Cursode deférias férias::Insecta Insecta: Coleta,Montagem MontagemeeManutencão Manutencãode de Curso : Coleta, coleções; MorfologiaeePrincipais PrincipaisCaracter Características Taxonômicas cole ções; Morfologia ísticas Taxonômicas AntonioA. A.Santos SantosNeto Neto Antonio UniversidadeFederal Federaldo doParaná Paraná. UFPR Universidade á. UFPR Paran CentroUniversitá Universitário Filadélfia. UniFil Centro ário Filadé élfia. UniFil Universit Filad INTRODUÇÃO • Os insetos são, atualmente, o grupo mais abundante de animais na terra • Cerca de 1000.000 de espécies descritas • 70 % de todos os animais conhecidos Introdução Importância • Polinização • Produção de produtos comerciais (Mel, Cera, Seda) • Alimento para outros animais (Aves e Peixes) • Auxiliam a manter animais e plantas nocivos sob controle • Úteis na medicina e em pesquisas cientificas • Pragas Agrícolas e de grãos armazenados • Vetores de doenças • Indicadores de conservação e biodiversidade INTRODUÇÃO ► JUSTIFICATIVA •Entomologia aplicada e didática •Controle biológico de pragas = identificação básica; •Vigilância sanitária e saúde pública •Trabalhos ecológicos (Levantamentos Populacionais) •Identificação = utiliza principalmente morfologia externa = boa preservação dos caracteres externos específicos para identificação de cada grupo COLETA MATERIAL BIOLÓGICO COLETA MATERIAL BIOLÓGICO Regras básicas •Vestimentas adequadas (calças e manga longa) •Coletar sempre com mais de uma pessoa •Evitar coletas em dias de chuva ( exceto em trabalhos ecológicos de levantamento faunístico) •Chapéu •Calçado fechado (Preferencialmente botas) •Água e alimento •Levar somente o necessário para poupar esforços •Caneta e caderno para anotações de campo COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► COLETAS ATIVAS: Com redes, aspiradores, guarda-chuvas entomológico, pinças, frascos ► COLETAS PASSIVAS: Utilização de armadilhas diversas Coleta de grande número e variedade de insetos Utiliza princípios atrativos químicos ou físicos COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► COLETAS ATIVAS Permitem a exploração de habitats muito específicos, direcionando voluntariamente o esforço de coleta; presença ativa do coletor Pinças Pinçéis Facheamento: Coleta noturna com utilização de lanterna COLETAS ATIVAS Revolvimento de troncos e serrapileira Varredura com rede entomológica Guarda chuva entomológico Coleta aquática com redes e peneirão interceptação de vôo COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► COLETAS ATIVAS Vidros letais Envelopes e mantas Fonte: Almeida et al. 1998 Borboletas são sacrificadas com leve pressão dos dedos no tórax Mariposas de tamanho robusto injeta-se de ½ à 1 ml de álcool 70% no abdômen COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► COLETAS ATIVAS Guarda-chuva Aspiradores Fonte: Almeida et al. 1998 COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► COLETAS ATIVAS Rede entomológica Rede para coleta aquática COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► PASSIVAS (ARMADILHAS) Armadilhas => dispositivo onde os insetos adentram e não conseguem sair Armadilha Malaise Desenvolvida pelo suéco René Malaise Utilizada em dípteros e himenópteros (fonte de alimento através do vôo) Insetos retidos ao sobrepor a barreira e capturados em recipiente contendo álcool 70% localizado ponto mais alto da tenda. Instalação em clareiras Armadilhas tipo Malaise suspensas (20 – 25 metros) COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► PASSIVAS (ARMADILHAS) Fonte: Almeida et al. 1998 - Malaise Armadilha de interceptação do vôo COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilha tipo Shannon Criada por Shannon em 1939 Atração por estímulo quimico (carne em decomposição, frutos fermentados, iscas vivas (humana ou animal) ou fonte luminosa Constituída por um teto e partes laterais iguais costuradas que ficam penduradas a poucos centímetros do solo. Ordem Diptera Fita inseticida para captura dos insetos ou coleta manual COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS - Shannon Fonte: Almeida et al. 1998 COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilha de solo Iscas atrativas => peixe, carne e frutas fermentadas Pitfall – sem o uso de isca Coleta do Material COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilhas para borboletas Atração por frutos em decomposição (banana amassada + caldo de cana) Fonte: Almeida et al. 1998 Ovitrampas – coletas de ovos mosquitos COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilha para moscas Atração => matéria vegetal ou animal em decomposição (bactérias fermentadoras) Ferreira (1978) Frutos em decomposição => atrai drosófilas, vespas, borboletas e besouros Carne (fígado ou peixe) => Muscidae, Calliphoridae e Sarcophagidae Fezes => Sarcophagidae Pode-se coletar esses insetos localizando matérial vegetal ou animal em decomposição (larvas – adultos) COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilha luminosa Fonte luminosa => atrativo para insetos alados diversos Armadilha luminosa “Luiz de Queiroz” (Silveira Neto, 1969) COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Funil de Berlese Material coletado (folhiço) – submetido a calor Insetos de movimentos lentos – cuidado com a fonte luminosa (calor) exagerado Fonte: Almeida et al. 1998 COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Pano para coleta de insetos noturnos Lâmpadas de mercúrio => atração maior que lâmpadas de filamento comum Insetos capturados manualmente junto ao pano Fonte: Almeida et al. 1998 ►v COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Bandejas coloridas Cores azul, branco, vermelho, verde ou preto Afídeos => amarela a 1m do solo COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilha tipo “MacPhail” Coleta de dípteros Frasco transparente com uma única abertura na parte inferior Substância atrativa: melaço de cana COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilha tipo “Fotoecletor” (Eclosão) Fototropismo positivo de alguns insetos Utilizada em ambiente aquático como terrestre Insetos emergem dentro da armadilha Diptera, Odonata, Ephemeroptera COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHAS Armadilha “Cartão adesivo colorido” Atração pela cor Substância adesiva pode ser retirada com solventes Amarelo e o azul => cores usuais Amarelo => Hymenoptera Substância adesiva não sai com chuva Complicada para trabalhos taxonômicos (danificação do material biológico) Armadilha adesiva com atrativo (Feromônio) Monitoramento COLETA MATERIAL BIOLÓGICO ► ARMADILHA Armadilha tipo “Disney” Captura de insetos hematófagos (Diptera) Animal como isca para o repasto sanguíneo Sacrifício do animal ao final da coleta MANUTENÇÃO DE IMATUROS -Identificação de imaturos (ninfas, larvas e pupas) – difícil -Obtenção dos adultos (gaiolas de emergência) -Vidros de boca larga; -Insetos que vivem em frutos, vagens, sementes ou madeira (caixa de papelão com vidro acima acoplado -Casa de vegetação e câmaras incubadoras -Respeitar temperatura, umidade, fotoperíodo MANUTENÇÃO DE IMATUROS Estufa de cultura Termômetro (max-min) Termohigrômetro Desumidificador MANUTENÇÃO DE IMATUROS Alimento -Espécies generalistas => baratas, gafanhotos e formigas -Momento da coleta => observar o tipo de alimento -Espécies predadoras -Insetos hematófagos Problemas com a criação -Aparecimento de ácaros, fungos e bactérias (higienização) -Canibalismo em predadores (individualização) -Parasitas e predadores (problemas na criação) -Umidade (produtos armazenados – pouca umidade) -Maioria bastante umidade (cuidados para não condensar e matar o inseto) -Excesso de umidade => fungos MANUTENÇÃO DE IMATUROS Temperatura Fotoperíodo Coleta de plantas Prensa para exsicatas MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Preservação temporária a) Refrigeração (acondicionados em recipientes) e no freezer com pouca umidade; -Papel absorvente entre os insetos ajuda a manter pouca umidade b) Preservação em via liquida (álcool e liquidos conservantes) Culicidae, borboletas e mariposas => não recomendado Álcool vendido comercialmente => 42ºGL = 96% e 36ºGL = 85% Etanol ou álcool etílico a 70% => melhor liquido para conservação e o mais utilizado Hymenoptera parasitóides preservados em álcool 95% => previne dobramento das asas e enrugamento das partes do corpo) Concentração de álcool baixa => conservação insuficiente Alta concentração=> perda de água do material por pressão osmótica MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Preservação em via seca Mantas ou envelopes (insetos de asas grandes) Etiquetagem do material -Câmara úmida (areia úmida + naftalina ao fundo) e na areia, pode ser colocado papel filtro ou jornal onde coloca-se o inseto -Montagem e preservação permanentes -Importantes para preservação e identificação -Montagem em lâminas => afídeos MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Alfinetagem direta Alfinetes de aço inoxidável, pois não enferrujam; Alfinetes entomológicos importados Bloco de madeira para padronização de alturas (1,0cm) abaixo da cabeça do alfinete; Pode-se colar diretamente o inseto no alfinete Posição do alfinete Esticadores para Lepidoptera Cola a base de água para possivel remoção em excesso Esmalte de unha => removido com acetona ou thinner MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Fonte: Almeida et al. 1998 MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Fonte: Almeida et al. 1998 MONTAGEM E PRESERVAÇÃO MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Dupla montagem -Triângulo (picotadores para confecção) -Dois triângulos para insetos de corpo alongado -Montagem em lâminas -Pulgões e Thysanoptera (Técnica) – lâmina permanente a) Vários exemplares em tubo de ensaio com álcool 70%, fervidos em banhomaria (1 a 2 minutos); retira-se o álcool e adiciona hidróxido de potássio ou sódio 10%, ferver mais 2 minutos (insetos claros). Retira-se a solução, colocando água destilada para lavar o excesso da soda e deixar em banhomaria por 10 minutos; retira-se água adiciona ácido acético glacial (2 a 3 minutos) e deixar decantar. Retira-se o liquido e acrescenta-se mais ácido por 2 ou 3 minutos, deixando decantar novamente. Adicionam-se algumas gotas de óleo de cravo por no mínimo 10 minutos antes de proceder a montagem em bálsamo do Canadá. b) Manter lâmina em posição horizontal => por várias semanas e acrescentar dados de procedência, coloração, dados ecológicos MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Montagem em lâminas semi-permanente Liquido de Hoyer’S Goma arábica => 30 g Glicerol => 16mL Hidrato de cloral => 200g Água destilada => 50mL Dissolver goma em água em pequenas partes, adicionar hidrato de cloral e após o glicerol => coar em gaze. Montagem em lâmina permanente Bálsamo do Canadá MONTAGEM E PRESERVAÇÃO Cuidados na montagem Corpos dos insetos maleáveis Insetos estocados em via liquida devem passar por desidratação antes da alfinetagem. Conservados em álcool 70% enrugam devido a presença de água (Exceção: besouros e percevejos) Desidratação: banhos de 80% ao álcool absoluto (10 minutos cada) Conservação em via liquida Álcool 70% Hymenoptera parasitóides conservados em álcool 95% (previne dobramento de asas e enrugamento do corpo) Trips => álcool + ácido acético glicerinado Formas imaturas ou corpo mole: 55mL de água destilada; 35 mL de álcool 95%; 10 mL de formol e 4 mL de ácido acético glacial MONTAGEM E PRESERVAÇÃO -Larvas => sacrificar em água fervente pura ou solução fervente de água + álcool por alguns minutos e transferir a álcool 70%; -Fixador de larvas: 1 parte de querosene, 10 partes de álcool isopropílico e 2 partes de ácido acético glacial Insetos para estudos anatômicos: fixados em Bouin alcoólico: 1g de ácido pícrico, 150 mL de álcool 80%, 60 mL de formol e 15 mL de ácido acético glacial. Fixa-se por até 24 horas e transfere ao álcool 70% Cuidados: Evaporação do álcool Guardar em armários hermeticamente fechados Fotodecomposição dos pigmentos ETIQUETAGEM 2cm 1cm Brasil PR. Londrina 14-II-2006 Recanero, J. A. col. Tinta nanquim Papel branco resistente (via seca) Papel vegetal (via liquida) Etiquetas paralelas ao corpo 1º etiqueta = procedência 2º etiqueta = Nome da espécie Culex saltanensis Dyar, 1928 Lopes, J. det. 98 Em lâminas etiquetas de procedência canto esquerdo e identificação do lado direito Etiquetagem é etapa importante ARMAZENAMENTO Secagem completa do inseto (estufa 24 horas) Acondicionamento em caixas plástico ou papelão com fundo polietileno ou isopor Separar caixas por espécies, gêneros, famílias Caixas de 5x10cm, 10x10 cm, 10x20cm, acondicionadas em gavetas de madeiras e tampa de vidro Seguir critério alfabético de organização ou evolutivo Manter umidade baixa (desumidificadores) Naftalina em pó ou formalina Temperaturas baixas Proteção da luz (fotodecomposição) da cor dos exemplares Museu Pe. Jesus Santhiago Moure UFPR Coleção cientifica Coleção didática IDENTIFICAÇÃO DO MATERIAL ► IDENTIFICAÇÃO X CLASSIFICAÇÃO ► CHAVES DICOTÔMICAS TAXONOMIA E SISTEMÁTICA TÁXON - qualquer agrupamento de organismos biológicos, construído com base em uma definição. SISTEMÁTICA ferramenta mais adequada para organizar a informação sobre a diversidade biológica, de modo que sirva como um SISTEMA GERAL DE REFERÊNCIA. CHAVES PICTÓRICAS DICOTOMICAS IDENTIFICAÇÃO DO MATERIAL Principais caracteres para identificação de ordens em insetos Asas (numero e tipo) Abdômen Antenas Pernas Aparelho bucal Asas Membranosa Élitro Hemiélitro Tégmina Moscas e mosquitos Besouros Percevejos Baratas Abelhas e vespas tesourinhas Borboletas e mariposas Grilos Louva-Deus Abdômen Sécil Livre peciolado Antenas Filiforme Moniliforme Clavada Geniculada Plumosa Denteada Serreada Flabelada Plumosa Pernas Ambulatórias Prenssora Natatórias Raptatótia Fossorial Saltatória Escansorial Aparelho bucal Aparelho bucal Mastigador Picador sugador Lambedor (sugador labial) Sugador Maxilar (expirotromba) BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA PARA ESTUDOS EM ENTOMOLOGIA BIBLIOGRAFIA Almeida, L. M.; Ribeiro-Costa, C. S.; Marinoni, L. 1998. Manual de coleta, conservação, montagem e identificação de insetos. Ribeirão Preto. Holos, Editora Ltda-ME. 88p. Azevedo Filho, W. S.; Júnior, P. H. S. P. 2000. Técnicas de coleta & Identificação de Insetos. Porto Alegre: EDIPUCRS. 97p. Upton, M. S. 1991. Methods for Collecting, presenving, and studying insects and allied forms. Fourth Edition. The Australian Etomological Society. 86p. AGRADECIMENTOS -A Comissão Organizadora dos cursos de férias UniFil -A coordenação do curso de ciências biológicas João Antonio Cyrino Zequi Técnicos da UniFil – Sr. Jovenil José da Silva -Fabrício Baccaro – Inpa – Manaus - XXVII Congresso Brasileiro de Zoologia www.cbz2008.com.br CONTATO Mestrando. Antonio Alberto Dos Santos Neto Universidade Federal do Paraná Setor de Ciências Biológicas Departamento de Zoologia Programa de Pós-graduação em Entomologia Caixa Postal 19020 81531-980 Curitiba, PR Telefax:: (41) 3361-1763 E-mail: neto_ [email protected]