Trabalho - SOVERGS

AVALIAÇÃO DA MICROBIOTA CONJUNTIVAL BACTERIANA DE
CHELONOIDIS CARBONARIA (SPIX, 1824) MANTIDOS PARA CONSERVAÇÃO
EX-SITU NO PARQUE ZOOBOTÂNICO GETÚLIO VARGAS, SALVADOR, BAHIA,
BRASIL
EVALUATION OF BACTERIAL CONJUNCTIVAL MICROBIOTA OF
CHELONOIDIS CARBONARIA (SPIX, 1824) HELD FOR EX-SITU
CONSERVATION IN THE ZOOBOTANIC PARK GETULIO VARGAS,
SALVADOR, BAHIA, BRAZIL
Júlia Liger Freitas1; Ana Carla Oliveira Pinheiro2; Daniela Santos Almeida3; Juliana Kelly
Conceição Leite2; Alberto Vinícius Dantas Oliveira3; Marta Calasans Gomes3; Melissa
Hanzen Pinna4; Arianne Pontes Oriá4*
Resumo.
O objetivo do presente trabalho foi identificar a presença de bactérias existentes na microbiota
conjuntival de Chelonoidis carbonaria do Parque Zoobotânico Getúlio Vargas. Foram
avaliados treze indivíduos entre machos e fêmeas. As amostras foram coletadas com auxilio
de swab estéreis para isolamento e identificação de bacteriana. Os resultados obtidos mostram
o crescimento em 100 % das amostras, com total 102 colônias isoladas, sendo Difteróides
(20,6%), Bacillus sp. (14,71%) e Staphylococcus sp. (14,71%), os microrganismos mais
encontrados. O conhecimento dos microrganismos prevalentes na flora conjuntival de
Chelonoidis carbonaria pode ajudar na profilaxia e tratamento de doenças oculares nesta
espécie.
Palavras chave: Chelonoidis carbonaria, microbiota conjuntival, bactérias.
Sumary.
The objective of this study was to identify the presence of bacteria in the conjunctival
microbiota of Chelonoidis carbonaria from the Zoobotanic Park Getulio Vargas. Thirteen
individuals were evaluated between males and females. The samples were collected with the
help of sterile swab for the isolation and identification of bacteria. The results show growth in
100% of the samples, with total 102 isolated colonies, and diphtheroids (20.6%), Bacillus sp.
(14.71%) and Staphylococcus sp. (14.71%), the most common microorganisms found.The
knowledge of the microorganisms prevalent in the conjunctival flora chelonoidis carbonaria
can help prevent and treat eye diseases in this species.Chelonoidis carbonaria can help prevent
and treat eye diseases in this species.
Key words: Chelonoidis carbonaria, conjunctival microbiota, bacteria.
A flora conjuntival normal se mantém em equilíbrio nos animais clinicamente sadios.
Por isso, é importante estudá-la em todas as espécies, para que se possa intervir de maneira
mais adequada nos casos de infecções recidivantes e resistentes (EINCHENBAUM et al.,
1987). O presente trabalho teve como objetivo identificar as bactérias presentes no saco
conjuntival de jabutis da espécie Chelonoidis carbonária sem alterações oculares,
pertencentes ao plantel do Parque Zoobotânico Getúlio.
_______________________
1
Discente do Programa de Especialização sob a Forma de Residência em Medicina Veterinária - UFBA
Discente do Curso de Medicina Veterinária – UFBA
3
Pós-graduanda Fiocruz, Bahia
4
Médico (a) veterinário (a) do Parque Zoobotânico Getúlio Vargas, Salvador, Bahia
5
Docente EMEVZ – UFBA. *Av. Adhemar de Barros, Hospmev, número 500, Ondina, Salvador, Bahia. E-mail:
[email protected]
2
Foram utilizados treze animais da espécie Chelonoidis carbonaria (Spix, 1824),
adultos, machos, pertencentes ao plantel do Parque Zoobotânico Getúlio Vargas – Zoológico
de Salvador, e sem qualquer sinal sugestivo de alteração oftálmica. Após a contenção física
dos animais, a pálpebra inferior foi evertida e as amostras colhidas com o auxílio de pequenos
swabs de algodão hidrófilo estéreis, pressionados levemente, com movimentos rotatórios,
sobre a conjuntiva palpebral inferior de cada olho totalizando 26 amostras. Os swabs com o
material coletado foram armazenados em tubos de ensaio de vidro estéreis contendo meio de
transporte Agar Triptose, e mantidos sob refrigeração até a chegada ao Laboratório de
Bacterioses do Hospital Veterinário Prof. Renato de Medeiros Neto (HOSPMEV/UFBA),
Salvador, Bahia. Todas as amostras foram processadas em até quatro horas após a coleta,
valendo-se das técnicas de esgotamento com alça em meios sólidos (meio de enriquecimento
Agar sangue de carneiro a 6% e meio seletivo para bactérias gram-negativas Agar
MacConkey) e cultivo em meio líquido (meio de enriquecimento Caldo Triptose). As
amostras semeadas foram incubadas em estufa de aerobiose, a 37°C, por 24-48 horas. Após o
período de incubação, o crescimento bacteriano observado foi identificado tendo por base o
tamanho das colônias, cor, forma e aspecto, a presença ou não de hemólise em Agar Sangue,
características morfológicas, tintoriais e bioquímicas de acordo com técnicas rotineiras de
laboratório (KONEMAN et al., 2001). As amostras coletadas neste estudo foram obtidas a
partir de animais da mesma espécie, mantidos sob o mesmo sistema de manejo, em duas
estações do ano diferentes (inverno e verão).
No presente estudo, houve isolamento bacteriano em 100% das amostras (26/26). Do
total de 102 colônias isoladas, 66,66% (68/102) foram identificadas como gram-positivas e
33,34% (34/102) como gram-negativas, sendo Difteróides (20,6%), Bacillus sp. (14,71%) e
Staphylococcus sp. (14,71%), os microrganismos mais encontrados. Dentre as bactérias grampositivas, houve predomínio de Difteroides (30,9%), seguidos de Bacillus sp. (22,05%) e
Staphylococcus sp. (22,05%), Staphylococcus epidermidis e Micrococcus sp., ambos com
8,82% dos isolamentos, além de Streptococcus sp., Staphylococcus intermedius e bacilo
corineforme. Entre as bactérias gram-negativas, houve predomínio de Alcaligenes sp. e
Enterobacter harfnia, ambas representando 20,6% (7/34) das colônias. Foram isoladas ainda:
Enterobacter sp., Proteus miriabilis, Proteus morganii, Escherichia coli, Citrobacter sp.,
Pseudomonas sp., Klebsiella sp. e Serratia sp. Pôde-se perceber que, comparativamente, não
houve alteração significativa na composição da população bacteriana conjuntival destes
animais, entre as diferentes épocas do ano.
No presente estudo, houve isolamento bacteriano em 100% das amostras analisadas, assim
como também o foi em estudos anteriores conduzidos com microbiota conjuntival de cães
(SANTOS et al., 2009), gambás, guaxinins (PINARD et al., 2002) e castores canadenses
(CULLEN, 2003). À semelhança do que foi obtido neste trabalho, microrganismos grampositivos representaram a maioria dos isolados bacterianos em pesquisas realizadas com
diversas espécies silvestres (PINARD et al., 2002; MARTINS et al., 2007; MONTIANIFERREIRA et al., 2008; TUNTIVANICH et al., 2002; SWINGER et al., 2009). A
composição da flora bacteriana normal da conjuntiva pode sofrer influência de alguns fatores
como a estação do ano (BARNETT et al., 2002; TURNER, 2010), a localização geográfica, a
nutrição, as diferenças nas técnicas de cultivo (PRADO et al., 2005), a densidade
populacional (SWINGER et al., 2009) e o contato com outros animais (TUNTIVANICH et
al., 2002). A predominância de Bacillus, Staphylococcus sp e Difteroides já foi documentadas
em outros estudos conduzidos com da microbiota conjuntival de cães (MAGRANE,1971),
macacos-prego (RIOS NETO, 2010) e castores canadenses (CULLEN, 2003).
No presente estudo houve crescimento bacteriano na totalidade das amostras
analisadas. Bactérias gram-positivas são predominantemente encontradas na microbiota
conjuntival dos jabutis da espécie Geochelone carbonaria. O conhecimento dos
2
microorganismos prevalentes na flora conjuntival de Chelonoidis carbonaria pode ajudar na
profilaxia e tratamento de doenças oculares nesta espécie.
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