universidade estadual de goiás unidade universitária de são

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE GOIÁS
UNIDADE UNIVERSITÁRIA DE SÃO LUIS DE MONTES BELOS
TECNOLOGIA EM LATICÍNIOS
CARLOS EDUARDO FERREIRA
DETERMINAÇÃO QUALITATIVA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS DO TIPO
BETA-LACTÂMICOS EM LEITE IN NATURA DA BACIA LEITEIRA DA
MICRORREGIÃO DE SÃO LUIS DE MONTES BELOS - GO
SÃO LUIS DE MONTES BELOS
2011
1
CARLOS EDUARDO FERREIRA
DETERMINAÇÃO QUALITATIVA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS DO TIPO
BETA-LACTÂMICOS EM LEITE IN NATURA DA BACIA LEITEIRA DA
MICRORREGIÃO DE SÃO LUIS DE MONTES BELOS - GO
Artigo apresentado à Universidade Estadual de
Goiás como requisito para obtenção do título de
Tecnólogo em Laticínios.
Orientador: Profa. Dra. Cláudia Peixoto Bueno
SÃO LUÍS DE MONTES BELOS
2011
2
CARLOS EDUARDO FERREIRA
DETERMINAÇÃO QUALITATIVA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS DO TIPO
BETA-LACTÂMICOS EM LEITE IN NATURA DA BACIA LEITEIRA
MICRORREGIÃO DE SÃO LUIS DE MONTES BELOS - GO
Artigo
apresentado à
Universidade
Estadual de Goiás como requisito para
obtenção do título de Tecnólogo em
Laticínios.
Aprovado em: ____/____/____.
BANCA EXAMINADORA
___________________________________
Profa. Dra. Cláudia Peixoto Bueno
Orientador
___________________________________
Profa. Dra. Camila Silveira de Melo.
UEG
__________________________________
Profa. Dra. Aracele Pinheiro Pales dos Santos.
UEG
3
Dedico este trabalho ao meu pai e
minha mãe que sempre estiveram ao meu
lado. E também aos meus amigos e
professores que sempre me ajudaram e
apoiaram.
DEDICO.
4
AGRADECIMENTOS
A Deus, em primeiro lugar por sempre estar comigo, me iluminando e
concedendo bênçãos por cada dia de vida. Mas acima de tudo, agradeço a Ti
Senhor, por ter-me socorrido nas horas de aflição, cansaço e angústia, me
levantando novamente para batalha.
Aos meus pais, José Divino e Aparecida por estarem sempre ao meu lado,
me ajudando a superar dificuldades e, pela compreensão durante os momentos em
que não fui o melhor filho do mundo. Vocês são os responsáveis por essa vitória!
Ao meu grande querido tio Antonio Domingues, pessoa que admiro a
simplicidade que tem um homem de bem e que me ajudou muito nas horas difíceis o
qual permite conhecer toda minha vida pessoal, família e lar que também retribuiu da
mesma forma, não esquecerei nunca.
À minha orientadora Dra. Cláudia, pela paciência, serenidade, confiança, e
ensinamentos, me mostrando que dificuldades virão, mas que posso superá-las.
Vamos em direção a mais uma etapa!
A
coordenadora
do
curso
Abilene
Dias
e
aos
professores
que
desempenharam com dedicação as aulas ministradas.
Agradeço aos meus colegas e amigos que sempre estiveram ao meu lado,
aos funcionários da Universidade Estadual de Goiás que sempre estiveram prontos
a nos ajudar e a todos aqueles que direta ou indiretamente vivenciaram estes
momentos comigo torcendo e acreditando em mim.
As minhas jóias raras em que direciono todos meus esforços minhas
sobrinhas Brenda e Olivia por me trazer alegria nas horas de descanso revitalizando
minhas forças para lutar.
Aos meus irmãos Erivelton, Fernanda e Luis Geraldo, que foram prestativos
nas horas de dificuldade, por serem meus grandes pilares, e que me deram todo
apoio necessário, por acreditar que eu venceria, até mesmo quando pensava em
não conseguir.
À Universidade Estadual de Goiás, que me proporcionou a realização e
concretização deste sonho.
A todos da empresa LBR Lácteos Brasil S/A, onde tenho grandes amigos,
obrigado
pela
companheirismo.
paciência,
atenção,
respeito,
compreensão,
ensinamentos,
5
“A dúvida é o principio da sabedoria”.
Aristóteles
10
6
DETERMINAÇÃO QUALITATIVA DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS DO TIPO
BETA-LACTÂMICOS EM LEITE IN NATURA MICRORREGIÃO DE SÃO LUIS
DE MONTES BELOS - GO
Carlos Eduardo Ferreira1; Cláudia Peixoto2
RESUMO: A presença de resíduos de antibióticos em leite é um fator de risco para o
consumidor, pode ter efeitos adversos para saúde pública e para a indústria de
laticínios. O objetivo desse estudo foi verificar a presença de resíduos de antibióticos
pelo kit Charm-test™ (Hexis científica), que funciona por um princípio de inibição
microbiana que detecta resíduos β-lactâmicos entre outros antibióticos utilizados no
tratamento de infecções do gado leiteiro. Foram coletadas 720 amostras de leite cru
da microrregião de São Luis de Montes Belos – GO. Os resultados apresentados
mostraram 1,8% de positividade, ou seja, os resíduos β-lactâmicos estavam
presentes em 13 amostras do total analisado. A presença de resíduos de antibióticos
no leite contribui para a ocorrência do fenômeno de resistência microbiana e
possibilita a reações alérgicas nos consumidores deste produto, sendo considerado
um grave problema para a saúde pública. A presença de resíduos de antibióticos é
extremamente indesejável para as indústrias, haja vista que o resíduo atua na
inibição de culturas lácteas sensíveis utilizadas na fabricação de queijos, iogurtes e
outros produtos fermentados, alterando sua qualidade e dificultando sua obtenção.
As indústrias e o governo devem trabalhar para a conscientização dos produtores no
intuito que os mesmos compreendam os fatores que levam à presença de resíduos
no leite, e como preveni-los.
Palavras-chave: antibióticos, saúde pública, resíduo
ABSTRACT: The presence of antibiotic residues in milk is a factor of risk to the
consumer, so it can have adverse effects on public health and to the dairy industry.
The objective of this study was to verify the presence of antibiotic residues done by
charm-test kit(hexis scientific), which works by a principle of microbial inhibition that
detects residues b-lactam and other antibiotics used to treat infections in cattle. We
collected 720 samples of raw milk from the closest cities around sao luis de montes
belos-go. The results showed 1,8% positivity, so the b-lactam residues were present
in 13 of total samples analyzed. The presence of antibiotic residues in milk
contributes to te occurrence of the phenomenon of microbial resistance and allergic
reactions in consumers of this product being considered a very serious problem for
the public health. The presence of antibiotic residues is extremely undesirable for the
industry, because this residue acts in the inhibition of lactic cultures used in the
manufacture of cheese, yogurt and other fermented products changing its quality.
The industries and the government should work on the awareness of producers in
order to make them understand the factors that lead to residues in milk and how to
prevent.
Keywords: antibiotics, public health, waste
1
Acadêmico do curso de Tecnologia em Laticínios da UEG, UnU. de São Luís de Montes Belos/GO.
E-mail: < [email protected]>.
2 Profª Drª. do Curso Tec. em Laticínios, UEG UnU São Luís de Montes Belos/GO. E-mail:
<[email protected]>.
7
LISTA DE TABELAS
Tabela - 1
Concentrações de resíduos de antibióticos detectáveis pelo
Charm-test™ comparados com os LMRs tolerados pela
Legislação Brasileira.
8
LISTA DE FIGURA
Figura 1.
Unidade CHARM SL/MRL – TEST - Chapa aquecedora
Figura 2.
Interpretação visual dos resultados do kit Charm-test
Figura 3.
Resultados das análises de leite para pesquisa de antibióticos
9
LISTA DE ABREVIATURAS
ANVISA
Agência Nacional de Vigilância Sanitária
DDA
Departamento de Defesa Animal
DIPOA
Departamento de Inspeção de Produtos de Origem Animal
IN
Instrução Normativa
LMRs
Limites Máximos de Resíduos
MAPA
Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento
PAMvet
Programa de análise de resíduos de medicamentos veterinários em
alimentos de origem animal
PNCR
Plano Nacional de Controle de Resíduos em Produtos de Origem
Animal
SIF
Serviço de Inspeção Federal
Kg
Quilograma
µl
Microlitro
µg
Micrograma
10
SUMÁRIO
RESUMO................................................................................................
10
ABSTRACT............................................................................................
10
1.0
INTRODUÇÃO........................................................................................ 11
2.0
MATERIAIS E MÉTODOS ..................................................................... 13
3.0
RESULTADOS E DISCUSSÃO.............................................................
15
4.0
CONCLUSÃO ........................................................................................
17
5.0
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS......................................................
17
11
1.0 INTRODUÇÃO
De acordo com a Instrução Normativa 51 de 2002 do Ministério da Agricultura,
Pecuária e Abastecimento – (MAPA) - entende-se por leite, sem outra especificação,
o produto oriundo da ordenha completa e ininterrupta, em condições de higiene, de
vacas sadias, bem alimentadas e descansadas. O leite de outros animais deve
denominar-se segundo a sua espécie (BRASIL, 2002). Para Müller (2002), o leite é
considerado o mais nobre dos alimentos, por sua composição nutritiva: água 87%,
sólidos totais 13%, gordura 3,9%, lactose 4,8% e minerais 0,8%.
A origem do consumo de leite e da atividade leiteira no Brasil está ligada à
exploração do gado trazido durante o período de colonização. Inicialmente os
animais foram utilizados como força de trabalho nos engenhos de cana-de-açúcar, e
posteriormente como animais de corte em algumas regiões do país. O consumo de
leite até então, era de caráter secundário com poucas vacas sendo mantidas para
esta atividade (MIRANDOLA 2006, citado por ALVES, 2006).
Nas últimas décadas, qualidade e segurança alimentar têm recebido cada vez
mais atenção da população mundial, principalmente em relação a perigos químicos e
microbiológicos presentes em alimentos. Apesar de microrganismos patogênicos
serem mais comumente ligados a casos de enfermidades por ingestão de alimentos
contaminados, a presença de resíduos químicos também é bem comum em todo o
mundo.
A principal causa da presença de resíduo químico no leite resulta da
aplicação de antibióticos no rebanho leiteiro, para a prevenção e/ou tratamento de
doenças, com enfoque para as infecções da glândula mamária (mastite). Os
antibióticos, segundo Haraguchi (2011), são substâncias derivadas de organismos
vivos ou sintetizadas por eles capazes de inibir o crescimento de outros organismos.
Existem milhares de antibióticos, porém somente uma parte deles é usada na
medicina.
Para todo antibiótico existe um período de carência que consiste no prazo de
eliminação do antibiótico no leite, após a última aplicação. Este período varia de
produto para produto, e de acordo com a via de aplicação que pode ser
intramamária, intramuscular ou intravenosa. Sempre que um antibiótico é
recomendado para tratamento de vacas em lactação, deve-se estar atento para o
12
período de carência. Isto significa que neste período todo o leite da vaca tratada
deve ser retirado do consumo. O principal problema é que os produtores não
descartam o produto contaminado (NERO et al, 2007).
Segundo Brito (2005), existem várias razões que levam à preocupação com
resíduos de antibióticos no leite. Entre elas destacam-se o risco a saúde pública e a
industrialização de derivados lácteos. Tomazi (2011) afirma que estes resíduos
podem ser tóxicos e perigosos para a saúde humana, podendo causar uma série de
problemas como reações alérgicas e resistência à antibioticoterapia.
Para a indústria o principal problema é a inibição de culturas láteas sensíveis
utilizadas na fabricação de queijos, iogurtes e outros fermentados, dificultando sua
obtenção ou alterando sua qualidade. A pasteurização tem pouco ou nenhum efeito
sobre o conteúdo de resíduos de antibióticos em leite (BRITO, 2005). Segundo
Tomazi (2011), os processos térmicos convencionais aplicados no leite não
impedem que os resíduos de antimicrobianos cheguem à mesa dos consumidores.
O Plano Nacional de Controle de Resíduos (PNCR), instituído pela Instrução
Normativa 42/1999, regulamenta os procedimentos para o monitoramento e a
investigação dos níveis de resíduos e contaminantes nos setores de carne, mel, leite
e pescado. As ações no Ministério da Agricultura para a aplicação do PNCR são
desenvolvidas pela Coordenação de Controle de Resíduos e Contaminantes
(CCRC), vinculada à Secretaria de Defesa Agropecuária (SDA/MAPA).
Suas ações estão direcionadas para se conhecer e evitar a violação dos
níveis de segurança ou dos Limites Máximos de Resíduos (LMRs), de substâncias
autorizadas, bem como a ocorrência de quaisquer níveis de resíduos de compostos
químicos de uso proibido no país. Para isto, são colhidas amostras de animais
abatidos e vivos, de derivados industrializados e/ou beneficiados, destinados a
alimentação humana, provenientes dos estabelecimentos sob Inspeção Federal –
SIF (BRASIL, 1999).
O uso de medicamentos veterinários em animais produtores de alimentos,
cujos resíduos poderiam significar risco à saúde pública, deu início também ao
Programa de Análise de Resíduos de Medicamentos Veterinários em Alimentos de
Origem Animal - PAMVet em 2002, tendo como primeira matriz de análise o leite
bovino. O programa definido pela Resolução nº. 253 de 16/09/03 foi desenvolvido
pela Agencia Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), com o objetivo de
operacionalizar sua competência legal de controlar e fiscalizar resíduos de
13
medicamentos veterinários em alimentos, conforme determina o inciso II do
parágrafo 1º do Art. 8º da Lei nº. 9.782 de 26/01/1999. A implementação do PAMVet
é resultado de recomendações originárias de um fórum de discussão promovido pela
ANVISA em 2000 sobre resíduos de antibióticos no leite bovino.
Este trabalho tem como objetivo avaliar a incidência de resíduos de
antibióticos no leite cru da bacia leiteira do município de São Luis de Montes Belos
por meio de teste qualitativo de antibióticos do tipo beta-lactâmicos.
2.0 MATERIAIS E MÉTODOS
As amostras foram coletadas e analisadas em um laticínio do município de
São Luís de Montes Belos no período de julho de 2011 a setembro de 2011. As
amostras foram coletadas todos os dias, uma por caminhão, diretamente das
“bocas” em fracos plásticos próprios de 250 mL e levados imediatamente ao
laboratório físico-químico para realização das análises de rotina. Foram coletadas
amostras de 24 cidades todos os dias durante três meses, fazendo um total de 720
amostras.
As amostras foram analisadas com o kit Charm-test (Hexis científica), que
funciona por um princípio de inibição microbiana, ele detecta resíduos de βlactâmicos entre outros antibióticos utilizados no tratamento de infecções do gado
leiteiro.
Para a realização da análise a principio foi ligada a chapa aquecedora de
bancada e regulada a temperatura do bloco de ferro para 56ºC, foi ser tolerada uma
variação de no máximo + 1°C, pois a mesma não pode ser inferior a 51ºC, por inibir
a reação, ou superior a 60ºC por destruir os anticorpos ali presentes.
Logo após, os testes (kits comerciais) foram inseridos nas cavidades do
bloco, encaixando-os perfeitamente no orifício destinado a eles. Em seguida foi
adicionada a amostra de leite muito bem homogeneizada. A homogeneização é
fundamental, pois o teor de gordura não pode estar acima de 6%. Foi inserido em
cada teste 300 µl, de leite (exatamente o volume da micropipeta que acompanha o
kit). O adesivo plástico do teste é levantado e o leite é inserido lentamente na lateral
da cavidade do kit até a linha indicada pela seta conforme visualizado na Figura 1.
14
Colocação da amostra
Figura 1- Unidade CHARM SL/MRL – TEST
Chapa aquecedora
Neste momento, o leite foi absorvido por uma esponja cor laranja contida no
kit e logo após é liberado para a reação. O adesivo então foi fechado, o aparelho
tampado e o “timer” da chapa aquecedora ligada. Após oito minutos foi realizada a
Interpretação visual dos resultados como pode ser visualizado na Figura 2.
Figura 2 - Interpretação visual dos resultados do kit Charm-test
Fontes: Adaptado Charm Sciences, Inc., EUA; ANVISA, 2003;
15
Análises estatísticas
A análise dos dados baseou-se na distribuição de frequência absoluta e
relativa com utilização da estatística descritiva.
3.0 RESULTADOS E DISCUSSÃO
Das 24 cidades analisadas apenas 5 apresentaram resultados positivos para
antibiótico. Das 720 amostras analisadas (100%), foi encontrada a presença de beta
lactâmicos em 13 amostras, ou seja, 1,8% de positividade. Em 707 amostras não foi
encontrado resíduo de antibiótico, ou seja, 98,2% dentro dos padrões legais
vigentes, conforme pode ser visualizado na Figura 3.
Figura 3 – Resultados das análises de leite para pesquisa de antibióticos.
Os resultados apresentados por Nero (2007) tiveram maior incidência, ou
seja, 11,4% (24 amostras) apresentaram resultados positivos principalmente na
região de Londrina, encontrando também resíduos na da região de Botucatu - SP
(8,0%), Viçosa - MG (8,5%) e Pelotas – RS (6,0%).
Já Nascimento et al. (2001), relataram ter trabalhado com 96 amostras
analisadas. Dessas amostras 48 apresentaram substâncias antimicrobianas (50%)
16
sendo que 33 amostras (34,8%) apresentaram resíduo de antibióticos do tipo betalactâmicos.
Os resultados apresentados por Folly & Machado (2001), também
apresentaram resultado superior para a região Norte do Estado do Rio de Janeiro
onde entre as 300 amostras de leite analisadas 13 foram positivas, demonstrando
uma contaminação de 4,33%.
A sensibilidade desse teste para as diferentes substâncias antimicrobianas
estão na Tabela 1, assim como os LMRs (Limites Máximos de Resíduos) tolerados
pela Legislação Brasileira.
Tabela 1. Concentrações de resíduos de antibióticos detectáveis pelo Charm-test™
comparados com os LMRs tolerados pela Legislação Brasileira.
Concentração mínima para
Substância antimicrobiana
positividade no Charm-test
LMR (µg/Kg)
(µg/Kg)
β-lactâmicos
Penicilina G
3
4
Amoxicilina
6
4
Ampicilina
5
4
Ceftiofur
50
100
Cefapirina
10
NE*
200-300
100
25-50
100
Gentamicina
100-200
NE
Oxitetraciclina
100-150
100
40-50
NE
Sulfametazina
Sulfadimetoxina
Tilosina
Fontes: Adaptado Charm Sciences, Inc., EUA; ANVISA, 2003;
*NE = não especificado.
Estes resultados só reforçam a necessidade de políticas de melhoria de
conscientização dos produtores por parte das indústrias, órgãos de fiscalização
competente além da criação e manutenção de políticas já existentes como o
PAMVet e PNCR.
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4- CONCLUSÃO
- Conclui-se que houve uma pequena porcentagem de resultados positivos,
porém, diante dos riscos dos contaminantes químicos, estes resultados são bem
significativos para a saúde dos consumidores.
- A presença de resíduos de antibióticos no leite contribui para a ocorrência
do fenômeno de resistência microbiana e possibilita a reações alérgicas nos
consumidores deste produto, sendo considerado um grave problema para a saúde
pública.
- As indústrias devem trabalhar para a conscientização dos produtores no
intuito que os mesmos compreendam os fatores que levam à presença de resíduos
no leite, e como preveni-los, pois, a porta de entrada de resíduos de antibióticos e
outras substâncias químicas é a produção primária.
- Os programas governamentais implantados de caráter educativo e/ou
punitivo são de grande importância na luta a favor de um produto seguro à
população.
5.0 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
ANVISA - Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Programa Nacional de Análise
de Resíduos de Medicamentos Veterinários em Alimentos Expostos ao
Consumo - PAMVet. Brasília, 2003. Disponível em:
<http://www.anvisa.gov.br/alimentos/pamvet/pamvet.pdf>. Acesso em 01 agosto
2006.
BRASIL, Instrução Normativa no 51, de 18 de setembro de 2002. Aprova os
regulamentos técnicos de produção, identidade e qualidade do leite tipo...
Diário Oficial da União, Brasília, p. 13, 20 set. 2002. Seção 1.
BRITO, M. A. V. P.;LANGE, C. C. Resíduos de antibióticos no leite. Comunicado
técnico 44. Juiz de Fora - MG, dez. 2005
FOLLY, M. M.; MACHADO, S. C. A. Determinação de resíduos de antibióticos,
utilizando-se métodos de inibição microbiana, enzimático e imuno ensaios no
leite pasteurizado comercializado na região norte do estado do rio de janeiro,
Brasil .Ciência Rural, Santa Maria, v.31, n.1, p.95-98, 2001.
18
HARAGUCHI, T. Antibióticos: classificação geral.
farmacêuticas da Universidade São Paulo, Abril de 2011.
Faculdade
de
ciências
MAPA,2010. Residuos e Contaminantes. Disponivel em:
http://www.agricultura.gov.br/animal/qualidade-dos-alimentos/residuos-econtaminantes. Acesso em 13 de outubro de 2011.
MIRANDOLA, A. Panorama atual da cadeia produtiva do leite no brasil. Curso de
pós-graduação “latu sensu” em higiene e inspeção de produtos de origem animal e
vigilância sanitária de alimentos. Rio de Janeiro, nov. 2006.
MÜLLER, E. E. Qualidade do leite e células somáticas. Anais do II Sul- Leite:
Simpósio sobre Sustentabilidade da Pecuária Leiteira na Região Sul do Brasil,
Maringá : UEM/CCA/DZO – NUPEL, 2002. 212P. Toledo – PR, 29 e 30/08/2002.
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NASCIMENTO, G. G. F. et al. Ocorrência de resíduo de antibiótico no leite
comercializado em Piracicaba, SP. Ver. Nutr., Campinas, pag. 119-124,
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NERO L.A et al. Resíduos de antibióticos em leite cru de quatro regiões leiteiras
no Brasil. Ciênc. Tecnol. Aliment., Campinas, 27(2): 391-393, abr.-jun. 2007
TOMAZI, T. Efeito do tratamento térmico sobre os resíduos de antibióticos βlactâmicos. Artigo técnico, qualidade do leite, MilkPoint. Jan. 2011.