VACINAS DE INTERESSE ZOOTÉCNICO: PRODUÇÃO E BEM -ESTAR ANIMAL ALUNOS VACINAÇÃO ANTIRRÁBICA EM BOVINOS José Flávio dos Reis Lima Vieira Kaio Souza Gomes Luara Roberta Gonçalves Mariana da Silva Leal Natália Brasil Silveira Sergio Miranda de Souza Junior Victória Rizzato Paschoal FEBRE AFTOSA João Victor Rosa Kawazulita Jéssica Bisoto Sartori Luiz Antônio Fogaça Vitória Camargo Maimara Massoca BRUCELOSE Gustavo Barbosa Laura Granero Mariana Poletto Matheus Henrique Yasmim Viana VACINAÇÃO CONTRA ESTREPTOCOCOSE EM TILÁPIAS Marcelo A. Pedrazzoli Rodrigo Garcia Rafael Giacomini Kauan Alves PROFESSOR RESPONSÁVEL: Silvio Luis de Oliveira EDIÇÃO: Aline Parisoto Missio INTRODUÇÃO A zootecnia é uma área que envolve, principalmente, o melhoramento animal e o aumento de sua produção. Para que isso ocorra, os profissionais devem se ater com o bem-estar destes, pois os mesmos em condições desfavoráveis acarretam na perda da produtividade. Portanto, uma das medidas utilizadas para manter a saúde animal em dia é a vacinação. Basicamente existem duas formas de imunização: Ativa que pode ser natural após uma infecção ou artificial que é a própria vacinação. A imunização passiva pode ser também natural pela transferência placentária e amamentação ou também artificial através da soroterapia. O processo de vacinação consiste em diversas formas de aplicação de acordo com a patogenicidade abordada. As vacinas se apresentam das seguintes formas: simples, mistas e polivalente e quanto a constituição podem ser vivas ou atenuadas, mortas ou inativadas, toxóides que são produtos dos microorganismos, subunidades do agente (vacinas sintéticas), produtos de lise bacteriana e vacinas gênicas. Neste trabalho, os alunos do 2º ano do curso de Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da UNESP do campus de Botucatu durante as aulas da disciplina de Microbiologia e Imunologia desenvolvidas no Instituto de Biociências campus de Botucatu realizaram uma breve revisão abordando algumas vacinas contra doenças de interesse zootécnico que afetam a produtividade animal. Tais como: brucelose, raiva, febra aftosa e estreptococose. VACINAÇÃO ANTIRRÁBICA EM BOVINOS O QUE É A RAIVA A raiva é uma doença aguda do sistema nervoso central (SNC) que pode acometer todos os mamíferos, inclusive os seres humanos. É caracterizada por uma encefalomielite fatal causada por vírus do gênero Lyssavirus (Ito, 2004), formado por RNA da família Rhabdoviridae (doença endêmica no Brasil) e também é uma zoonose. Segundo Ito (2004), o vírus da raiva possui formato de “ bala de revólver”, variando de 75nm de diâmetro e 100 a 300 nm de comprimento de acordo com a amostra considerada. O vírus é composto por um envoltório formado por uma dupla membrana fosfolipídica de composição glicoproteica, que envolve o nucleocapsídeo de conformação helicoidal, composto de um filamento único de RNA. O vírus da raiva é pouco resistente aos agentes químicos, aos agentes físicos, como o calor, e às condições ambientais, como dessecação. A forma clínica mais frequente na espécie bovina é a raiva paralítica, apresentando sintomas típicos, tais como: ranger dos dentes, sialorréia, apetite e deglutição ausentes ou diminuídos, retenção de fezes e urina, reflexos centrais e periféricos diminuídos, sensibilidade cutânea diminuída e andar cambaleante, evoluindo para decúbito e, posterior morte de seis a oito dias do início do quadro (Reis et al., 2003). O sinal inicial é o isolamento do animal, que se afasta do rebanho, apresentando certa apatia e perda do apetite, aumento da sensibilidade e prurido na região da mordedura, hiperexcitabilidade, aumento da mugido constante, tenesmo, libido, salivação abundante e viscosa e dificuldade para engolir. Com a evolução da doença, apresenta movimentos desordenados da cabeça, tremores musculares e ranger de dentes, midríase com ausência de reflexo pupilar, incoordenação motora, andar cambaleante e contrações musculares involuntárias. Após entrar em decúbito, não consegue mais se levantar e ocorrem movimentos de pedalagem, dificuldades respiratórias, opistótono, asfixia e finalmente a morte que ocorre geralmente entre 3 a 6 dias após o início dos sinais, podendo prolongar-se, em alguns casos, por até 10 dias. Uma vez iniciados os sinais clínicos da raiva, nada mais resta a fazer, a não ser isolar o animal e esperar sua morte, ou sacrificá-lo na fase agônica (Ito, 2004). Após observar-se os sinais clínicos segundo Ito 2004, é invariavelmente fatal para os aniamais. Para o ser humano existem vacinas pós-exposição. No Brasil, a raiva é, na maioria das vezes, transmitida pelo morcego hematófago Desmodus rotundus; no entanto, outros morcegos hematófagos (Diphylla ecaudata e Diaemus youngii) assim como cães podem transmitir a doença (Lima, 2005). A raiva é transmitida pela saliva infectada que entra no corpo por meio de uma mordida ou pele lesionada. O vírus viaja da ferida até o cérebro, onde causa inchaço ou inflamação. Essa inflamação leva aos sintomas da doença. A maioria dos casos de morte por raiva ocorre em animais jovens e crianças. COMPOSIÇÃO DA VACINA É produzida com a cepa G-52 de vírus fixo Pasteur da raiva, obtida do Instituto Listar (Filadélfia – USA), multiplicada em cultura de células de linhagem NIL2, também desenvolvida no Instituto Listar. A cepa G-52 é utilizada tanto na produção de vacinas veterinárias como humanas. A linhagem NIL2 é muito susceptível ao vírus da raiva, permitindo a produção de grandes quantidades de antígenos. MANEJO DE VACINAÇÃO A vacinação é um item necessário na produção animal, para o controle e erradicação de certas doenças que podem causar problemas ao homem e aos animais, muitas vezes causando perdas econômicas. Para isso a organização do calendário de vacinação de acordo com o programa oficial de vacinação de cada estado é importante para se obter um clima favorável e tendo em vista um ponto imunológico conveniente por parte dos animais. É importante que todos os animais a serem vacinados estejam em condições ótimas de nutrição, para que ocorra uma resposta mais eficiente do sistema imune após a vacinação. Os cuidados com a propriedade onde ocorrera a vacinação também é um fator importante a ser analisado; verificar o tronco de contenção e o bom funcionamento das porteiras para a passagem dos animais, mantendo o local limpo e seco, deixando assim o processo mais rápido e sem danos aos animais. O processo de preparação dos equipamentos de vacinação é feito com antese cadência, obtendo o número necessário de agulhas e em boas condições de trabalho, agulhas cegas ou tortas devem ser descartadas. As agulhas devem ser esterilizadas (fervura). Obter as vacinas de fabricantes registrados no Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), verificando a data de validade dos frascos. O armazenamento deve ser feito em caixas térmicas com gelo reciclável evitando o acumulo da água dentro das caixas, as temperaturas devem ser mantidas entre 2 º e 8 º , evitando o congelamento pois pode causar perda da eficácia das vacinas. No caso da vacinação contra a raiva a maioria dos fabricantes indicam 2ml por animal, aplicação intramuscular em animais acima dos 4 meses de idade. A administração intramuscular deve ocorrer no interior do músculo, na tábua do pescoço com a pistola de vacinação perpendicular ao corpo do animal. O manejo dos animais no momento da vacinação é importante para evitar estresse, e assim, podendo causar prejuízos na resposta imunológica à vacinação. A condução até o local de vacinação deve ser feita sem gritos e correrias, tendo sombra e água disponível aos animais que serão vacinados. O trabalho em poucos lotes facilita a organização e minimiza o estresse. O manejo inadequado dos animais e dos equipamentos de vacinação podem causar animais com resposta imunológica baixa e até com lesões feitas pelas agulhas aplicadas de forma errada, deixando feridas abertas para a entrada de outros patógeno nos. A preparação das pessoas que realizaram o processo é de grande importância para evitar perdas com o material e a boa relação entre homem e animal, para a obtenção de um bom resultado. PRA QUE SERVE A VACINAÇÃO CONTRA RAIVA A raiva provoca encefalite fatal causadora de danos neurológicos que não possuem cura, por este motivo se torna uma doença responsável por numerosas mortes que consequentemente geram grande prejuízo econômico para produtores e profissionais relacionados a área, como é o caso os zootecnistas, além disto é umas das zoonoses mais importantes e afeta diversas regiões. O princípio da vacinação é a imunização, portanto deve ser utilizada principalmente em áreas que tem presença do morcego hematófago Desmudos r o t u n d o s , um dos principais causadores da doença, pois somente eliminar o causador grande parte das vezes não é o suficiente, sendo mais eficaz o desenvolvimento da resposta imune, que é um mecanismo de defesa. A imunogenicidade adquirida através da vacina desenvolve uma primeira resposta imune no primeiro contato e consequentemente produz anticorpos e linfócitos de memória,sendo assim na segunda resposta imune será maior e mais duradoura. Uma das grandes vantagens da vacinação é a proteção mantida por um longo período de tempo e também evita os danos neurológicos que são consequências da raiva. Na vacina antirrábica é utilizado o vírus inativado, a inativação é feita mantendo o vírus em condições adversas e os que sobreviventes destas condições perdem a patogenicidade, essa utilização ocorre devido o vírus ativado poder trazer danos. A vacinação contínua dos bovinos é o método mais efetivo, de menor custo e reduz as perdas econômicas (ALBAS et al., 2006; LIMA et al., 2005; PIZA et al., 2002), portanto é necessário que seja aplicada e fator que a tornou o b r i g a t ó r i o . A desvantagem do uso de vacinas é aplicar dosagem incorreta, pois o uso de poucas doses não tem grande eficiência, além dos testes de verificação da vacina não serem feitos em campo, limitam-se em aprovar ou desaprovar as vacinas com base em ensaios de laboratório (HA BEL, 1996). IMPACTO ECONÔMICO Como resultado da falta de vigilância sanitária adequada, de conscientização dos criadores e de notificações sobre casos da doença em rebanhos bovinos, a raiva causa grandes perdas econômicas. Primeiramente, por ser uma doença de notificação compulsória, caberá sanção legal ao p r o p r i e t á r i o que não cumprir com essa obrigatoriedade. Dados apontam que nos anos 90, 40.000 bovinos morriam anualmente no Brasil, o que representaria um prejuízo de US$ 15 milhões de dólares; no estado do Rio de Janeiro foram estimadas perdas econômicas por volta dos US$5 milhões de dólares, resultado da queda da produção de leite e carne. Os prejuízos vão além da morte dos bovinos, mesmo que a doença não seja transmitida, o D. rotundos pode causar espoliação dos animais, anemia progressiva e depreciação do couro pelo hábito da sanguinívora. PRAZOS E ESQUEMAS DE VACINAÇÃO Os animais nascidos após a vacinação do rebanho deverão ser vacinados contra raiva quando atingirem a idade recomendada de três meses. Os estados podem legislar complementarmente sobre a necessidade de vacinação compulsória e sistemática em áreas consideradas de risco, baseando-se no modelo citado no item anterior. A vacinação é compulsória quando da ocorrência de focos da doença e deve ser adotada preferencialmente em bovídeos e equídeos com idade igual ou superior a três meses. Em animais com idade inferior, pode ser orientada caso a caso, de acordo com a avaliação técnica de um médico veterinário. A vacinação contra essa doença só é feita em regiões onde existem colônias permanentes de morcegos sugadores de sangue. A vacinação se torna obrigatória quando aparecem focos esporádicos da doença em certas regiões. A aplicação da vacina é anual e feita em todo o rebanho, independentemente de idade. Vacinar todo rebanho, nas regiões endêmicas uma vez por ano, E nas regiões livres, somente quando determinada pelas secretarias de agricultura. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ALMEIDA, Marilene F. et AL . Resposta imune humoral de cães à vacina inã- tibada, de cérebro de camundongos lactentes, utilizada nas campanhas antirrábicas no Brasil. Rev. Saúde Pública, São Paulo , v. 31, n. 5, p. 502-507, Oc. 1997. . Disponível em: <http://www.scielo.br/scielo.php?cripto=csi_texturar&pi=S003489101997000600009&ng=EN&nem=ISO>. acessa om 30 June 2016. http://dx.doi.org/10.1590/S0034-89101997000600009. Arã. Inst. Biol., São Paulo, v.72, n.2, p.153-159, abr./jun., 2005 Arã. Inst. Biol., São Paulo, v.73, n.4, p.421-427, out./dez., 2006 BRASIL. MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO. 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Conhecida na antiguidade por Columela e Claudius Vegetes, a febre aftosa já era de conhecimento de alguns estudiosos e entendedores do assunto, os quais já acreditavam na contagiosidade da enfermidade. Somente em 1546 Girolamo Fracastoro, acreditando se tratar de algo contagioso, propôs o isolamento dos animais doentes. (Pires, 2010). Doença que atinge quase todo o mundo, segundo Northoff (2004), endêmica em várias localidades, sendo no Brasil reduzida a partir de 1970, com a preocupação com a qualidade das vacinas (Teixeira, 2008). Nessa mesma década foi implantado um sistema de informação, que permitiu sistematizar o combate à febre (Lyra e Silva, 2004). Com o trânsito de animais sendo um dos maiores disseminadores da doença (Lyra e Silva, 2008), em 2000 a febre aftosa retornou às manchetes dos jornais devido ao reaparecimento do vírus em animais de países considerados erradicados da doença, como a Comunidade Europeia, Argentina e Japão (Pituco, 2006), voltando a ser uma preocupação. Segundo a Beefpoint (2005), em 2005 países importadores de nossa carne bovina impuseram restrições à compra, exigindo maiores cuidados sanitários, devido à ocorrência de um foco, com isso 52 países embargaram a compra da carne brasileira. Da família Picornaviridae e gênero aphtovirus, o agente da febre aftosa é um dos menores vírus entre os patogênicos tanto para os animais quanto para o ser humano (Beer, 1999). “O vírus da febre aftosa apresenta simetria icosaédrica, não possui envelope e o vírion apresenta dimensões de 25 a 30 nm de diâmetro. O capsídeo de superfície externa é regular, simétrico, composto de sessenta unidades estruturais idênticas, sendo cada uma dessas unidades denominadas protômeros, cada um formado por quatro proteínas principais VP1, VP2, VP3 e VP4. São proteínas estáveis e garantem a proteção do genoma em ambientes hostis. A proteína VP4 esta localizada na superfície interna do capsídeo” (PIRES, 2010). Ainda segundo Pires (2010), esse agente etiológico esta agrupado em sete tipos virais distintos, que causam a febre aftosa. No Brasil temos os tipos A, O e C e as vacinas contem os sorotipos virais A24 Cruzeiro, O1 Campos e C3 Indaial. Presente no feno e no pelo dos animais por até quatro semanas, PIRES, 2010 ainda diz que os estábulos, salas de ordenhas, troncos, comedouros e bebedouros são permanentemente contaminados com o vírus e, dessa forma, facilmente transmitido simplesmente pelo contato. O vírus acomete animais bi ungulados, tanto domésticos como selvagens, como os bovinos, bubalinos, caprinos, ovinos, e suínos, camelídeos e elefantes, não tendo idade para contaminação dos rebanhos (Veronesi, 2004). Com a contaminação via inalatória ou ingestória entre os animais (Radostits, 2002), pela ingestão de água e alimentos contaminados a entrada do vírus geralmente se faz pelas mucosas e já pela via respiratória se da pelas gotículas de ar expirado pelos animais doentes. (Veronesi, 2004). Cursos fluviais e aves também podem ser vetores de disseminação do vírus, uma vez que esse vírus passa incólume pelo trato digestório das aves, podem ser carregados por elas à longas distâncias (Pires, 2010). Além das aves e rios, Stein (2001) alerta que pessoas também podem ser importantes vetores, uma vez que sai de uma propriedade infectada e vá para outra com as mesmas vestes e calçados. Quando infectado, nota-se no animal o estabelecimento de profusa sialorreia e rinorreia, inicialmente serosa, progredindo para mucopurulenta, além do aumento na temperatura corporal e claudicação intensa (Pires, 2010). Em pouco tempo é notável a ruminação atrasada, falta de apetite e peristaltismo alterado, e ainda, mastigam com preguiça, deglutem com lentidão e, o mais grave: param de comer e apresentam dificuldade na locomoção (Beer, 1999). Vesículas úlceras e erosões nas mucosas oral, nasal, no muflo e no epitélio lingual, com contaminação bacteriana secundária (Pires, 2010). Cavalcante (2000) ainda diz que devido às úlceras e as erosões, a claudicação é certa. Flores (2008) lembra que os tetos das vacas também são atingidos, impedindo bezerros de mamarem e desenvolvendo mastite viral. Todos os animais diagnosticados com febre aftosa devem ser sacrificados, uma vez que não exista tratamento para tal doença, juntamente com todos os outros que compartilhavam do mesmo recinto (Pires, 2010). Segundo o Instituto Fiocruz do Rio de Janeiro, vacinas são produtos biológicos que servem para a imunização contra diversas doenças causadas por vírus e bactérias, também conhecidos como micróbios, ou seja, organismos tão pequenos que só podem ser vistos pelo microscópio. Os chamados antígenos representam os constituintes ativos das vacinas, ou seja, os verdadeiros responsáveis pela aquisição da imunidade para os animais vacinados. As vacinas são produzidas e classificadas de acordo com os diversos tipos de antígenos, representados pelos próprios microorganismos causadores das doenças ou por suas partes estruturais e produtos de seu metabolismo. Um programa efetivo de imunização deve propiciar a proteção para controlar ou prevenir as moléstias infecciosas que naturalmente ocorrem nos rebanhos (Brumbaugh & Hjerpe, 1993). A OIE (World Organization for Animal Health) e o MAPA (Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento), por meio do PNEFA (Programa Nacional de Erradicação e Prevenção da Febre Aftosa), desenvolveram medidas e trabalhos no sentido de obter reconhecimento oficial para o Brasil como um país livre da doença. Dentre as principais medidas estão o estabelecimento da obrigatoriedade do uso da vacina duas vezes ao ano, e o controle e testes oficiais de qualidade para as vacinas produzidas no país. As vacinas são compostas por antígenos purificados e inativados O1 Campos, A24 Cruzeiro, C3 Indaial; emulsificados em óleo mineral. Cuja vias de aplicação podem ser subcutânea ou intramuscular na região da tábua o pescoço, numa dose de 5ml, sendo a 1° dose até os 4 meses de idade e a 2° dose 90 dias após a 1° dose, revacinar de 6 em 6 meses. Na propriedade a vacina pode ser conservada na geladeira até o momento da aplicação, nunca na porta da geladeira, freezer ou congelador. Estes cuidados vão garantir a qualidade da vacina. Antes do sistema imunitário poder responder a um antígeno, deve ser capaz de reconhecê-lo, através de um processo denominado de processamento de antígenos. Os macrófagos são as maiores células processadoras de antígenos, porém existem outras células, incluindo os linfócitos B, que também o podem fazer. As células processadoras de antígenos absorvem um antígeno e cortam-no em pequenos fragmentos. Em seguida, estes fragmentos são colocados dentro das moléculas do complexo major de histocompatibilidade e lançados para a superfície da membrana celular. A área do complexo major de histocompatibilidade que contém os fragmentos de antígeno adere depois a uma molécula especial da superfície do linfócito T chamada receptor da célula T. O receptor da célula T está configurado para se encaixar na parte do complexo major de histocompatibilidade que transporta um fragmento do antígeno. Uma vez que uma célula processadora de antígenos e um linfócito T tenham reconhecido um antígeno, uma série de fatos inicia a mobilização do sistema imunitário. Quando uma célula processadora de antígenos absorve um antígenos, liberta citocinas que atuam sobre outras células. A interleucina-1 mobiliza outros linfócitos T; a interleucina-12 estimula as células NK (natural killer, assassinas naturais) para que sejam ainda mais potentes e segreguem; a interleucina-8 atua como uma espécie de "faro" que guia os neutrófilos em direção ao local onde foi encontrado o antígeno. Este processo de atração e recrutamento de células recebe o nome de “quimiotaxia". A vacinação dos animais deve ser realizada preferencialmente nos horários mais frescos do dia, o gado devendo ser preso no dia anterior. A aplicação da vacina deve ser realizada de maneira tranquila, evitando-se agitação dos animais, prevenindo-se assim que ocorram acidentes com os animais e as pessoas que estão aplicando a vacina. A pistola ou aparelho de vacinação e as agulhas devem ser esterilizadas em água fervente, por no mínimo 15 minutos, e a agulha ser trocada a cada 10 aplicações. E deve haver disponível água fervente para lavagem das agulhas utilizadas para que elas possam ser reutilizadas. Os animais devem ser bem contidos para evitar que se machuquem e a vacina deve ser aplicada na tábua do pescoço, por via subcutânea, com agulha 15X15, ou intramuscular, com agulha 30X15. Todo o rebanho deve ser vacinado, inclusive os bezerros a partir de um dia de nascido. A febre aftosa pode ser considerada uma zoonose, mesmo com poucos casos de infecção ao ser humano no mundo, esse pode vir a ser um hospedeiro acidental: “A transmissão ocorre por contato com animais enfermos ou material infeccioso, através de lesões mínimas, por exemplo, arranhões e erosões da pele, pelos quais o vírus penetra no organismo ou pela ingestão de leite não pasteurizado. A contaminação humana devido à ingestão de carnes e produtos cárneos não foi comprovada. A transmissão entre seres humanos também não foi relatada.” (Olacoaga, 1999). Olacoaga ainda ressalta que no Homem, a enfermidade pode ser clinicamente aparente ou não, diagnosticada através de sorologias. Por outro lado, o ser humano pode transmitir mecanicamente o vírus aos animais, pelas vestimentas, calçados e mãos contaminadas, uma vez que o vírus pode sobreviver durante vários dias no meio ambiente (Darsie, 2001). A vacinação é obrigatória para bois e vacas (bovinos) e búfalos e búfalas (bubalinos) em todo o território nacional nos seguintes períodos de vacinação: - 1º a 31 de maio: vacinação de todos os animais de todas as idades; - 1º a 30 de novembro: vacinação de animais com até 24 meses. Multas de $150,00 a $2.500,00 devem ser aplicadas para aqueles que não procederem de acordo com as leis estabelecidas pelo Governo, juntamente com os ministérios competentes (Secretaria de Agricultura do DF-Defesa Agropecuária). Segundo Knight-Jones e Rushton (2013) os impactos econômicos relacionados à febre aftosa podem ser classificados de duas formas: as perdas diretas causadas pelos sinais clínicos que consequentemente causam queda na produção e na maioria dos casos ocorre o sacrifício dos animais da propriedade onde ocorreu um surto e perdas indiretas causadas pelo custo com o tratamento e medidas profiláticas para prevenir a doença e barreiras na comercialização principalmente os países importadores, pois, produtos de origem de animais infectados tem o risco de causar infecções. As perdas anuais geradas pela febre aftosa gira em torno de 6,5 e 21 milhões de dólares. REFERÊNCIAS BILIOGRÁFICAS ADAPAR (Agência de Defesa Agropecuária do Paraná). Febre Aftosa. Disponível em: http://www.adapar.pr.gov.br/modules/conteudo/conteudo.php?conteudo=124. Acesso em 25/06/2016. ADAPI (Agência de Defesa Agropecuária do Piauí). Febre aftosa: a vacinação. http://www.adapi.pi.gov.br/febre-aftosa/a-vacinacao. 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A bactéria Brucella spp pode ser cocos, bacilos ou cocobacilos, não possuindo cápsula, nem esporos. São gram-negativas, sem flagelos e são aeróbicas. Sua temperatura e pH ideais são 37°C (pode variar de 20 a 40º) e 6,6 a 7,4, respectivamente. (GOMES, 2013). A transmissão desta enfermidade ocorre majoritariamente por via oral, através do contato com secreções de indivíduos infectados ou por ingestão de alimentos contaminados (FERREIRA et al, 2015). No homem, a transmissão se deve principalmente pelo contato com animais doentes ou por consumo de leite e seus derivados sem os devidos tratamentos (BOSCHIROLI et al., 2001; ROTH et al., 2003). Como principais sintomas da brucelose são possíveis citar: nascimentos de animais fracos, retenção da placenta, corrimento vaginal, inflamação das articulações e testículos, abortamentos após o sexto mês de gestação, sendo mais comum em fêmeas infectadas pela segunda vez. Uma observação importante é nas gestações seguintes o risco de aborto diminui, podendo até não existir, no entanto, a fêmea ainda pode ser uma fonte de infecção para os demais animais e para o homem. (FERREIRA et al., 2015). Fonte: SciTechDaily Figura 1: Bactéria Brucella spp. Vacinas contra a brucelose Nas vacinas contra a brucelose são utilizadas apenas amostras vivas atenuadas da bactéria, já que apenas essas apresentaram proteção. A vacina mais utilizada é a da cepa 19 de Brucella abortus (vacina B19), responsável pela erradicação da doença em alguns países. Entretanto, a vacina B19 tem a possibilidade de interferir no diagnóstico sorológico, além de poder infectar o homem, ocasionar orquite e epididimite nos machos e aborto em fêmeas vacinadas em final de gestação (BRASIL, 2003). A outra vacina desenvolvida contra a brucelose é também composta por cepa viva atenuada de B. abortus, denominada RB51. Essa cepa é muito segura para uso em fêmeas bovinas e bubalinas, em que sua grande vantagem é a ausência da cadeia O do lipopolissacarídeo (LPS), componente da parede da bactéria (OLSEN et al., 1999, POESTER et al., 2000; SAMARTINO et al., 2003). A ausência da cadeia O na amostra RB51 é o grande diferencial frente às vacinas com a cepa B19, porque não induz anticorpos detectáveis nas provas de diagnóstico, evitando os chamados “falso-positivos” que podem ser ocasionados pela vacinação com a cepa B19, além de permitir a diferenciação entre animais vacinados e infectados, uma vez que as cepas de campo possuem a cadeia O em sua composição (VALÉE). A bactéria Brucella pode infectar células fagocitárias ou não fagocitárias, de tal forma que o LPS-S tem função na sobrevivência da bactéria no meio intracelular (PESSEGUEIRO; BARATA, da Brucella, mas o 2003). antígeno Existem responsável diversos pela componentes resposta antigênicos imunogênica é o lipopolissacarideo S (LPL-S), que é um fraco indutor para o interferon e do fator de necrose tumoral, mas é um indutor da interleucina 12 e dos linfócitos T (PESSEGUEIRO; BARATA, 2003). Além do LPL-S, existem as proteínas L7/L12 que são responsáveis pela estimulação da resposta mediada por células, tornando-se potenciais candidatas a componentes de uma vacina, de tal forma que o estudo realizado por Selegato (2013) afirma que ao serem utilizadas em uma vacina subcelular induzem uma resposta de longa duração, não promovendo a produção de anticorpos que interfiram no diagnóstico, além de não serem patogênicas ao homem. 11,24 . As vacinas induzem uma resposta celular mediada por macrófagos, após serem ativados pelos linfócitos T. Em seguida, ocorre a opsonização pelo anticorpo que aumenta a morte intracelular e faz com que os organismos se multipliquem mais lentamente em animais vacinados do que nos animais não vacinados. Após a infecção, anticorpos de classe IgM são os primeiros a aparecerem no plasma, atingindo seu pique em duas semanas. Os anticorpos IgG aparecem pouco mais tarde, superando os níveis de IgM em quatro a seis semanas (GOMES, 2007). Vantagens e Desvantagens da Aplicação De acordo com Rodrigues (2011), ainda que seja um procedimento obrigatório para bezerras com idade entre 3 e 8 meses, como diversas outras, a vacinação carrega consigo as suas vantagens e desvantagens. Nos machos, é capaz de originar orquite, enquanto que em bezerras, após a vacinação, pode ocorrer a falta de apetite e febre passageira, sendo que esses sintomas podem se intensificar em animais mais vulneráveis ou portadores de doenças mascaradas (MERIAL, 2016), podendo também provocar aborto se aplicado durante a gestação. Quando não tomadas as devidas precauções, pode expor o homem, infectando-o e dando origem à doença (RODRIGUES, 2011). A principal desvantagem associada à vacina B-19 é o seu curto intervalo de aplicação, que deve ser realizado em bezerras entre 3 e 8 meses de idade, o que facilita a possibilidade da perda do prazo pelo produtor, impossibilitando a vacinação após os 8 meses e tornando os animais susceptíveis na idade adulta. Além disso, a aplicação fora do prazo estimula a formação de anticorpos por tempos maiores do que 24 meses, ocasionando falsas interpretações dos testes sorológicos com antídotos lisos (RODRIGUES, 2011). Em relação a RB-51, seu efeito protetor é similar a B-19, no entanto possui vantagens de ser menos patogênica para os seres humanos e poder ser diferenciada de isolados de campo. Sua desvantagem fica por conta da resistência à rifampicina, que é um dos antibióticos usados no tratamento contra a brucelose humana (WHO, 1997 apud BASTOS, 2012). A vacinação é uma atividade importante na produção animal, pois evita prejuízos econômicos atrelados à brucelose, como: abortamentos; baixos índices reprodutivos; desvalorização econômica das propriedades infectadas; menor valor de animais e produtos provenientes de áreas contaminadas, restrições para mercados potenciais; além de perdas na indústria, como a condenação do leite e da carne, altos custos com programas de controle e erradicação e pesquisas (FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION, 2006; JARDIM et al., 2006). De acordo com Paulin (2006), é atribuído à brucelose uma queda da produtividade de carne entre 10 e 15%; de leite entre 10 e 24%; um aumento do intervalo entre os partos de 11,5 para 20 meses e o aumento na taxa de reposição dos animais em cerca de 30%. . Fonte: Bruno Bangel Figura 2: Aborto em vaca com brucelose. Dosagem e via de aplicação A apresentação da vacina B19 é numa caixa com 2 frascos, em que um contém 15 doses de vacina liofilizada e outro contém 30ml de diluente, de forma que a dosagem a ser ministrada é de 2ml por via subcutânea na “tábua do pescoço” (SHOPPING DO CAMPO, 2016). Possui validade de 18 meses após a fabricação desde que armazenada corretamente, entre 2°C a 8°C e ao abrigo do sol, logo após aberta deve ser aplicada o mais rápido possível e o que sobrar deve ser descartado, incinerado ou enterrado profundamente. Essa vacina só é vendida com prescrição de um médico veterinário e aplicada sob a supervisão do mesmo (MERIAL, 2016), possuindo baixo custo que varia entre R$1,50 a R$2,00 reais por cabeça (PORTAL DO AGRONEGÓCIO, 2013). Os EUA, Chile, Costa Rica e Uruguai apenas utilizam a vacina RB-51 contra a brucelose bovina, enquanto que o México, Venezuela, Paraguai, Peru, Equador, Colômbia e Brasil utilizam-na juntamente com a B19. No Brasil, o comércio e a utilização da RB-51 foram regulamentados pelo MAPA (Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento) através das instruções normativas nº 33, de 24 de agosto de 2007 (SILVA, 2012). A apresentação da vacina RB-51 é numa caixa com 2 frascos, em que um contém 15 doses da vacina e outro contém 30ml de diluente que deve ser armazenada entre 2°C a 8°C ao abrigo do sol. A dosagem correta de aplicação é de 2ml via subcutânea na “tabua do pescoço” (MSD – SAÚDE ANIMAL, 2015), de forma que todo o frasco deve ser utilizado rapidamente e o que sobrar deve ser descartado e não reutilizado (BULAVET, 2016), em que o custo médio dessa vacina é de R$4,00 reais por cabeça (CONEXÃO TOCANTIS, 2013). O profissional responsável pela aplicação das vacinas deve utilizar EPI (Equipamento de proteção individual), como luvas e óculos, pois se for mal manuseada pode causar brucelose no aplicador. Após a aplicação, os animais devem ser marcados no rosto para identificar que foram vacinados, pois assim evita problemas na identificação da infecção nos exames de sangue (BERNARDI et al., 2014). Fonte: Prefeitura de Flores da Cunha Figura 3: Vacinação de Brucelose na ”tábua do pescoço". Fonte: Viçosa News Figura 4: Marcação no rosto de animal vacinado. 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A estreptococose deve ser considerada como um complexo de doenças similares causadas por diferentes gêneros e espécies de bactérias (Lactococcus garvieae, Lactococccus piscium, S. iniae, S. agalactiae, Streptococcus parauberis e Vagococcus salmoninarum) capazes de lesar o sistema nervoso central (TORANZO et al., 2005). No Brasil, Uma das espécies de estreptococos mais frequentes é S. agalactiae uma bactéria gram positiva, que acomete uma grande variedade de hospedeiros, dentre eles humanos, bovinos e peixes (JOHRI et al., 2006), caracterizando-a assim, como zoonose. Sendo a espécie mais isolada em tilápias, e os principais sinais clínicos observados são opacidade de córnea, exoftalmia uni ou bilateral, natação errática, letargia, ascite e escurecimento da pele (SALVADOR et al., 2003, 2005; FIGUEIREDO et al., 2006) O desenvolvimento de novas vacinas e a melhoria nas técnicas de vacinação tem auxiliado o controle de algumas doenças infecciosas na aquicultura. Devido aos benefícios econômicos, as vacinas produzidas a partir de células inativadas são amplamente usadas para a proteção dos peixes frente a diferentes doenças bacterianas. Os peixes podem ser imunizados pelas vias intraperitoneal (i.p.), oral (v.o.) e por banho de imersão (b.i.) (LONGHI et al., 2012). Esses métodos apresentam vantagens e desvantagens relacionadas ao nível de proteção, efeitos colaterais, praticidade e custobenefício. As vacinas estreptocócicas aplicadas por via i.p. apresentam melhores resultados na proteção de tilápias, mas não é de fácil aplicação, é um fator de estresse para os peixes e apresenta maior custo com a mão de obra qualificada. A aplicação da vacina por b.i. é menos eficaz, mas tem como vantagem o baixo custo e a praticidade, podendo ser utilizado em peixes de menor porte e em grande quantidade. A via oral se da atraves da imunização contra o patógeno atraves da alimentação, aliando o medicamento a ração. (NAKANISHI; KIRYU; OTOTAKE, 2002; EVANS et al., 2004b; PRETTO-GIORDANO et al., 2010b). A vacina estimula o sistema imune do peixe a preparar a defesa humoral (anticorpos) e/ou celular (células) contra a enfermidade alvo, no caso, a estreptococose. A estratégia mais comum para o controle de doenças bacterianas é o uso de antibióticos (RATTANACHAIKUNSOPON e PHUMKHACHORN, 2009), no entanto, efeitos adversos tem sido relatados tais como poluição e degradação do meio ambiente, além de seleção de cepas resistentes e risco à saúde do consumidor (SWAIN et al., 2002; KLESIUS et al., 2004; SERRANO, 2005, p. 15). Devido a estes efeitos, alguns paises não aprovam o uso de antibióticos na produção animal e recusam a comercialização de produtos nos quais estes medicamentos foram utilizados (RATTANACHAIKUNSOPON e PHUMKHACHORN, 2009). Por outro lado, estudos tem sido conduzidos com o objetivo de propor uma alternativa profilática em substituição aos antibióticos, com destaque para as vacinas (Melo et al., 2015). A vacinação pode ser feita a partir de alevinos, começando no final do mês de abril e terminando em dezembro, sendo a época perfeita durante a recria, especificamente com o animal aos 40 gramas de peso, segundo cartilha do fabricante. O desenvolvimento e melhorias de métodos de vacinação tem auxiliado o combate de algumas doenças infecciosas na aquicultura. Devido aos benefícios econômicos, as vacinas produzidas a partir de bactérias inativadas são amplamente utilizadas para a proteção dos peixes frente a diferentes doenças bacterianas (DUMRONGPHOL et al., 2009). Os Estreptococus sp. são bactérias oportunistas e consideradas altamente patogênicas e prejudiciais junto às criações intensivas de tilápias. Diagnósticos positivos para estas bactérias junto aos rins, fígado e cérebro dos animais evidenciam a gravidade destas infecções , levando a altas mortalidades quando desencadeada a doença. Em cortes histológicos, podem ser observados necroses e infiltrados de células inflamatórias junto aos órgãos acometidos. Por conta da patogenicidade dos estreptococos e da relação custo/beneficio dos antibióticos encontra-se a necessidade da utillização de vacinas, alem das vacinas serem um método definitivo, além de poder ser utilizado como preventivo. O grande impacto econômico causado pelas Estreptococoses deve-se à faixa de idade em que as tilápias adoecem. Freqüentemente são observadas mortalidades em populações adultas, acima de 100 gramas, particularmente nas épocas mais quentes do ano. Mortalidades nesta fase da criação acarretam enormes perdas econômicas, principalmente devido aos investimentos já capitalizados na engorda dos animais (custeio com ração), queda de produtividade e aumento da conversão alimentar. Dependendo da gravidadeda infecção e do estado imunológico dos animais, mortalidade de até 30 % do plantel pode ser observada em poucos dias, caso não seja feito nenhum tipo de tratamento. Estimam-se perdas anuais acima de 150 milhões de dólares associadas a esta bacteriose na piscicultura mundial. Apenas nos EUA estimam-se perdas acima de 10 milhões de dólares em criações intensivas de tilápias. No Brasil, ainda não existem dados estatísticos associados as perdas econômicas por esta bacteriose. No entanto, podem-se estimar enormes prejuízos econômicos, já que, altas mortalidades são freqüentemente observadas nos pólos produtores associadas a diagnósticos positivos para esta enfermidade. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Johri, A. K., Paoletti, L. 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