quaisquer efeitos negativos resultantes da combinação das vacinas. Concluindo, estes três estudos provam que a vacinação contra quatro das principais patologias aviárias, Marek, Newcastle, Bronquite e Gumboro , é possível em aves com um dia de idade, recorrendo a uma combinação de VAXXITEK HVT+IBD e vacinas clássicas contra as doenças de Newcastle e Bronquite Infecciosa. 2.2.Compatibilidade com a vacina inativada para a doença de Newcastle administrada em aves com um dia de idade Para estudar a compatibilidade entre a VAXXITEK HVT+IBD e uma vacina inativada com adjuvante oleoso contra a doença de Newcastle em aves com um dia de idade, foi administrada em aves SPF uma dose comercial de VAXXITEK HVT+IBD e GALLIMUNE® ND. As vacinas foram administradas independentemente por via subcutânea, inoculando-as através de duas agulhas separadas em simultâneo (vacinadora ACCUVAC TWINSHOT®, Merial Select, Inc, Gainesville, GA, USA) (2). As aves foram então inoculadas com um vírus muito virulento da doença de Gumboro, cepa Winterfield. Para avaliar o efeito da vacinação simultânea neste caso, comparou-se o grupo de aves vacinadas com um grupo vacinado apenas com uma dose comercial de VAXXITEK HVT+IBD. Foi utilizado como controle um grupo de aves não vacinadas do mesmo lote e incubação. Todas as aves do grupo controle morreram decorrentes da infecção de Gumboro quando inoculados, validando assim a inoculação. Este estudo demonstrou não haver interferência da vacinação simultânea com a VAXXITEK HVT+IBD e a vacina contra a ND relativamente à inoculação com o vírus da IBD. O estudo foi também concebido para demonstrar o efeito da vacinação simultânea na soroconversão contra a doença de Newcastle e doença de Gumboro. A sorologia foi realizada semanalmente após a vacinação, de forma a comparar aves vacinadas com esta combinação com as aves nas quais foi administrada a vacina contra a doença de Newcastle ou apenas a VAXXITEK HVT+IBD. Os níveis de anticorpos contra a doença de Newcastle foram determinados através do teste de inibição da hemaglutinação (HI) e os níveis de anticorpos contra a doença de Gumboro foram determinados utilizando o kit de teste ELISA de PROFLOK® Plus IBD para a monitoria específica do uso da vacina VAXXITEK HVT+IBD. Os resultados sorológicos avaliados pelo título médio do teste de inibição da hemaglutinação (HI) para a doença de Newcastle, e do ELISA para a doença de Gumboro, demonstraram que os títulos médios dos frangos vacinados simultaneamente com a VAXXITEK HVT+IBD e a vacina contra a doença de Newcastle, ou apenas com uma das vacinas, não variaram muito durante a monitoria ao longo do estudo. Este estudo demonstrou que é possível a vacinação simultânea com a VAXXITEK HVT+IBD e a vacina contra a doença de Newcastle, pois não foram observadas diferenças significativas quanto at proteção contra a inoculação de Gumboro entre aves vacinadas simultaneamente e aves em que foi administrada apenas a VAXXITEK HVT+IBD. 3. VAXXITEK HVT+IBD: Alta eficácia demonstrada através de estudos experimentais em diferentes sistemas de produção avícola 3.1. P revenção de infecções com variantes emergentes da doença de Gumboro A questão da proteção contra o surgimento de variantes do vírus da doença de Gumboro resultante da vacinação com VAXXITEK HVT+IBD tem sido levantada em várias partes do mundo, como por exemplo na América Latina. Foi estudada a proteção contra a variante E do vírus da doença de Gumboro, após a vacinação com VAXXITEK HVT+IBD administrada em pintos SPF com um dia de idade e pintos comerciais (3,4,5) foram realizadas inoculações aos 18 e 28 dias de idade, recorrendo à administração via intraocular de 103,2 EID50/0,03 mL da variante E do vírus. A relação de bolsa de Fabricius para peso corporal e o resultado da histopatologia da bolsa de Fabricius foram identificados aos 4 e 7 dias pós-inoculação. Determinou-se que a relação de bolsa de Fabricius para peso corporal é significantemente mais alta (p < 0,05), e os resultados de lesões da bolsa de Fabricius são significantemente mais baixos em aves vacinadas em comparação com aves não vacinadas e controles não inoculados, independentemente da idade do desafio (Tabela 3). A cepa variante isolada e cujo genótipo foi determinado nos Estados Unidos, bem como em outras partes do mundo, apresenta uma variação antigênica que afeta alguns epítopos neutralizantes na proteína de capsídeo VP2. O gene da VP2 expresso na VAXXITEK HVT+IBD provém de uma cepa clássica da doença de Gumboro (Faragher 52/70); o fato de uma VP2 da cepa de Gumboro clássica fornecer proteção contra uma variante da doença de Gumboro, sugere que os epítopos da VP2 envolvidos na proteção estão conservados entre a cepa clássica e a variante. Os níveis de proteção observados neste ensaio sugerem que, em condições experimentais, a VAXXITEK HVT+IBD fornece uma proteção adequada contra a cepa da variante E. 3.2. E laboração de um programa de vacinação para futuras poedeiras comerciais O nível de proteção resultante da vacinação de futuras poedeiras comerciais constitui uma preocupação importante, especialmente no contexto de surtos de vírus muito virulento da doença de Gumboro (vvIBDV), Sorologia Inoculação de Gumboro Registro de ND (teste HI)2 título médio IB (SN) % positivo Registro de IBD (SN)10 título médio Proteção VAXXITEK HVT+IBD Combinação de vacinação contra IB/ND com VAXXITEK HVT+IBD ≤ 1.0 5.1 4.6 0% 57% 60% 3.1 < 0.5 3.0 0% (5 mortos/10; 5/10 com resultado de lesões = 5) 100% (0/20; resultado de lesões = 0 para todas as amostras) 100% resultado de lesões = 0 Número de infectados/total (0/20; para todas as amostras) HI = Inibição da hemaglutinação. - SN = Soroneutralização Tabela 1 – Compatibilidade entre a vacinação contra IB/ND e o uso da vacina VAXXITEK HVT+IBD avaliada por sorologia e proteção contra a inoculação da IBD (cepa Faragher 52/70) em aves SPF realizada aos 14 dias de idade. Sorologia Inoculação de Marek Registro de ND (teste HI)2 título médio Registro de IB (SN)10 título médio Registro de IBD (SN)10 título médio Número de infectados/total % proteção relativa (Ph Eur) VAXXITEK HVT+IBD Vacinação contra doença de Newcastle e Bronquite Infecciosa Combinação de vacinação contra IB/ND com VAXXITEK HVT+IBD ≤ 1.0 2.6 2.9 negativo 1.75 2.0 4.4 negativo 4.3 1/30 95.4% 26/36 0% 1/35 96% HI = Inibição da hemaglutinação. - SN = Soroneutralização. - Ph Eur = Farmacopeia Europeia. Tabela 2 - Compatibilidade entre a vacinação contra doença de Newcastle e Bronquite Infecciosa e o uso da vacina VAXXITEK HVT+IBD avaliada pela sorologia e proteção contra a inoculação da doença de Marek (cepa GA22) em aves SPF realizadas aos 9 dias de idade. VAXXITEK, GALLIMUNE e ACCUVAC TWINSHOT são marcas comerciais registradas da Merial nos Estados Unidos da América e em outros países. ®AVINEW é uma marca comercial registrada da Merial no Reino Unido e em outros países. -2- PROFLOK® Plus IBD é uma marca comercial registrada da Synbiotics nos Estados Unidos da América e em outros países. após vacinação com VAXXITEK HVT+IBD com resultados iguais a zero. As relações de bolsa de Fabricius para o peso corporal confirmaram que a vacina não havia provocado danos no tecido da bolsa de Fabricius. Na 16ª semana, todos os lotes de aves tinham um peso corporal acima do padrão. A proteção clínica contra vírus muito virulento da doença de Gumboro foi assim demonstrada sob condições de ensaio no campo em lote de aves vacinadas em áreas contaminadas e também demonstrada em frangos inoculados em condições laboratoriais contra um vírus muito virulento da doença de Gumboro (7). Cada vez mais, a VAXXITEK HVT+IBD pode ser considerada como uma vacina de referência para controle da doença de Gumboro na produção de poedeiras. 3.3. Elaboração de um programa de vacinação para futuras reprodutoras de frango de corte Outra preocupação é o nível de proteção induzido pela vacinação em futuras reprodutoras, especialmente no contexto de preparação para o programa vacinal com base no uso de vacinas inativadas de Gumboro. Também foi levantada a questão da transmissão de anticorpos maternos. Para responder a esta questão, foram vacinadas, via subcutânea, reprodutoras com um dia de idade com VAXXITEK HVT+IBD, numa estação experimental nos Estados Unidos (8). Um grupo recebeu a vacina HVT+SB1 como controle. Na 20ª semana de idade, as aves foram divididas em grupos e vacinadas via intramuscular no peito com várias doses de vacinas inativadas contra a doença de Gumboro. Foram colhidas amostras sorológicas na 20ª, 26ª, 30ª, 40ª, 50 ª e 60ª semana de idade, e estas foram testadas quanto à presença de anticorpos do vírus da doença de Gumboro utilizando testes ELISA e de soroneutralização (SN). Na 30ª e 50ª semanas de idade, a progênie com 14 dias de idade dos diferentes grupos de reprodutoras foi inoculada via intramuscular com os isolados patogênicos do vírus da doença de Gumboro dos Estados Unidos IBD-E, AVS-SU e AVS-DL (103,5 EID50/dose/ave) para avaliar a imunidade materna. A proteção contra a inoculação foi avaliada através do cálculo da relação da bolsa de Fabricius Inoculação precoce (18 dias de idade)* Tratamento Vacinação contra doença de Newcastle e Bronquite Infecciosa visto que não podem ser recomendadas vacinas vivas menos atenuadas contra a doença de Gumboro, devido à extrema susceptibilidade deste tipo de aves ao vírus da doença de Gumboro. Na Holanda, por exemplo, foram relatados surtos graves da doença de Gumboro em lotes de frangos que tinham sido parcialmente vacinados contra o vírus da doença de Gumboro (IBDV) (6). Isto sugeriu uma falta de proteção com vacinas vivas intermediárias e intermediárias plus, o que pode ter sido causado devido a uma aplicação inadequada e/ou vacinação em aves demasiadamente jovens. Foi implementado um ensaio de campo para testar a segurança e eficiência da VAXXITEK HVT+IBD em condições de campo na Holanda. No estudo, 250.000 lotes de frangos comerciais vermelhos e brancos com um dia de idade foram vacinados por via subcutânea com a VAXXITEK HVT+IBD e por via intramuscular com a vacina viva Rispens contra a doença de Marek, sendo posteriormente colocados em seis diferentes granjas. Foram monitorados os seguintes parâmetros: sinais clínicos, resposta sorológica para IBD (utilizando os kits de teste ELISA PROFLOK IBD e Plus IBD), relação de bolsa de Fabricius para peso corporal, resultado de lesões histológicas na bolsa de Fabricius (método de Muskett), detecção de cepas de campo do vírus da doença de Gumboro (IBDV) através de RT-PCR e desempenho zootécnico durante a fase de criação. Não foram observados sinais clínicos da doença de Gumboro durante a fase de recria. A RT-PCR foi negativa em relação ao vírus muito virulento da doença de Gumboro (vvIBDV) ou a quaisquer outras cepas de campo, mas ligeiramente positiva, devido à detecção do gene VP2 após o uso da vacina VAXXITEK HVT+IBD. A sorologia foi positiva em testes ELISA para Gumboro. A produção de anticorpos induzida pela vacinação com VAXXITEK HVT+IBD foi detectada pelo kit PROFLOK Plus IBD, ao passo que o teste ELISA para Gumboro tradicional demonstrou uma resposta posterior provavelmente devido à exposição no campo ao vírus de Gumboro. O exame histológico não demonstrou qualquer dano ao tecido da bolsa de Fabricius Inoculação Relação da bolsa de Fabricius para peso corporal** Frangos Aves SPF comerciais Variante E da doença VAXXITEK HVT+IBD de Gumboro E da doença Controle não vacinado (positivo) Variante de Gumboro Controle não vacinado (negativo) Nenhuma inoculação Desafio tardio (28 dias de idade)* Resultados de lesão da bolsa de Fabricius Frangos Aves SPF comerciais Relação da bolsa de Fabricius para peso corporal** Frangos Aves SPF comerciais Resultados de lesão da bolsa de Fabricius Frangos Aves SPF comerciais 4.68a 2.53a 2.43b 1.75b 5.49a 1.69a 2.10b 1.44b 1.76b 0.85b 4.00a 3.95a 1.64b 0.80b 4.00b 4.00a 6.03 1.78 2.00 2.00 5.46 1.98 1.70 1.85b a a b b a a b * Cada valor representa a média de 20 aves por tratamento. - ** Relações da bolsa de Fabricius para peso corporal calculadas utilizando a seguinte fórmula = peso da bolsa de Fabricius/peso corporal x 100 a, b, c Letras diferentes mostram uma diferença significativa entre valores / Tabela 3 - Relação da bolsa de Fabricius para peso corporal e resultados de lesão da bolsa de Fabriciusl (4 e 7 dias após inoculação) em frangos comerciais e aves SPF não vacinados e vacinados com VAXXITEK HVT+IBD inoculados com a cepa variante E aos 18 ou 28 dias de idade. Resultados de teste ELISA % de proteção contra inoculação Títulos médios Coeficiente de variação Modelo de 30 50 geométricos (GMT) (CV) inoculação da doença semanas semanas 20 semanas 30 semanas 50 semanas 30 semanas 50 semanas de Gumboro (IBD) Programa de vacinação de reprodutoras 1 dia VAXXITEK HVT+IBD Vacina inativada 0,5 mL 5008 7416 17.2 22.5 VAXXITEK HVT+IBD Vacina inativada 1,0 mL 5956 7435 17.2 15.9 VAXXITEK HVT+IBD Nenhum N/D 7713 N/D 12.8 HVT+SB1 Nenhum 4 6 187.9 145.3 IBD-E AVS-SU AVS-DL N/D IBD-E AVS-SU AVS-DL N/D IBD-E AVS-SU AVS-DL N/D IBD-E AVS-SU AVS-DL N/D 95% 100% 95% 100% 100% 95% 100% 100% 94% 50% 100% 100% 88% 100% 88% 100% N/D N/D 19% 5% 9% 100% 0% 6% 6% 100% N/D = Não disponível. Tabela 4 - Títulos de anticorpos ELISA para detecção da doença de Gumboro e proteção contra inoculação com vários isolados de vírus da doença de Gumboro em pintos de reprodutoras que receberam apenas VAXXITEK HVT+IBD ou em combinação com vacinas inativadas de Gumboro. -3- e peso corporal 7 dias após a inoculação. Amostras de soro de pintos de um dia de reprodutoras vacinadas com um programa padrão de Gumboro foram incluídas no estudo como referência da indústria. Na 60ª semana de idade, as reprodutoras vacinadas e não vacinadas contra a doença de Gumboro receberam uma vacina viva de Gumboro. Foram colhidas amostras de soro na 4ª e 8ª semana após a vacinação para medir os anticorpos de Gumboro utilizando o testes ELISA e de soroneutralização. A progênie das reprodutoras que recebeu a vacina VAXXITEK HVT+IBD demonstrou uma proteção superior contra a inoculação com os vários isolados testado do vírus da doença de Gumboro. Reprodutoras vacinadas com a VAXXITEK HVT+IBD apresentaram altos níveis de anticorpos contra a doença de Gumboro entre a 20ª e 60ª semana de idade (Tabela 4), apesar dos níveis de anticorpos diminuírem por volta da 50ª semana de idade com programas comerciais convencionais usados nos Estados Unidos. Em conclusão, a VAXXITEK HVT+IBD pode ser considerada uma vacina de referência para a primovacinação contra a doença de Gumboro em reprodutoras de frango de corte.
