VISITECT DENGUE Ref OD136

VISITECT DENGUE
Ref
OD136
Teste rápido para a detecção de anticorpos IgG e IgM da Dengue
Em Soro Humano, Plasma ou Sangue Total
Armazenar de 4ºC a 30ºC. NÃO CONGELAR.
Somente para uso em diagnóstico in vitro.
INTRODUÇÃO E USO PREVISTO
ARMAZENAMENTO
O vírus da Dengue (sorotipos 1 – 4) pertence à Família Flaviviridae, e
tem sido observado em mais de 100 regiões tropicais e subtropicais
do mundo ameaçando 2/5 da população mundial. A infecção pelo
vírus da Dengue é considerada significante em termos de incidência
da enfermidade nas regiões, mortalidade e custo econômico
associado com os 100 milhões de casos estimados de dengue que
ocorrem anualmente em todo o mundo. O vírus da Dengue é
transmitido pela espécie de mosquito Aedes aegypti e Aedes
albopictus. A Dengue se apresenta tipicamente como uma febre de
início súbito com dor de cabeça, dor retro-orbitária, dor nas costas e
nos membros (febre quebra-ossos), linfoadenopatia e manchas
máculo-papular. Os pacientes diagnosticados com dengue em áreas
endêmicas geralmente têm infecção secundária, considerando que
pacientes em áreas não endêmicas são comumente diagnosticados
com infecção primária. A resposta do anticorpo específico para o
vírus da Dengue permite o sorodiagnóstico, a diferenciação entre as
infecções de dengue primárias e secundárias e a detecção de
condições potencialmente ameaçadoras à vida como a Febre
Hemorrágica do Dengue (FHD) e Síndrome do Choque do Dengue
(SCD).
O VISITECT DENGUE é um teste imunocromatográfico qualitativo
para a detecção rápida e simultânea de anticorpos IgM e IgG para
todos os quatro sorotipos do vírus da Dengue em soro, plasma ou
sangue total humano dentro de 20 minutos. O teste pode ser usado
como uma triagem para a infecção viral por Dengue e como um
auxílio para o diagnóstico diferencial de infecções primárias de
Dengue auto-limitantes e de infecções secundárias de Dengue
potencialmente fatais em conjunto com outros critérios.
O VISITECT DENGUE é um teste rápido imunocromatográfico que
utiliza antígenos recombinantes imunodominantes altamente
específicos do envelope do vírus da Dengue “Env”, como um auxiliar
para o diagnóstico diferencial da infecção pelo vírus da Dengue.
Somente para uso profissional.
PRINCÍPIO DO TESTE
O VISITECT DENGUE utiliza o princípio da Imunocromatografia, um
imunoensaio de dois sítios em uma membrana. O anticorpo
monoclonal anti-IgM humana e o anticorpo monoclonal anti-IgG
humana são retidos na membrana de nitrocelulose como duas linhas
de teste individuais denominadas com G (IgG) e M (IgM) dentro da
janela de teste. Como a amostra do teste corre ao longo da
membrana que está dentro do cassete de teste, uma proteina do
envelope do vírus da Dengue recombinante revestida com conjugado
de ouro coloidal se liga com os anticorpos específicos (IgG e/ou IgM)
do vírus da Dengue, se eles estiverem presentes na amostra. Esse
complexo se desloca ao longo da membrana para a região de teste
onde é retido pelo anticorpo monoclonal anti-IgG humana e/ou pelo
anticorpo monoclonal anti-IgM humana revestidos na membrana
levando à formação de uma linha de cor vermelha, que confirma um
resultado positivo do teste. A ausência dessas linhas vermelhas
indica um resultado negativo. Uma linha vermelha na região de
Controle (C) aparece quando o teste foi realizado corretamente pois,
a IgG anti-dengue de coelho revestida com conjugado de ouro
coloidal se liga com o anticorpo anti-IgG de coelho que é retido na
membrana de nitrocelulose, independente da presença ou ausência
de anticorpos anti-dengue na amostra, servindo assim para validar o
desempenho do teste.
CONTEÚDO
Os reagentes devem ser armazenados em temperaturas de
4oC a 30oC.
O kit apresentará o desempenho de acordo com as
especificações até a data de validade indicada pelo fabricante,
determinada a partir da data de fabricação do produto, e
indicada no kit e componentes. A data de validade é o último
dia do mês indicado nos rótulos da embalagem e do kit. Não
utilize reagentes após o prazo indicado na embalagem.
A exposição dos reagentes à temperaturas excessivas deve
ser evitada. Não expor à luz solar direta.
NAÕ CONGELE O DISPOSITIVO pois isso irá causar danos
irreversíveis.
COLETA E PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
Soro: Coletar uma amostra de sangue venoso do paciente e
deixar a formação e retração do coágulo. Centrifugar a
amostra de sangue coagulado e coletar soro límpido. São
necessárias amostras de soro frescas.
O soro deve ser armazenado à 2 – 8 oC por até 48 horas
antes do teste Se as amostras tiverem que ser armazenadas
por um período maior, armazene-as à – 20ºC por até 6
semanas. As amostras descongeladas devem ser misturadas
para assegurar a homogeneização antes do teste.
Evitar congelar e descongelar repetidas vezes as amostras
pois isso pode provocar falsos resultados.
Plasma: Coletar uma amostra de sangue venoso do paciente e
colocar no frasco de coleta de plasma. Centrifugar a amostra e
coletar o plasma límpido. São necessárias amostras de plasma
frescas.
A amostras de plasma devem ser armazenadas à 2 – 8 oC por
até 72 horas antes do teste.
Amostras de sangue total frescas podem também serem
usadas com esse kit.
Não usar amostras contaminadas ou lipêmicas para o teste
pois podem afetar os resultados.
PREPARAÇÃO DO REAGENTE
Os dispositivos e amostras devem estar na temperatura
ambiente (20 – 25 ºC) e serem misturados suavemente antes
do uso.
No caso da embalagem ter sido armazenada à 4 – 8 oC, deixe
o dispositivo em repouso por pelo menos 30 minutos para que
o mesmo fique na temperatura ambiente.
LIMITAÇÕES DE USO
A utilização de outras amostras que não sejam soro, plasma
ou sangue total não foi validada nesse teste.
Não existe protocolo de reutilização para esse produto.
Reação sorológica cruzada dentro do grupo flavi-vírus (vírus
da Dengue, encefalite de St. Louis, encefalite Japonesa, febre
do Nilo Ocidental e febre Amarela) é comum.
Um resultado baixo ou suspeito de ser positivo deve ser
reavaliado. O diagnóstico não deve ser feito somente com
base em um único teste clínico. Ao realizar a interpretação do
teste é altamente recomendado levar em consideração todos
os dados clínicos.
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OD136
PROCEDIMENTO DO TESTE
Test
Device
Composto por uma membrana pré-dispensada com uma proteína
recombinante imunodominante do envelope do vírus da Dengue
revestida com conjugado de ouro coloidal e IgG anti-dengue de
coelho revestida com conjugado de ouro coloidal. Anti-IgG humana
monoclonal na região de teste ‘G’, Anti-IgM humana monoclonal na
região de teste ‘M’ e anticorpo anti-IgG de Coelho na região de
controle ‘C’.
Embalagem apropriada contra umidade.
Buf
Tampão Diluente. Solução de tampão fosfato.
Abra a embalagem e retire o dispositivo. Uma vez
aberto, o dispositivo deve ser usado imediatamente.
2.
Usando uma pipeta capilar não usada e limpa ou uma
pipeta de microtitulação, adicione 10 µL no local
quadrado de amostra marcado com “S”. O volume de
10 µL é indicado na pipeta capilar através de uma
linha preta.
3.
Adicione 4 gotas (100 µL) de Tampão no local circular
segurando o frasco conta-gotas de plástico
verticalmente.
4.
Leia os resultados ao final de 20 minutos. Não leia os
resultados após 20 minutos, pois leituras tardias
podem gerar falsos resultados.
5 ml
Pipeta Capilar (10 L de volume indicado pela linha preta). 25
Instrução de Uso
1.
1
MATERIAIS REQUERIDOS MAS NÃO FORNECIDOS
Pipeta de microtitulação (10 L).
PRECAUÇÕES
Os reagentes VISITECT não contêm substâncias perigosas de
acordo com as regulamentações atuais da UK Chemicals
(Informações Perigosas e Embalagem para Fornecimento).
Todos os reagentes devem, entretanto, serem tratados como
potenciais riscos biológicos para utilização e descarte. O
descarte final deve ser realizado de acordo com a legislação
local. Não ingerir.
VISITECT DENGUE. O tampão diluente contém Azida Sódica
0.095% como conservante, que pode ser tóxica se ingerida. A
Azida Sódica pode reagir com encanamentos de chumbo e cobre e
formar sais altamente explosivos. No descarte, utilize grandes
quantidades de água.
RESULTADOS E INTERPRETAÇÃO
DADOS DE AVALIAÇÃO
Resultado Negativo:
Em um estudo, 100 amostras positivas conhecidas e 300 amostras negativas conhecidas como
definidas pela condição clínica, HI e EIA foram testados com o VISITECT DENGUE. Os resultados
obtidos foram os seguintes:
HI Positivo
EIA Positivo
Total
G
M
C

S
VISITECT DENGUE
HI Negativo
Dengue Clínica
Adicional
Negativa
Encefalite
Japonesa
Positiva
Febre Amarela
Positiva
Malária
(P. falciparum)
Positiva
Malária
(P. vivax)
Positiva
Total
G
M

S
Resultado Positivo:
C
9
0
9
Amostras
Totais
Sensibilidade
168
22
190
94.64%
100%
95.26%
Amostras
Totais
Especificidade
+
14
225
239
94.1%
0
18
18
100%
0
25
25
100%
0
25
25
100%
0
25
25
100%
VISITECT DENGUE
A presença de somente uma única linha de cor vermelha na região de controle “C” indica a ausência
de anticorpos específicos contra o vírus da Dengue ou que a quantidade de anticorpos está abaixo do
limite de detecção do teste.
1) Se, além da linha vermelha de controle “C”, aparecerem linhas na janela de teste na região “G”
(IgG) e na janela de teste na região “M” (IgM) significa que existe a presença de anticorpos IgG e IgM
específicos para o vírus da Dengue. (Infecção secundária aguda)
+
159
22
181
0
25
25
100%
14
343
357
96.08%
Sensibilidade 159/168 + 22/22 = 181/190 = 95.26%
Especificidade Total 343/357 = 96.08%
A Reprodutibilidade do VISITECT DENGUE é de 100% (+/- uma dupla diluição).
G
M
C

S
GARANTIA
Estas instruções de uso devem ser lidas atentamente antes da utilização do produto e as instruções
nela contidas devem ser rigorosamente cumpridas. A confiabilidade dos resultados do ensaio não
poderá ser garantida em caso de desvio às instruções.
GERENCIAMENTO DE RESÍDUOS
2) Se, além da linha vermelha de controle “C”, aparecer uma linha na janela de teste somente na
região “M” (IgM) indica a presença de anticorpos IgM específicos para o vírus da Dengue. (Infecção
primária aguda)
Seguir as disposições da resolução sobre o regulamento técnico para gerenciamento de resíduos de
serviços de saúde bem como outras práticas de biossegurança equivalentes, revisão em vigor
REFERÊNCIAS
1.

S
2.
3.
4.
6.
G
M
C
5.
7.
Technical advisory group on dengue haemorrhagic fever/dengue shock syndrome (1986).
Dengue Haemorrhagic fever diagnosis, treatment and control. Geneva, Suíça: Organização
Mundial de Saúde.
Monath, T. P. and Heinx F. X. (1996). Em B. N. fields, Knipe, D. M. e Howley, P. M. (Eds),
Virology, Lippincott-Raven, NY.Flaviviruses. 1016-1021.
Mikano Y et al. (1994). Studies on Serological cross-reaction in sequential Flavivirus infections.
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Sutherst, R. W. (1993). Arthropods as disease Vectors in a changing environment. In
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Innis, B. L., Nisilak, A., Nimmannitya S. et al. (1989). An enzyme-linked immunoabsorbent
assay to characterise dengue infections where dengue and Japanese encephalitis cocirculate.
Am. J. Trop. Med. 40:418-427
Ruechusatsawat, K. et al. (1993). Daily observation of antibody levels among dengue patients
detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Jpn. J. Trop. Med. Hyg. 22(1):9-12.
3) Se, além da linha vermelha de controle “C”, aparecer uma linha na janela de teste somente na
região “G” (IgG) indica a presença de anticorpos IgG específicos para o vírus da Dengue. (Infecção
secundária aguda / Infecção passada)
8.
O teste deve ser considerado inválido se a linha de controle não aparecer. Repita o teste com um novo
dispositivo.
8141 Issue 7A Revised December 2011 PORTUGUESE
 Omega Diagnostics Ltd 2011.
Dependendo da concentração dos anticorpos para a Dengue na amostra, os resultados positivos
podem começar a aparecer logo em 2 minutos; os resultados negativos devem ser confirmados
somente ao final de 20 minutos.
Não leia os resultados após 20 minutos pois leituras tardias podem gerar falsos resultados.
RECOMENDAÇÕES
Use uma alça de amostra separada para cada amostra para prevenir contaminação cruzada.
Antes de iniciar o teste todos os reagentes devem estar em temperatura ambiente ( 20 ºC a 25 ºC).
O kit deve ser manuseado apenas por pessoal qualificado.
Não utilize componentes do kit danificados ou contaminados.
OMEGA DIAGNOSTICS LTD.
Omega House, Hillfoots Business Village
Alva FK12 5DQ, Scotland, United Kingdom
[email protected]
www.omegadiagnostics.com
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