Teste antivirais em dois tempos de exposição - PROT-CAP

RELATÓRIO FINAL
17 de dezembro de 2009
AVALIAÇÃO TESTE DE 13 PRODUTOS ACERCA DE SUAS
PROPRIEDADES ANTIVIRAIS EM DOIS TEMPOS DE EXPOSIÇÃO
UTILIZANDO MÉTODO IN VITRO
Resumo executivo
RELATÓRIO FINAL:
090903-402
PATROCINADOR:
GOJO INDUSTRIES, INC.
One GOJO Plaza , Suite 500
Akron, Ohio 44311
LOCAL DO TESTE:
BIOSCIENCE LABORATORIES, INC.
300 N Willson Avenue
Bozeman, Montana 59715
DATA DE INÍCIO DO ESTUDO:
22/09/2009
DATA DE TÉRMINO DO ESTUDO:
17/12/2009
MÉTODO
Um teste de Suspensão Viral (método in-vitro eliminação/tempo) foi utilizado para
avaliar as propriedades virucidas de 13 produtos quando confrontados com o um tipo de
vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID 2009712047). O
percentual e log10 das reduções a partir da população inicial foram determinados após a
exposição a cada um dos produtos testados a cada 15 e 30 segundos.
CONCLUSÃO DOS RESULTADOS:
O Produto de Teste 1, PURELL Instant Hand Sanitizer (62% de etanol, Lote
Q806298), reduziu a população do vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009) (CDC ID 2009712047) em 4,25 log10 (>99,99% de redução)
após 15 e 30 segundos de exposição.
O Produto de Teste 3, PURELL Instant Hand Sanitizer Skin Nourishing Foam
(70% de etanol, Lote 319602) reduziu a população do vírus da Gripe H1N1,
influenza A (A/Califórnia/04/2009) (CDC ID 2009712047) em 4,25 log10 (>99,99%
de redução) após 15 e 30 segundos de exposição.
O Produto de Teste 4, PURELL 70 Gel Sanitizer (70% de etanol, Lote 1028-69)
reduziu a população do vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009)
(CDC ID 2009712047) em 4,25 log10 (>99,99% de redução) após 15 e 30 segundos
de exposição.
O Produto de Teste 5, PURELL VF481 Hand Sanitizing Gel (70% de etanol, Lote
319152) reduziu a população do vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009) (CDC ID 2009712047) em 4,25 log10 (>99,99% de redução)
após 15 e 30 segundos de exposição.
O Produto de Teste 7, PURELL Alcohol Canister Wipes (62% de etanol, Lote
LMPQ806733A) reduziu a população do vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009) (CDC ID 2009712047) em 4,25 log10 (>99,99% de redução)
após 15 e 30 segundos de exposição.
O Produto de Teste 8, ANTIBACTERIAL FOAM SOAP (Triclosan 0,3%) reduziu a
população do vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009) (CDC ID
2009712047) em 4,25 log10 (>99,99% de redução) após 15 e 30 segundos de
exposição.
O Produto de Teste 9...............
O Produto de Teste 9...............
O Produto de Teste 9...............
O Produto de Teste 9...............
RELATÓRIO FINAL 090903-402
1.0 TÍTULO:
AVALIAÇÃO
SOBRE
DE
13
SUAS
PRODUTOS
PROPRIEDADES
ANTIVIRAIS EM DOIS TEMPOS DE
EXPOSIÇÃO
MÉTODO
UTILIZANDO
IN
UM
VITRO
DE
ELIMINAÇÃO/TEMPO
2.0 PATROCINADOR:
GOJO INDUSTRIES, INC.
One GOJO Plaza, Suite 500
Akron, Ohio 44311
3.0 LOCAL DO TESTE:
BIOSCIENCE LABORATORIES, INC.
300 N Willson Avenue
Bozeman, Montana 59715
4.0 DIRETOR DO ESTUDO:
Volha Dzyakanava, Ph.D
5.0 PROPÓSITO DO ESTUDO:
Este estudo foi projetado para avaliar as propriedades antivirais de 13 produtos quando
confrontados com um tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009
(CDC ID 2009712047) utilizando-se um Teste de Suspensão virucida (método in-vitro
de eliminação/tempo). Os produtos testados foram individualmente avaliados a uma
concentração de 90% (v/v). Todos os testes foram realizados de acordo com as Boas
Práticas Laboratoriais, como especificado no CFR Parte 58, com a exceção de que a
caracterização da identidade, força, pureza, composição, estabilidade, e solubilidade dos
materiais testados permaneceram como responsabilidade do Patrocinador e não foram
realizadas (GLP 58.105).
6.0 ESCOPO:
Uma Suspensão Virucida de Teste (método in vitro eliminação/tempo) foi utilizada para
avaliar as propriedades antivirais de 13 produtos quando confrontados com um tipo de
vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID 2009712047). Os
percentuais e log10 das reduções foram determinados após a exposição a cada um dos
produtos testados a 15 e 30 segundos. O Protocolo de Estudo incluído como Adendo I
ao Relatório Final apresenta a metodologia de estudo em detalhes, assim como os
Formulários de Dados Gerais “General Data Gathering Forms” (Formulário Número
91-L-002) no Adendo V deste Relatório Final. O Protocolo de Estudo recebeu uma
emenda uma vez a fim de adicionar os testes de 2 produtos extras , para um total de 13
(Referência ao formulário de Emenda [Formulário Número 94-G-006] no Adendo I
deste relatório). Um desvio da metodologia descrito do Protocolo de Estudo ocorreu
(referência a Seção 15 deste relatório) e como está detalhado no Protocolo e/ou
Formulário de Desvio SOP “SOP Deviation Recording Form” (Formulário número 99QA-004 no Adendo I deste relatório, não teve nenhum efeito adverso sobre o resultado
do estudo. Não houve desvios aplicáveis aos Procedimentos Operacionais Padrões do
Bioscience Laboratories, Inc. durante o curso desta avaliação.
7.0 DATAS DO ESTUDO:
DATA DE INÍCIO DO ESTUDO:
22/09/2009
DATA DE INÍCIO EXPERIMENTAL:
16/10/2009
DATA DO TÉRMINO EXPERIMENTAL: 19/11/2009
DATA DE COMPLEIÇÃO DO ESTUDO: 17/12/2009
8.0 MATERIAIS DE TESTE:
9.0 DESAFIO COM O VÍRUS:
O desafio com o tipo de vírus (Tipo de Vírus da Cultura Americana [ATCC] avaliado
foi: Um tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID
2009712047).
10.0 EQUIPAMENTO E MATERIAIS:
O equipamento e materiais utilizados neste estudo são descritos no Protocolo de Estudo
no Adendo I deste relatório. Detalhes adicionais estão registrados no Formulário
“Virology Equipment and Supplies Tracking Form (Formulário número 07-L-011 no
Adendo VI deste relatório.
11.0 MEIO:
Os meios de crescimento e fluídos utilizados neste estudo estão descritos no Protocolo
de Estudo no Adendo I deste relatório. Detalhes adicionais estão registrados no
Formulário “Virology Equipment and Supplies Tracking Forms” (Formulário número
07-L-011) no Adendo VI deste Relatório.
.....................
16.0 RESULTADOS A PARTIR DAS TABELAS I A XIII:
A Tabela I apresenta o Controle de citotoxicidade, o Controle de Neutralização, e os
dados de Controle da Célula, assim como a Infectividade de Controle do Vírus
(TCID50), a infectividade após a exposição (TCID50) e as reduções de percentual e log10
observadas após a exposição do tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009 (CDC ID 2009712047) ao Produto de Teste 1, PURELL
Instant Hand Sanitizer (lote número Q806298).
A Tabela III apresenta o Controle de citotocixidade, o Controle de Neutralização, e os
dados de Controle da Célula, assim como a Infectividade de Controle do Vírus
(TCID50), a infectividade após a exposição (TCID50) e as reduções de percentual e log10
observadas após a exposição do tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009 (CDC ID 2009712047) ao Produto de Teste 3, PURELL
Instant Hand Sanitizer Skin Nourishing Foam (Lote número 319602).
A Tabela IV apresenta o Controle de citotocixidade, o Controle de Neutralização, e os
dados de Controle da Célula, assim como a Infectividade de Controle do Vírus
(TCID50), a infectividade após a exposição (TCID50) e as reduções de percentual e log10
observadas após a exposição do tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009 (CDC ID 2009712047) ao Produto de Teste 4, PURELL 70
Gel Sanitizer (Lote número 1028-69).
A Tabela V apresenta o Controle de citotoxicidade, o Controle de Neutralização, e os
dados de Controle da Célula, assim como a Infectividade de Controle do Vírus
(TCID50), a infectividade após a exposição (TCID50) e as reduções de percentual e log10
observadas após a exposição do tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009 (CDC ID 2009712047) ao Produto de Teste 5, PURELL
VF841 Hand Sanitizing Gel (Lote número 319152).
A Tabela VII apresenta o Controle de citotoxicidade, o Controle de Neutralização, e os
dados de Controle da Célula, assim como a Infectividade de Controle do Vírus
(TCID50), a infectividade após a exposição (TCID50) e as reduções de percentual e log10
observadas após a exposição do tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009 (CDC ID 2009712047) ao Produto de Teste 7, PURELL
Alcohol Canister Wipes (Lote número LMPQ805143).
A Tabela VIII apresenta o Controle de citotoxicidade, o Controle de Neutralização, e os
dados de Controle da Célula, assim como a Infectividade de Controle do Vírus
(TCID50), a infectividade após a exposição (TCID50) e as reduções de percentual e log10
observadas após a exposição do tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A
(A/Califórnia/04/2009
(CDC
ID
2009712047)
ao
Produto
de
Teste
ANTIBACTERIAL FOAM SOAP (Triclosan 0,3%) (Lote número 1029-15).
8,
Tabela I
Produto de Teste 1: PURELL Instant Hand Sanitizer (a 62% de etanol, Lote
número Q806298)
Vírus: tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID
2009712047)
Linha da Célula hospedeira: MDCK (ATCC #CCL-34)
Volume por recipiente: 1.0 mL
DILUIÇ
CONTRO TEMPO
ÃO
LE
(-log10)
VÍRUS
DE C0NTROLE
CONTROLE
CONTRO
DE
DE
LE
AO TESTE
CITOTOXID
NEUTRALIZA
CÉLULA
15 seg
ADE
ÇÃO
(CONTR
DO EXPOSIÇÃO
30 seg
DA
OLE
NEGATI
VO)
0000
-3
NT
0000
0000
0000
NT
-4
++++
0000
0000
0000
++++
-5
++++
0000
0000
NT
++++
-6
++++
0000
0000
NT
+++0
-7
+000
0000
0000
NT
+000
-8
0000
NT
NT
NT
0000
TCID50
6,75 log10
2,5
2,5
NA
6,5 log10
log10
log10
4,25
4,25
log10
log10
Redução
NA
em log10
Percentu
al
NA
de
>99,99 >99,99
%
%
Redução
+
CPE (efeito citopático/citotóxico) presente
0
CPE (efeito citopático/citotóxico) não detectado
NT
Não testado
NA
Não aplicável
Tabela III
Produto de Teste 3: PURELL Instant Hand Sanitizer Skin Nourishing Foam (Lote
número 319602)
Vírus: tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID
2009712047)
Linha da Célula hospedeira: MDCK (ATCC #CCL-34)
Volume por recipiente: 1.0mL
DILUIÇ
CONTRO TEMPO
ÃO
LE
(-log10)
VÍRUS
DE C0NTROLE
CONTROLE
CONTRO
DE
DE
LE
AO TESTE
CITOTOXID
NEUTRALIZA
CÉLULA
15 seg
ADE
ÇÃO
(CONTR
DO EXPOSIÇÃO
30 seg
DA
OLE
NEGATI
VO)
0000
-3
NT
0000
0000
0000
NT
-4
++++
0000
0000
0000
++++
-5
++++
0000
0000
NT
++++
-6
++++
0000
0000
NT
0+++
-7
+000
0000
0000
NT
0000
-8
0000
NT
NT
NT
0000
TCID50
6,75 log10
2,5
2,5
NA
6,25 log10
log10
log10
4,25
4,25
log10
log10
Redução
NA
em log10
Percentu
al
NA
de
>99,99 >99,99
%
%
Redução
+
CPE (efeito citopático/citotóxico) presente
0
CPE (efeito citopático/citotóxico) não detectado
NT
Não testado
NA
Não aplicável
Tabela IV
Produto de Teste 4: PURELL 70 Gel Sanitizer (a 70% de etanol,Lote número
1028-69)
Vírus: tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID
2009712047)
Linha da Célula hospedeira: MDCK (ATCC #CCL-34)
Volume por recipiente: 1.0 mL
DILUIÇ
CONTRO TEMPO
ÃO
LE
(-log10)
VÍRUS
DE C0NTROLE
CONTROLE
CONTRO
DE
DE
LE
AO TESTE
CITOTOXID
NEUTRALIZA
CÉLULA
15 seg
ADE
ÇÃO
(CONTR
DO EXPOSIÇÃO
30 seg
DA
OLE
NEGATI
VO)
0000
-3
NT
0000
0000
0000
NT
-4
++++
0000
0000
0000
++++
-5
++++
0000
0000
NT
++++
-6
++++
0000
0000
NT
++00
-7
+000
0000
0000
NT
+000
-8
0000
NT
NT
NT
0000
TCID50
6,75 log10
2,5
2,5
NA
6,25 log10
log10
log10
4,25
4,25
log10
log10
Redução
NA
em log10
Percentu
al
NA
de
>99,99 >99,99
%
%
Redução
+
CPE (efeito citopático/citotóxico) presente
0
CPE (efeito citopático/citotóxico) não detectado
NT
Não testado
NA
Não aplicável
Tabela V
Produto de Teste 5: PURELL VF841 Hand Sanitizing Gel (Lote número 319152).
Vírus: tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID
2009712047)
Linha da Célula hospedeira: MDCK (ATCC #CCL-34)
Volume por recipiente: 1.0 mL
DILUIÇ
CONTRO TEMPO
ÃO
LE
(-log10)
VÍRUS
DE C0NTROLE
CONTROLE
CONTRO
DE
DE
LE
AO TESTE
CITOTOXID
NEUTRALIZA
CÉLULA
15 seg
ADE
ÇÃO
(CONTR
DO EXPOSIÇÃO
30 seg
DA
OLE
NEGATI
VO)
0000
-3
NT
0000
0000
0000
NT
-4
++++
0000
0000
0000
++++
-5
++++
0000
0000
NT
++++
-6
++++
0000
0000
NT
+++0
-7
+000
0000
0000
NT
+000
-8
0000
NT
NT
NT
0000
TCID50
6,75 log10
2,5
2,5
NA
6,5 log10
log10
log10
4,25
4,25
log10
log10
Redução
NA
em log10
Percentu
al
NA
de
>99,99 >99,99
%
%
Redução
+
CPE (efeito citopático/citotóxico) presente
0
CPE (efeito citopático/citotóxico) não detectado
NT
Não testado
NA
Não aplicável
Tabela VII
Produto de Teste 7: PURELL Alcohol Canister Wipes
(Lote número
LMPQ805143)
Vírus: tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID
2009712047)
Linha da Célula hospedeira: MDCK (ATCC #CCL-34)
Volume por recipiente: 1.0 mL
DILUIÇ
CONTRO TEMPO
ÃO
LE
(-log10)
VÍRUS
DE C0NTROLE
CONTROLE
CONTRO
DE
DE
LE
AO TESTE
CITOTOXID
NEUTRALIZA
CÉLULA
15 seg
ADE
ÇÃO
(CONTR
DO EXPOSIÇÃO
30 seg
DA
OLE
NEGATI
VO)
0000
-3
NT
0000
0000
0000
NT
-4
++++
0000
0000
0000
++++
-5
++++
0000
0000
NT
++++
-6
++++
0000
0000
NT
++++
-7
+000
0000
0000
NT
+000
-8
0000
NT
NT
NT
0000
TCID50
6,75 log10
2,5
2,5
NA
6,75 log10
log10
log10
4,25
4,25
log10
log10
Redução
NA
em log10
Percentu
al
NA
de
>99,99 >99,99
%
%
Redução
+
CPE (efeito citopático/citotóxico) presente
0
CPE (efeito citopático/citotóxico) não detectado
NT
Não testado
NA
Não aplicável
Tabela VIII
Produto de Teste 8: Antibacterial Foam Soap (a 0,3% de Triclosan - Lote número
1029-15)
Vírus: tipo de vírus da Gripe H1N1, influenza A (A/Califórnia/04/2009 (CDC ID
2009712047)
Linha da Célula hospedeira: MDCK (ATCC #CCL-34)
Volume por recipiente: 1.0mL
DILUIÇ
CONTRO TEMPO
ÃO
LE
(-log10)
VÍRUS
DE C0NTROLE
CONTROLE
CONTRO
DE
DE
LE
AO TESTE
CITOTOXID
NEUTRALIZA
CÉLULA
15 seg
ADE
ÇÃO
(CONTR
DO EXPOSIÇÃO
30 seg
DA
OLE
NEGATI
VO)
0000
-3
NT
0000
0000
0000
NT
-4
++++
0000
0000
0000
++++
-5
++++
0000
0000
NT
++++
-6
++++
0000
0000
NT
0+++
-7
+000
0000
0000
NT
0000
-8
0000
NT
NT
NT
0000
TCID50
6,75 log10
2,5
2,5
NA
6,50 log10
log10
log10
4,25
4,25
log10
log10
Redução
NA
em log10
Percentu
al
NA
de
>99,99 >99,99
%
%
Redução
+
CPE (efeito citopático/citotóxico) presente
0
CPE (efeito citopático/citotóxico) não detectado
NT
Não testado
NA
Não aplicável
17.0 CRITÉRIOS DE ACEITAÇÃO DO TESTE:
Um teste válido requer que: 1) pelo menos 4 log10 de TCID50 sejam recuperados do
Controle do Vírus; 2) células nos recipientes de controle negativo estejam viáveis e
anexadas no fundo dos recipientes; 3) o meio esteja livre de contaminação em todos as
placas; 4) quando a citotoxicidade por evidente, seja demonstrado pelo menos 3 log10 de
redução além do nível de citotoxicidade no título, e 5) o produto de teste seja totalmente
neutralizado
imediatamente após o tempo de exposição de tal maneira que a
infectividade do vírus não seja afetada.
18.0 ANÁLISE ESTATÍSTICA:
Não foi realizada uma análise estatística sobre os dados derivados deste estudo.
19.0 AUDITORIA PARA GARANTIA DA QUALIDADE:
A Unidade de Garantia de Segurança (QAU) conduziu auditorias nas diversas fases do
estudo dos procedimentos de teste críticos e advertiu o Diretor de Estudo dos resultados
destas. Após a compleição dos testes, o QAU realizou uma auditoria dos dados do
Relatório Final em sua totalidade. Ocorreu um desvio do protocolo de estudo durante o
curso desta avaliação e foi apropriadamente documentado. Não ocorreram desvios dos
Procedimentos De Operação Padrões do Bioscience Laboratories Inc. durante o curso
desta avaliação.