Aula 06 DNA Recombinate e Engenharia Genética Visão geral dos processo genéticos: A base da hereditariedade Não havia possibilidade de transferência lateral de genes em Bactéria até 1920 Desde então conhecemos: Transformação, Transdução e Conjugação ? ? ? ? ? ? ? ? ? Transformação, Transdução e Conjugação É importante pois aumenta significativamente a diversidade genética de um microorganismo Mutações também são responsáveis por diversidade genética (aula 05) Ambientação, sobrevivência ou morte… Evolução Melhoramento Genético Produção de Fármacos- Insulina Trangênicos Brasil é o segundo maior produtor de OGMs do mundo Brasil tem 2ª maior área de transgênicos, e a que mais cresce no mundo 1928 - Frederick Griffith Transformação Bacteriana Mecanismo de transformação Bacteriana Fator de competência = é a proteína liberada no meio para facilitar a entrada do DNA Células competentes = são as células que irão receber este DNA Importância da Transformação Importância na diversidade genética para bactérias ainda desconhecida Localizar e estudar inserções de DNA’s entre espécies bacterianas - DNA Recombinate Como isto influência a evolução de um organismo e quais as consequencias? Rockefeller University NewYork-Presbyterian Hospital Transdução Bacteriana Joshua Lederberg & Norton Zinder, PhD, winner of the 1958 Nobel Prize É um método de transferência de material genético de uma bacteria para a outra. Neste caso o método de dispersão é atraves de um Bacteriófago Bacteriófago Mecanismos de Transdução Fago Virulento Fago Temperado Ciclo Lítico Ciclo Lísogênico Generalizada Especializada Transdução Bacteriana Cíclo Lítico Transdução Bacteriana Cíclo Lisogênico Importância da Transdução Bacteriana A transferência de material genético de uma bactéria para a outra altera as características da célula receptora DNA do Fago apresenta uma evolução íntima com a bactéria hospedeira A descoberta de sobrevivência de um fago em uma bactéria por longos períodos de tempo abre precendente para entendimento para a origem viral do câncer. Conjugação Bacteriana É um método de transferência de material genético de uma bacteria para a outra. Características: 1 – Requer o contato entre células doadoras e receptoras 2- Transfere quantidades maiores de DNA (Ocasionalmente cromossomos inteiros) Conjugação Bacteriana Cruzamento entre F+ e FCélula Macho Plasmídeo Cromossoma Célula Fêmea Importância da Conjugação Bacteriana A conjugação contribui para a variabilidade e também para o aumento de diversidade Gênica Tecnicamente é a maior taxa de transferência de material genético Resumo geral dos mecanismos de Recombinação bacteriana Plasmídios Plasmídios são elementos genéticos extracromossômicos capazes de replicação autonoma e com capacidade de se integrar no cromossomo bacteriano. Funções Gerais: Plasmídios F (fertilidade) controlam síntese de PTNs Que se auto-arranjam em Pili de conjugação Plasmídios de Resistência (R) conferem resistência a vários antibióticos Controlam a síntese de outras PTN bactericidas “Bacteriocinas” Plasmidíos indutors de tumores Plasmídios para indução de enzimas catabólicas Engenharia Genética Consiste da manipulação proposital de material genético para alterar as características de um organismo de uma forma desejada Ex: Fusão genética, fusão de Protoplastos, Amplificação de Genes, Tecnologia do DNA Recombinante, Hibridomas Fusão genética – Melhoramento de plantas por resitência e incoporação de Pseudomonas syringae Bsct Sp Fusão de protoplastos – mistura de protoplastos de duas cepas para formação de uma novo organismos melhorado (Antibioóticos; cefalomicina) Amplificação de genes: (plasmídios – aumentam a produção de antibióticos) Tecnologia do DNA recombinante - Inserção de genes entre espécies (Insulina e Interferon) ver pagina 202. Melhoramento na a gricultura em especial na prod de Vinhos, cervejas, combustíveis, degradação de poluentes, lixiviação de metais… ETC… Hibridomas – células híbridas (Mielomas + cel produtoas de Anticorpos = Ac monoclonais)