Resumo - Biologia Molecular Bibliografia: Zaha, 2010 - Biologia molecular Básica; Alberts B. - Biologia molecular No núcleo celular humano encontram-se normalmente proteínas histonas e não histonas junto à 46 moléculas de DNA. Essa junção irá formar a cromatina, ou seja, dentro do núcleo em condições normais existem 46 fibras de cromatinas. Além das cromatinas, dentro do núcleo encontra-se o nucléolo. O nucléolo também é formado de DNA e proteínas, porém as proteínas presentes no nucléolo são sulfídricas (ricas em enxofre) e por este motivo (interação entre corante X proteínas) está região fica mais corada. A fibra da cromatina poderá se apresentar mais frouxa ou mais condensada. A região da cromatina frouxa é chamada de eucromatina e a região mais condensada chama-se heterocromatina. Quando observada no microscópio a eucromatina apresenta-se menos corada do que a heterocromatina. Além disso, na região de eucromatina a transcrição (e consequentemente maior tradução) ocorre mais facilmente do que na heterocromatina. Na mitose, durante a prófase, a cromatina começa a ficar mais condensada, o nucléolo fica menos visível e o envoltório nuclear está desaparecendo. Na metáfase são observados cromossomos e não existe mais envoltório nuclear. DNA+proteínas → cromatina → cromatina muito condensada → cromossomos Gene: São regiões da cromatina onde ficam as informações genéticas. Expressão gênica = Toda vez que ocorre a transcrição. Fenótipo: Resultado do genótipo. Figura 1 H (heterocromatina)/E (eucromatina) ESTRUTURA DOS CROMOSSOMOS DNA (composição e estrutura): Definição: Dupla fita antiparalela e em hélice que contém informação genética codificada. Cada fita de DNA é formada pela junção de um grande número de nucleotídeos. No DNA a quantidade, sequência e a porcentagem da frequência de nucleotídeos é variável, tornando possível a variedade genética. Cada nucleotídeo é composto por três diferentes tipos de moléculas: - Um açúcar (pentose) chamado desoxirribose. - Um grupo fosfato - Uma base nitrogenada (podendo ser: adenina, timina, guanina ou citosina) Para a formação da molécula de DNA é necessário que ocorra 2 ligações entre os nucleotídeos: LIGAÇÃO FOSFODIÉSTER: Para manter a estrutura de somente 1 fita, ocorre uma ligação covalente entre o fosfato e a pentose, chamada de ligação fosfodiéster. Essa ligação ocorre no quinto e no terceiro carbono da pentose, e devido à está formação, a cadeia de DNA fica com uma direção determinada, fazendo com que o crescimento do DNA ocorra na direção de 5' para 3'. PONTES DE HIDROGÊNIO: Para manter as 2 fitas ligadas é necessária uma ligação entre as bases nitrogenadas. As bases apresentam estrutura química que favorece ligações de pontes de hidrogênio, e sempre ocorre de maneira padronizada juntando uma purina com uma pirimidina, especificamente: adenina com timina e citosina com guanina. Sendo que, a adenina forma duas pontes de hidrogênio com a timina e a citosina forma três pontes de hidrogênio com a guanina. OBS: O grupo fosfato e o açúcar (parte hidrofílica) - estão localizados na parte externa da molécula. As bases nitrogenadas (parte hidrofóbica) - estão localizadas na parte interna da molécula. * Está formação também ajuda a manter a dupla hélice. DESNATURAÇÃO DO DNA A desnaturação ocorre quando as pontes de hidrogênio são rompidas por fatores físicos ou químicos (temperatura, ph, ácidos, salinidade/osmolaridade). Quando as pontes de hidrogênio se rompem, as duas fitas de DNA ficam livres. Lembrando que a ligação da Adenina e Timina possuem somente 2 pontes de hidrogênio, sendo assim, são mais fáceis de serem rompidas pelo agente desnaturante, logo, o nível de energia que será utilizado para ocorrer a desnaturação depende das bases nitrogenadas e da quantidade de nucleotídeos que a dupla fita de DNA possui. RENATURAÇÃO DO DNA Quando o ambiente volta a condições propícias, as duas fitas de DNA novamente se enrolam formando o DNA dupla fita. Este processo envolve duas etapas: uma mais lenta, pois envolve o encontro casual das fitas complementares de DNA, formando um curto segmento de dupla hélice; e outra mais rápida, envolvendo a formação das pontes de hidrogênio entre as bases complementares, reconstruindo a conformação tridimensional. FIBRA DE CROMATINA E CROMOSSOMO A fibra de cromatina é formada pela união do DNA com proteínas histonas e não histonas. O objetivo da compactação é diminuir o comprimento e aumentar o diâmetro dos cromossomos. NÍVEIS DE COMPACTAÇÃO DE CROMATINA: NUCLEOSSOMOS: Trata-se da associação de um grupo específico de histonas(1 par de H2A, H2B, H3 e H4, que ligadas constituem um octâmero) e de um segmento de dupla hélice de DNA que enrola-se (duas voltas) em torno do octamêro. SOLENÓIDES: Quando uma proteína histona chamada H1 liga-se a uma região específica do nucleossomo, o DNA sofre um dobramento helicoidal, tornando-se mais compactado. ALÇAS: Depois da formação do solenóide, ocorre a ação de proteínas fibrosas (chamadas de proteínas do esqueleto ou proteínas Scaffold) que possuem função de sustentar o cromossomo. A fibra de cromatina que está na forma de solenóide se liga as proteínas Scaffold, e cada vez mais se enovela. CROMOSSOMOS: Período com maior condensação da cromatina e ocorre na metáfase. Os cromossomos variam em tamanho, forma e em localização do centrômero. Quando ocorrem alterações no número de cromossomos e/ou na estrutura dos mesmos, ocorrem os distúrbios genéticos. Figura 2- a) dupla fita de DNA; b) nucleossomos; c) solenóides; d/e) alças; f) cromossomo.