12o CICAM OCORRÊNCIA DE BOUBA AVIÁRIA, FORMA CUTÂNEA, EM AVES DE RAPINA. DETECÇÃO POR MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO. SOUZA, F.1*; OLIVEIRA, C.A.1; SOUZA, R.B.2; RANIEL, H.C.F.1; PEREIRA, C.S.1; MILANELO, L.3; MARTINS, A.M.C.R.P.F.1; CATROXO, M.H.B.1 1Instituto Biológico, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Sanidade Animal, Av. Cons. Rodrigues Alves, 1252, CEP 04014-002, São Paulo, SP, Brasil. E-mail: [email protected] 2 Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, Departamento de Morfologia e Genética, SP, Brasil. 3Parque Ecológico do Tietê, São Paulo, SP, Brasil. Occurrence of cutaneous form of avian pox in birds of prey. Detection by transmission electron microscopy. 41 001 Fazem parte do grupo das aves de rapina as ordens Accipitriformes, Falconiformes, Strigiformes e Cathartiformes. A bouba aviária é uma doença infecciosa, que acomete aves de vida livre e comerciais, podendo ocasionar prejuízo significativo às criações e perdas na vida selvagem. O agente etiológico é um poxvírus da família Poxviridae e gênero Avipoxvirus. A doença é caracterizada através de três formas: cutânea – com formações de lesões crostosas em regiões desprovidas de penas, como patas, comissura de bicos e olhos; diftérica – que inclui a formação de placas diftéricas na cavidade oral, traqueia e esôfago e septicêmica – que provoca lesões nos pulmões, sendo a forma mais letal. O vírus pode ser transmitido por insetos, contato direto entre pássaros infectados ou alimentos, água e fômites contaminados. O presente trabalho teve por objetivo detectar a presença de Avipoxvirus em fragmentos de lesões de pele de aves de rapina. Foram encaminhados ao Laboratório de Microscopia Eletrônica do Instituto Biológico, para pesquisa de agentes virais, quatro aves de rapina, sendo elas, caracará (Caracara plancus), gavião-carijó (Rupornis magnirostris), falcão-de-coleira (Falco femoralis) e corujinha-do-mato (Megascops choliba), provenientes do Centro de Recuperação de Animais Silvestres do Parque Ecológico do Tietê. As aves apresentavam lesões nodulares proliferativas e crostosas, de coloração amarelada a marrom, localizadas nas patas e bicos, características da forma cutânea da bouba. Os fragmentos das lesões foram colhidos e processados para observação ao microscópio eletrônico de transmissão, utilizando as técnicas de contrastação negativa (preparo rápido) e de imunocitoquímica (imunomarcação com partículas de ouro coloidal). Na técnica de contrastação negativa, os fragmentos de lesão foram suspensos em tampão fosfato 0,1M e pH 7,0. Gotas da suspensão foram colocadas em contato com grades metálicas, previamente cobertas com filme de colódio e carbono, drenadas com papel filtro e contrastadas negativamente com molibdato de amônio a 2% e pH 5,0. Na imunocitoquímica, as telas foram colocadas sobre gotas da suspensão viral, incubadas com anticorpo específico primário, pós-incubadas em gotas de proteína A conjugada com ouro de 10 nm (anticorpo secundário), diluído a 1:20 em PBS 0,5% e contrastadas com molibdato de amônio a 2% e pH 5,0. A observação ao microscópio eletrônico de transmissão, por meio da técnica de contrastação negativa, mostrou a presença de grande número de partículas com morfologia semelhante à poxvírus, características do gênero Avipoxvirus, de formato ovoide, com disposição irregular dos túbulos sobre a membrana externa, sendo algumas envelopadas, medindo em média 300 x 250 nm. A reação antígeno-anticorpo foi realçada pelas partículas de ouro coloidal, confirmando o diagnóstico de Avipoxvirus. Este relato apresenta a primeira ocorrência desse vírus nessas espécies de aves de rapina. *Bolsista CAPES. INFECÇÃO SIMULTÂNEA POR PARAMIXOVÍRUS E MICOPLASMA EM CANÁRIO-DO-REINO (SERINUS CANARIA). DETECÇÃO POR MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO. OLIVEIRA, C.A.; SOUZA, F.; RANIEL, H.C.F.; PEREIRA, C.S.; MARTINS, A.M.C.R.P.F.; CATROXO, M.H.B. Instituto Biológico, Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Sanidade Animal, Av. Cons. Rodrigues Alves, 1252, CEP 04014-002, São Paulo, SP, Brasil. E-mail: [email protected] Simultaneous infection by paramyxovirus and mycoplasma in domestic-canary (Serinus canaria). Detection by transmission electron microscopy. O canário do reino, também conhecido como canarinho, é um pequeno pássaro canoro originário da Ilha da Madeira e das Ilhas Canárias e muito apreciado em todo país. Por essa razão, vem sendo criado comercialmente. Pertence à ordem Passeriforme, família Fringilidae e espécie Serinus canaria, sendo susceptível a muitas doenças, principalmente as de origem viral. Os paramixovírus aviários foram classificados em 10 serotipos APMV (1-10). Os sorotipos 2 e 3 são os que mais frequentemente acometem os passeriformes, produzindo doença respiratória, pneumonia grave, diarreia, pancreatite, torcicolo e vômitos. Os micoplasmas são importantes patógenos aviários, provocando enfermidades respiratórias e articulares. Em passeriformes, a doença causada por Mycoplasma gallisepticum é caracterizada por conjuntivite, lacrimejamento e rinite. Este trabalho objetivou relatar a presença simultânea de partículas de paramixovírus e de micoplasmas em fragmentos de órgãos de canários (Serinus canaria), utilizando técnicas de microscopia eletrônica de transmissão. Em maio de 2014, foram encaminhados de um criadouro comercial, ao Laboratório de Microscopia Eletrônica do Instituto Biológico, SP, 2 canários que tiveram morte súbita, para pesquisa de agentes virais. Foi realizada necrópsia e colhidas amostras de fragmentos de fígado, pulmão, coração, moela, intestino e proventrículo, as quais foram processadas pela técnica de contrastação negativa, sendo suspensas em tampão fosfato 0,1 M, pH 7,0. Gotas da suspensão obtida foram colocadas sobre grades metálicas, previamente cobertas com filme de colódio e carbono, as quais foram contrastadas negativamente com molibdato de amônio a 2%, pH 5,0. A observação ao microscópio eletrônico de transmissão mostrou a presença de partículas com morfologia semelhante à paramixovírus, envelopadas, pleomórficas, características, medindo entre 100 e 300 nm de diâmetro em todos os órgãos analisados. Nas amostras de fragmentos de pulmão também foi observada a presença de formações pleomórficas semelhantes à micoplasmas, medindo entre 100 e 800 nm. A técnica empregada foi eficiente para o rápido diagnóstico e tomada de medidas profiláticas e de controle no criadouro. Biológico, São Paulo, v.76, n.2, p.31-78, jul./dez., 2014 002