Caracterização imunofenotípica de monócitos de pacientes sépticos

Caracterização imunofenotípica de monócitos de pacientes sépticos: expressão
de receptores co-estimulatórios/inibitórios da apresentação de antígenos,
relacionado a fagocitose e ativação alternativa
Autores: Nadijane Valéria Ferreira da Mota1, Milena Karina Coló Brunialti1, Flávia
Ribeiro Machado2, Murillo Assunção3, Luciano César Pontes de Azevedo4 e Reinaldo
Salomão1, (1) Disciplina de Infectologia e de (2) Anestesiologia, Escola Paulista de
Medicina, Hospital São Paulo, Universidade Federal de São Paulo – UNIFESP, (3)
Hospital Israelita Albert Einstein, (4) Hospital Sírio Libanês, São Paulo. SP, Brasil.
Objetivo:
O objetivo deste trabalho foi comparar o perfil fenotípico dos monócitos de
pacientes sépticos com os de indivíduos sadios, considerando os receptores
envolvidos na ativação/inibição da apresentação de antígenos (HLA-DR, PD-1, PDL-1,
CD86, CD200R); na ativação alternativa (CD163, CD206), fagocitose (CD64) e
quimiotaxia (CCR-1, CCR-2, CXCR-2).
Métodos:
Foram incluídos 42 pacientes sépticos e 10 indivíduos sadios provenientes do
Hospital São Paulo, Hospital Sírio Libanês e Hospital Israelita Albert Einstein.
A
imunofenotipagem foi realizada em sangue a fresco coletado em EDTA. As células
foram marcadas com anticorpos conjugados a fluorescência: CD14 (PerCP), CD163
(PE), CD206 (FITC), CD64 (PE-Cy7), CD86 (BV421), CD200R (FITC), PD-1 (BV510),
PDL-1 (PE), CCR-1 (Alexa Fluor 647), CCR-2 (Alexa Fluor 647), CXCR-2 (PE-Cy5),
HLA-DR (PE-CF594) e adquiridas no citômetro LSRFORTESSA. Isotipos controles
foram utilizados para determinação de ligação inespecífica. A avaliação dos receptores
foi expressa em percentual de células positivas e/ou média geométrica de intensidade
de fluorescência (GMFI).
Resultados:
Os monócitos dos pacientes sépticos apresentaram diminuição do percentual
de expressão dos receptores CD163, CD86, HLA-DR, CCR2 e CXCR-2 em relação
aos sadios. De modo contrário, os receptores CD206, CD64, PD-1 e PDL-1
apresentaram maior expressão no grupo de pacientes. Apenas os receptores CD200R
e CCR-1 não apresentaram diferença significante entre os grupos. As GMFI dos
receptores CD86, CD64, HLA-DR e CXCR-2 também foram menores nos pacientes
que nos indivíduos sadios.
Conclusão:
A comparação entre os monócitos dos pacientes sépticos e indivíduos sadios
mostrou diferença em seu perfil imunofenotípico. No contexto da apresentação de
antígenos e ativação celular, o receptor de ativação (CD86) está diminuído enquanto
receptores de inibição (PD-1 e PDL-1) estão aumentados nestes pacientes. Há
aumento da expressão de CD206, que é utilizado como marcador de M2
(macrófagos/monócitos alternativamente ativados), e está envolvido na modulação da
resposta inflamatória e reparo tecidual. Curiosamente, o CD64, que é um receptor de
fagocitose
está
aumentado
nesses
pacientes.
Esses
dados
sugerem
uma
reprogramação dessas células, porém as mesmas não estão totalmente inativadas,
pois o receptor de fagocitose mantém-se preservado.