Caracterização da região controle do DNA mitocondrial e avaliação

51º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005
Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4
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Palavras-chave: DNAmt, Calliphoridae, Região controle
Duarte, GT; Junqueira, ACM; Azeredo-Espin, AML
Laboratório de Genética Animal, DGE/CBMEG – Universidade Estadual de Campinas.
Caracterização da região controle
do DNA mitocondrial e avaliação
de seu potencial como marcador
molecular em moscas causadoras
de miíases (Diptera: Calliphoridae)
A família Calliphoridae, formada pelas moscas popularmente conhecidas como varejeiras, apresenta espécies
de importância econômica, médica, sanitária e forense por serem causadoras de miíases e vetores de patógenos.
Similaridades morfológicas e ecológicas e, ainda, variabilidades individuais, dificultam a identificação de
espécies, principalmente durante os estágios larvais, fator relevante para estudos populacionais e forenses.
Marcadores moleculares, em especial o DNA mitocondrial (DNAmt), são de grande valia em estudos
para caracterização da variabilidade genética, estrutura de populações e na identificação espécie-específica,
complementando análises ecológicas e de sistemática. A região controle (RC) é a maior porção não-codificadora
do DNAmt e está relacionada com a regulação da transcrição e a replicação deste genoma. A análise das
seqüências da RC e dos tRNAs que a precedem em quinze espécies de califorídeos pôde ser feita a partir
de sua recuperação em duas reações de PCR com “primers” universais e específicos, correspondentes a seus
dois domínios. Foram constatadas sobreposições entre os genes para tRNAMet e tRNAGln e entre este e o
gene para tRNAIle, bem como regiões intergênicas de dois a dezesseis pares de base entre esses tRNAs. O
domínio A mostrou a presença de seis blocos de seqüência conservados, os quais podem estar relacionados
com atividades funcionais, sugerindo que deve haver manutenção de determinadas bases mesmo que haja
mutação direcional para o aumento de adeninas e timinas. A análise da composição nucleotídica deste
domínio mostrou porcentagens de até 92,3% de A+T, fato que pode estar relacionado ao metabolismo de
insetos e à rapidez de replicação do DNAmt. Essas características do domínio A o tornam um potencial
marcador para reconstrução filogenética de taxa com divergência recente. O domínio B, por sua vez,
mostrou-se hiperveriável, com tamanhos de 650 pb a quase 1700 pb, o que dificulta sua utilidade para tais
fins. Entretanto, essa grande variação de tamanho entre as espécies pode ser usada como marcador molecular
para identificação espécie-específica. Nas cinco espécies estudadas do gênero Chrysomya – C. albiceps, C.
bezziana, C. megacephala, C. putoria e C. rufifacies – foi identificada uma duplicação completa do tRNAIle após
este domínio. A duplicação, que abrange as regiões flanqueadoras do gene, incluindo parte do tRNAGln e
do domínio A, é idêntica à cópia original, podendo ser usada como marcador molecular para identificação
deste gênero, uma vez que não foi reportada para outros gêneros de Calliphoridae.
Apoio financeiro: CNPq e FAPESP.
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