Procedimentos Técnicos Código: PROMIC-0001-1 Versão: 01 Pg: 1/4 TÍTULO: Hemocultura NOME Dr. Renato de Lacerda Barra Filho ELABORADO POR DE ACORDO Dr. Ivo Fernandes FUNÇÃO ASSINATURA Biomédico 01/10/2009 Gerente da Qualidade Biomédico 20/10/2009 Dr. Jose Carlos Diretor Executivo dos Santos HISTÓRICO DAS REVISÕES Revisado por Data Assinatura Aprovado por APROVADO POR Versão Versão 1 Responsável Ivo DATA REVALIDAÇÃO ANUAL Data Versão 01/10/2013 30/10/2009 Data Responsável Assinatura Data 1. NOME/ SINONÍMIA/ CULTURA DE SANGUE 2. PRINCÍPIO DO TESTE A cultura de sangue é realizada para identificar bactérias que possam estar na corrente sanguínea (septicemia). 3. SIGNIFICADO CLÍNICO A presença de microrganismos no sangue é denominada bacteremia e/ou fungemia e geralmente é patológica. Em indivíduos saudáveis, o sangue é estéril. No entanto existem algumas exceções como: a bacteremia transitória que ocorre pouco tempo após a extração de dentes, ou outros tratamentos odontológicos ou cirúrgicos de membrana mucosa contaminada, de broncoscopia ou cateterização uretral. Este tipo de bacteremia geralmente é causado por bactérias comensais e, via de regra, resolvese espontaneamente pela fagocitose das bactérias do fígado ou baço. A septicemia é um termo clinico usado para descrever uma bacteremia com manifestações clinicas de uma infecção severa, o que inclui calafrios, febre, indisposição, toxicidade e hipotensão, sendo o choque a sua forma extrema. O choque pode ser causado por endototoxinas produzidas por bacilos Gram negativos. 4. COLETA E TRATAMENTO DA AMOSTRA 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 Coleta da amostra: Consultar Manual de Coleta Tipos de amostra: sangue venoso e arterial. Volume mínimo para análise: Consultar Manual de Coleta Rejeição de amostras: N/A Condições de acondicionamento: Consultar Manual de Coleta Tratamento e pré-tratamento da amostra: N/A 5. MATERIAL REQUERIDO 5.1 Agulha a vácuo. 5.2 Algodão. Procedimentos Técnicos Código: PROMIC-0001-1 Versão: 01 Pg: 2/4 TÍTULO: Hemocultura 5.3 Lâmina 5.4 Microscópio óptico 5.5 Alcool 70% 5.6 Máscara 5.7 Luva 5.8 Óculos de proteção 5.9 Estufa bacteriológica 5.10 Bico de bunsen 6. REAGENTES 6.1 Frasco de cultura (Hemocult/Hemoprov adulto ou pediátrico). 6.2 Corantes para coloração de Gram. 6.3 Ágar Sangue, MacConckey. 7. PROCEDIMENTO DETALHADO • Procedimentos laboratoriais: 1 2 3 As hemoculturas são encaminhadas ao setor de Microbiologia, onde o colaborador do setor recebe o material no sistema. Após colocar os frascos de cultura na estufa. Os frascos devem ser tirados da estufa após 18-24 horas para a primeira semeadura em AS / MC. Caso a primeira semeadura seja negativa, semear a mesma amostra por mais 2 dias (de 24 em 24 horas). Frasco Semear em AS/ MC Gram Resultado Gram e semeadura Negativo Resultado negativo Resultado Gram e semeadura positivo Emitir Resultado parcial Identificação e antibiograma Procedimentos Técnicos Código: PROMIC-0001-1 Versão: 01 Pg: 3/4 TÍTULO: Hemocultura Semeadura • Limpar a borracha do frasco com algodão e álcool 70%, para que não haja contaminação. • Colocar uma agulha com seringa sob a borracha do frasco; • Inclinar o frasco e aspirar um pouco da amostra, depois desprezar a amostra de forma a cair uma gota sob cada placa (Agar Sangue, MacConkey); • Flambar a alça de platina e esfriá-la no canto da placa(se utilizada); • Semear a hemocultura por esgotamento. • Incubar as placas de Agar Sangue e MacConkey na estufa a 35ºC ±1. • Realizar a leitura com 18-24 horas. Se: - Resultado positivo: realizar a identificação e o antibiograma. - Resultado negativo: Incubar mais 24 horas (durante 3 dias) se permanecer negativo liberar o resultado. Homogeneização • As amostras devem ser homogeneizadas a cada 4 horas. 8. CÁLCULOS/ LIBERAÇÃO DOS RESULTADOS Positivo - Reportar o microrganismo isolado e o antibiograma. Negativo - Não houve crescimento de microrganismo na amostra semeada. 9. CONTROLE DE QUALIDADE NA 10. INTERVALO DE REFERÊNCIA Negativo 11. INTERVALO CRÍTICO Hemocultura positiva 12. CONFIABILIDADE ANALÍTICA N/A 13. INTERFERENTES Volume não respeitado; Coleta inadequada Acondicionamento do frasco inadequadamente. Frascos colocados em estufa ou geladeira até ser transportado para o laboratório podem gerar resultados falso-negativos. 14. INTERVENÇÕES N/A 15. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS - Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH (eds): Manual of Clinical Microbiology, 7ª ed. American Society for Microbiology, Washington, DC, 1999. - Silva CPHM: Bacteriologia , um texto ilustrado, 1ª ed. Rio de Janeiro, Ed. Eventus, 1999. - Koneman, EW: Diagnóstico Microbiológico- Texto e Atlas Colorido, 5ª ed, MEDSI, 2001. - Oplustil, CP: Procedimento Básico em Microbiologia Clínica, Ed. Saraiva, São Paulo, 2000. Procedimentos Técnicos Código: PROMIC-0001-1 Versão: 01 TÍTULO: Hemocultura - www. saúdetotal.com.br Pg: 4/4