ARS VETERINARIA, Jaboticabal, SP, Vol. 20, nº 2, 203-206, 2004. ISSN 0102-6380 HEMOCITOMETRIA EM SARACURA SANÃ (Pardirallus nigricans) (MEASUREMENTS OF BLACKISH RAIL BLOOD CELLS (Pardirallus nigricans)) (HEMOCITOMETRÍA EN SARACURA-SANA (Pardirallus nigricans)) M. E. PEREIRA1; A. F. DA SILVEIRA2; A. G. P. GUEDES3; M. M. KRÜGEL4; S. T. Z. CECHIN5 RESUMO São descritos os valores de hemocitometria para Saracura Sanã (Pardirallus nigricans). Foram realizados esfregaços sangüíneos de sete aves oriundas de vida livre, sendo cinco adultas e duas jovens. Foram medidos, para jovens e adultos: comprimento (CEM) e largura (LEM) do eritrócito maduro, comprimento (CEI) e largura (LEI) do eritrócito imaturo, comprimento (CNEM) e largura (LNEM) do núcleo do eritrócito maduro, comprimento (CNEI) e largura (LNEI) do núcleo do eritrócito imaturo, comprimento (CTB) e largura (LTB) do trombócito, comprimento (CNTB) e largura (LNTB) do núcleo do trombócito, diâmetro do heterófilo (DH), linfócito médio (DLM) e pequeno (DLP). As aves jovens têm os pequenos linfócitos, heterófilos e núcleo de eritrócito maduro maiores (p<0,05) que aves adultas. As demais variáveis não diferem estatisticamente entre as duas diferentes idades estudadas. Pardirallus nigricans tem células de tamanho pequeno a médio e não relacionado com a idade. PALAVRAS-CHAVE: Aves. Pardirallus nigricans. Rallidae. Células sangüíneas. SUMMARY It is described the blood cell measurement values of blackish rail (Pardirallus nigricans – Viellot, 1819). Blood was collected and smears were made from seven wild birds (five adults and two young). Measurements were taken from mature erythrocyte length (CEM) and width (LEM), immature erythrocyte length (CEI) and width (LEI), mature erythrocyte nucleus length (CNEM) and width (LNEM), immature erythrocyte nucleus length (CNEI) and width (LNEI); thrombocyte length (CTB) and width (LTB), thrombocyte nucleus length (CNTB) and width (LNTB); and diameters of heterophyl (DH), mean (DLM) and small (DLP) lymphocytes. The length of small lymphocytes, heterophyls and mature erythrocytes was bigger in young than in the adult birds. For the other studied cell types, both length and width were similar between young and adults. The overall size of blood cells of Pardirallus nigricans ranges from small to medium, and apparently some parameters may be related to age. KEY-WORDS: Birds. Pardirallus. Rallidae. Blood cells. 1 2 3 4 5 Médica Veterinária - Docente - Unesp Jaboticabal - Rua Conselheiro Laurindo, 809 cj.708/709, 80060-100, Curitiba, PR. (Endereço para corresponência) End. Eletrônico: [email protected] Médico Veterinário - Docente da UFSM Médico Veterinário - Mestre - University of Minessota. Bióloga - Mestre - PUC/RS Bióloga - Doutora - UFSM 203 M. E. PEREIRA, A. F. DA SILVEIRA, A. G. P. GUEDES, M. M. KRÜGEL, S. T. Z. CECHIN. Hemocitometria em saracura sanã (pardirallus nigricans)./ Measurements of blackish rail blood celis (pardirallus nigricans). / Hemocitometría en saracura-sana (pardirallus nigricans). Ars Veterinaria, Jaboticabal, SP, Vol. 20, nº 2, 203-206, 2004. RESUMEN Son descritos los valores de hemocitometría para Saracura-Sana o gallineta negruzca (Pardirallus nigricans). Fueron realizados frotis sanguíneos de siete aves de vida libre, cinco adultas y dos jóvenes. Fueron medidos: longitud (CEM) y ancho (LEM) del eritrocito maduro, longitud (CEI) y ancho (LEI) del eritrocito inmaduro, longitud (CNEM) y ancho (LNEM) del núcleo del eritrocito maduro, longitud (CNEI) y ancho (LNEI) del núcleo del eritrocito inmaduro, longitud (CTB) y ancho (LTB) del trombocito, longitud (CNTB) y ancho (LNTB) del núcleo del trombocito, diámetro del heterófilo (DH), linfocito medio (DLM) y pequeño (DLP). Los pequeños linfocitos y heterófilos y el núcleo del eritrocito maduro son más grandes en las aves jóvenes, (p<0,05) cuando comparados a los de las aves adultas. El Pardirallus nigricans tiene células de tamaño pequeño a medio, lo que no está relacionado con la edad. PALABRAS CLAVE: Aves. Pardirallus nigricans. Rallidae. Células sanguíneas. INTRODUÇÃO Os eritrócitos das aves são muito maiores que os dos mamíferos, medindo de 10-14 por 5-8 µm, conforme ARNALL & KEYMER (1975), e 10-13 por 6-7 µm de acordo com BANKS (1993). Em galos domésticos estas células medem 10,7 x 7,1 µm, segundo BANKS (1993). São células elípticas contendo um núcleo oval central (ARNALL & KEYMER, 1975; BANKS, 1993; RUPLEY, 1999), o qual se apresenta condensado nas células maduras. Na circulação periférica, os eritrócitos maduros apresentam tamanho, forma e coloração uniformes. Os reticulócitos têm sido definidos como eritrócitos jovens que contêm RNA citoplasmático residual (FOWLER, 1986). Os leucócitos encontrados no sangue periférico aviário incluem os granulócitos e as células mononucleares (RUPLEY, 1999). Quando maduros, os heterófilos são redondos (MAXWELL & ROBERTSON, 1998; RUPLEY, 1999), com diâmetro que varia de 6 a 9 mm (BANKS, 1993), possuindo citoplasma preenchido com grânulos eosinofílicos redondos, fusiformes ou em forma de bastão (RUPLEY, 1999). Os grânulos primários são fusiformes enquanto que os secundários são redondos, pouco densos e menores que os grânulos primários, podendo ser vistos na maioria das espécies de aves (MAXWELL & ROBERTSON, 1998). Possuem ainda um núcleo basofílico pálido, que normalmente é composto por dois a três 3 lobos (RUPLEY, 1999). De acordo com FUDGE (1997), os eosinófilos são incomuns em hemogramas de muitas espécies de aves e comuns em outras. São células redondas que apresentam grânulos também redondos ou ocasionalmente em forma de bastão e núcleo bilobado (RUPLEY, 1999). Os monócitos são usualmente os maiores e os menos numerosos leucócitos vistos em esfregaços sangüíneos de aves (COLES et al., 1998). À exceção dos heterófilos, os linfócitos ocorrem em uma freqüência maior que os outros leucócitos (FUDGE, 1997), sendo os pequenos linfócitos os mais comumente encontrados (COLES et al., 1998). Algumas espécies de aves são linfocíticas, incluindo passeriformes e papagaios do gênero Amazona (LESSON, 1831) (FUDGE, 1997). Essas células são relativamente pequenas, medindo de 6 a 12 µm de diâmetro (COLES et al., 1998). Os linfócitos maduros normais são tipicamente redondos com um citoplasma homogêneo e fracamente basofílico. O núcleo é redondo a ligeiramente denteado e centralmente localizado, com alta proporção núcleo-citoplasma. De acordo com o tamanho, essas células podem ser agrupadas, em pequenos, médios e grandes linfócitos. Os pequenos linfócitos são células redondas, com uma faixa citoplasmática reduzida. Os linfócitos médios e grandes possuem quantidade moderada de citoplasma, podendo conter alguns grânulos eosinofílicos (RUPLEY, 1999). Os trombócitos são menores e mais arredondados que os eritrócitos. A cromatina nuclear é densa, o citoplasma é claro e contém um ou mais grânulos (CAMPBELL, 1995). BERTRAM et al. (1998) mediram trombócitos de Marreco de pequim e observaram que o tamanho das células variou de 4,5 a 6 µm. A bibliografia não apresenta valores de medidas para diferentes espécies de aves, apresentando apenas medidas das células sangüíneas de um modo geral. Objetiva-se apresentar os valores de hemocitometria para Saracura Sanã (Pardirallus nigricans). MATERIAL E MÉTODOS Foram utilizados sete animais entre adultos e filhotes de Saracura Sanã (Pardirallus nigricans), capturados durante o resgate de fauna na Usina Hidrelétrica Dona Francisca, região central do Rio Grande 204 M. E. PEREIRA, A. F. DA SILVEIRA, A. G. P. GUEDES, M. M. KRÜGEL, S. T. Z. CECHIN. Hemocitometria em saracura sanã (pardirallus nigricans)./ Measurements of blackish rail blood celis (pardirallus nigricans). / Hemocitometría en saracura-sana (pardirallus nigricans). Ars Veterinaria, Jaboticabal, SP, Vol. 20, nº 2, 203-206, 2004. do Sul (29°26’50’’S e 53°16’50’’W), Brasil, realizado em novembro de 2000. O sangue foi obtido por punção da veia alar e, com o uso de tubo capilar sem anticoagulante, foram realizadas duas lâminas de esfregaços sangüíneos de cada animal, sendo fixadas ao ar e coradas em corante de Rosenfeld. A partir de cada esfregaço foram medidas dez células para cada tipo celular estudado. As medidas foram obtidas por meio de um citômetro em microscópio óptico de imersão. Foram mensurados em micrometros o comprimento (CEM) e largura (LEM) dos eritrócitos maduros, comprimento (CEI) e largura (LEI) dos eritrócitos imaturos, comprimento (CNEM) e largura (LNEM) do núcleo dos eritrócitos maduros, comprimento (CNEI) e largura (LNEI) do núcleo dos eritrócitos imaturos, comprimento (CTB) dos trómbócitos, largura (LTB) dos trombócitos, comprimento (CNTB) do núcleo dos trómbócitos, largura (LNTB) do núcleo dos trómbócitos, diâmetro dos heterófilos (DHT), dos linfócitos médios (DLINM) e pequenos (DPLIN). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e ao teste de Tukey (p<0,05) sempre que houve diferença estatisticamente significativa entre as médias. RESULTADOS E DISCUSSÃO Os resultados (média ± desvio padrão) das medidas das células sangüíneas de filhotes e adultos de P. nigricans foram respectivamente: CEM=10,93±0,75 e 10,92±0,70, LEM=6,05±0,43 e 6,08±0,60, CNEM=5,06±0,44 e 4,80±0,37, LNEM=2,11±0,53 e 2,12±0,54, CEI=10,14±0,71 e 10,40±0,63, LEI=6,19±0,78 e 6,24±0,55, CNEI=4,93±0,41 e 4,84±0,31, LNEI=3,01±0,38 e 3,16±0,41, CTB=6,18±0,88 e 6,40±0,82, LTB=3,70±0,46 e 3,80±1,31, CNTB=4,47±0,51 e 4,60±0,44, LNTB=3,26±0,48 e 3,16±0,40, DHT=8,46±0,76 e 7,84±0,42, DLINM=9,50±1,25 e 8,86±0,65 e DPLIN=6,62±0,48 e 6,30±0,65 (Tabela 1). Considerando-se as medidas apresentadas por ARNALL & KEYMER (1975) e BANKS (1993) para eritrócitos maduros de aves em geral, as medidas dos eritrócitos de Pardirallus nigricans estão próximas aos menores valores. Conforme FOWLER (1996), há uma regra geral em que espécies de aves mais evoluídas têm eritrócitos pequenos e em grande quantidade, sendo mais ricos em hemoglobina que em espécies de aves menos evoluídas ou mais primitivas. Aves voadoras têm eritrócitos menores que aves com pouca capacidade de vôo. Esses eritrócitos de tamanho menor associados ao grande volume dessas células possibilita um aumento na área de superfície, permitindo, assim, uma troca gasosa mais eficiente e ajuda na demanda de oxigênio durante o vôo. Nesse sentido, o beijo-flor possui os menores 205 eritrócitos enquanto que o avestruz tem os maiores. Tal observação não poderia ser aplicada às saracuras, embora seus eritrócitos estejam próximos aos menores valores, visto que se movimentam sobretudo andando, segundo SICK (1997). Isso demonstra uma incoerência ou a necessidade de se estabelecer as medidas de eritrócitos maduros para cada espécie aviária. Observou-se diferença estatisticamente significativa (p<0,05) entre Pardirallus nigricans da mesma idade, mas não entre adultos e filhotes, demonstrando variação individual. Os valores encontrados referentes ao tamanho do eritrócito imaturo bem como do seu núcleo apresentam diferença estatisticamente significativa (p<0,05) entre as aves da mesma idade, mas não entre as idades. Uma possível explicação para esse fato é a de que os eritrócitos imaturos encontram-se em diferentes estádios de desenvolvimento e por isso apresentam tamanhos diferentes. De acordo com COLES et al. (1998), todos os estádios de desenvolvimento de células eritróides podem ser encontrados na circulação periférica. Nos esfregaços sangüíneos de P. nigricans foram observados eritrócitos que apresentam policromasia, considerados eritrócitos imaturos. Quando o tamanho destes é comparado com o tamanho de eritrócitos maduros da mesma espécie, esses apresentam um menor comprimento e maior largura da célula e do núcleo. Os eritrócitos, que podem ser visualizados na Figura 1, são elípticos com o núcleo em posição central acompanhando a forma celular, assemelhando-se à morfologia celular de eritrócitos de aves descrita por ARNALL & KEYMER (1975), BANKS (1993) e RUPLEY (1999); entretanto, quando comparados com os valores para os eritrócitos de galos domésticos, encontrados por BANKS (1993), são mais compridos e mais estreitos. No presente estudo, eosinófilos, basófilos e monócitos não foram analisados em razão do pequeno número dessas células presente nos esfregaços das aves. De acordo com FUDGE (1997), esses tipos celulares são pouco visualizados em sangue de aves, mas a presença de eosinófilos em algumas espécies pode ser comum. Os heterófilos encontrados são células grandes quando comparados com as medidas apresentadas por BANKS (1993) com tamanho médio de 8,14 µm de diâmetro. Observou-se diferença estatisticamente significativa entre as aves da mesma idade bem como entre as idades estudadas. Quanto à forma, essas células são redondas, apresentam núcleo com 2 ou 3 lobos e citoplasma coberto por grânulos fusiformes (Figura 1). A morfologia observada assemelha-se à morfologia de heterófilos de aves descrita por MAXWELL & ROBERTSON (1998) e RUPLEY (1999). M. E. PEREIRA, A. F. DA SILVEIRA, A. G. P. GUEDES, M. M. KRÜGEL, S. T. Z. CECHIN. Hemocitometria em saracura sanã (pardirallus nigricans)./ Measurements of blackish rail blood celis (pardirallus nigricans). / Hemocitometría en saracura-sana (pardirallus nigricans). Ars Veterinaria, Jaboticabal, SP, Vol. 20, nº 2, 203-206, 2004. Os pequenos e médios linfócitos de P. nigricans variam de 5,9 a 10,44 µm, valores similares aos descritos para linfócitos aviários por COLES et al. (1998) e não apresentam diferença estatisticamente significativa entre as aves da mesma idade ou entre adultos e filhotes. Foram observados desde pequenos até grandes linfócitos nos esfregaços sangüíneos de Pardirallus nigricans, mas com predominância dos pequenos. Essa observação foi realizada por COLES et al. (1998) em esfregaços de sangue de aves. Observou-se que os linfócitos de P. nigricans são redondos e com núcleo centralizado, sendo que a proporção núcleo-citoplasma diminui com o aumento do tamanho do linfócito. Esta caracteristíca também é relatada por RUPLEY (1999) para linfócitos de aves. Quanto ao comprimento e largura, os trombócitos apresentaram diferença estatisticamente significativa entre as aves da mesma idade mas não entre as idades de P. nigricans. Nessas aves, esse tipo celular é maior que as células relatadas por BERTRAM et al. (1998) para marrecode-pequim. Os trombócitos de P. nigricans são menores e apresentam forma mais retangular que os eritrócitos. São células com área citoplasmática reduzida, com núcleo basofílico que acompanha a forma celular (Figura 1). Nas células sangüíneas de P. nigricans deste estudo, apenas os pequenos linfócitos, os heterófilos e o comprimento do núcleo do eritrócito maduro diferem estatisticamente (p<0,05) entre adultos e filhotes. As células sangüíneas de P. nigricans aqui estudadas são de tamanho pequeno a médio não estando relacionadas com a faixa etária das aves. REFERÊNCIAS ARNALL, L., KEYMER, I. F. Bird diseases. London, Baillière Tindall, 1975. p. 528. BANKS, W. J. Applied veterinary histology. St. Louis, Mosby, 1993. p. 527. BERTRAM, E. M., JILBERT, A. R., KOTLARSKI, I. Caracterization of duck thrombocytes. Research in Veterinary Science., v.64, n. 3, p. 267-270, 1998. CAMPBELL, T. W. Avian hematology and cytology. 2 ed. Ames, Iowa State University, 1995. p. 104. COLES, B. H., KRAUTWALD-JUNHANNS, M. E., HERRMAN, T. J. Self-assessment picture tests: avian medicine. St. Louis, Mosby, 1998. p. 212. FOWLER, M. E. Zoo & wild animal medicine. 2 ed. Philadelphia, Mosby, 1986. p. 1089. FUDGE, A. M.: Avian clinical pathology hematology and chemistry In: ALTMAN, R. B. et al.: Avian medicine and surgery, Philadelphia, W.B. Saunders, 1997. p. 142-157. MAXWELL, M. H.; ROBERTSON, G. W. The avian heterophil leucocyte: a review. Worlds Poultry Science Journal, v. 54, n. 2, p. 155-178, 1998. RUPLEY, A. E. Manual de clínica aviária. São Paulo, Roca. 1999. p. 582. ARTIGO RECEBIDO: Agosto/2002 APROVADO: Setembro/2003 SICK, H. Ornitologia brasileira. Rio de Janeiro, Nova Fronteira. 1997. p. 862. AGRADECIMENTOS Ao consórcio DFESA e CEEE pelo apoio financeiro e suporte logístico durante a execução deste trabalho. 206