Transcrição QBQ 0102 – Educação Física Carlos Hotta 12/06/15
Propaganda
QBQ 0102 – Educação Física Transcrição Carlos Hotta 12/06/15 Previously... replicação DNA • • • • • transcrição RNA tradução proteína As fitas de DNA são antiparalelas A síntese de DNA é feita na direção 5´-> 3´ A DNA polimerase sintetiza uma nova fita a partir de um molde O 3´-OH do DNA se liga ao 5´-PO4 Uma das fitas é duplicada continuamente e a outra é feita de forma descontínua (fragmentos de Okazaki) Como a informação contida no DNA é usada para gerar uma proteína? Existem diversos tipos de RNA • • • • RNAm codificam novas proteínas RNAr fazem parte do ribossomo RNAt transferem aminoácidos durante a síntese de proteínas RNAnc têm funções regulatórias diversas (antisense, microRNA, etc.) O RNAm contém as informações necessárias para gerar uma nova proteína Fita codificante Fita molde para a síntese de RNA • A fita codificadora contém a sequência similar à sequência do RNAm (com T no lugar de U) • A fita molde vai servir de referência para a síntese do RNAm O que é um gene? “Gene é uma região do DNA que corresponde a uma unidade hereditária associada a regiões reguladoras, regiões transcritas e/ou outras regiões funcionais.” ATENÇÃO!!!! Podem existir genes em ambas direções no DNA! A RNA polimerase gera uma fita de RNA a partir do DNA Funciona como a DNA polimerase mas: Faz RNA! -> usa ribonucleotídeos Não precisa de primers! Possui uma maior frequência de erros O ciclo de trancrição tem três fases Iniciação (1) término (3) alongamento (2) A iniciação da transcrição depende de promotores e outros elementos de regulação A RNA polimerase cria uma bolha de transcrição no DNA Em procariotos, o RNAm está pronto para ser traduzido Término da transcrição: (2) grampo de terminação Término da transcrição: (2) fator Rho Rho (46kDa, ativa como hexâmero) move-se ao longo do RNA acompanhando a RNA polimerase Com a pausa da RNA polimerase na sequência de terminação, Rho alcança a enzima Rho desenrola o híbrido RNA-DNA Sequência de Terminação dependente de Rho: rica em C Em procariotos, o RNAm é traduzido imediatamente Bolha- ~17 pares de bases Em eucariotos, o RNAm possui regiões não-codificadoras Promotor Região codificadora Início Fim Em eucariotes, o RNAm é processado e transportado para o citoplasma para ser traduzido Em eucariotos, o RNAm precisa ser processado antes de ser traduzido Ativadores upstream Região codificadora Promotor 5´cap Cauda 3´poly-A Transcrito inicial (no núcleo) AAAAAAA RNAm final (citoplasma) AAAAAAA Modificação pós-transcricionais: 5´-cap • O 5´cap é adicionado ao RNA no início da transcrição por um complexo enzimático • Regula o transporte de RNA para fora do núcleo • Evita degradação Modificação pós-transcricionais: 3´poli(A) Poliadenilação: Adição da cauda poli (A) na extremidade 3´do RNA primário: ~200 Adeninas • Proteínas se ligam à cauda poli(A) e protegem o RNA • A poli(A) ajuda no controle do transporte do RNA para o citoplasma Modificação pós-transcricionais: quebra de RNA e modificações de bases Modificação pós-transcricionais: splicing Modificação pós-transcricionais: splicing Modificação pós-transcricionais: splicing 1 4 2 5 3 5 Um gene pode gerar diverssos RNAm maduros O que é a expressão gênica? Um gene é expresso quando a informação que ele codifica é usada na síntese de um produto funcional. Nem todo gene é expresso em todo lugar o tempo todo Genes constitutivos – estão sempre expressos nas células Genes regulados – são expressos em apenas algumas condições, alguns tipos celulares ou em certas etapas do desenvolvimento ~ 200 tipos celulares! A expressão de um gene é regulada em diversos níveis: transcrição • • • • Enrolamento na cromatina Metilação de DNA Síntese de fatores de transcrição Controle da iniciação da transcrição A expressão de um gene é regulada em diversos níveis: pós-transcrição • Processamento do RNAm (5’CAP e 3’poly(A) • Modificações no RNAm (modificações nos nucleotídeos ou digestão do RNA) • Splicing alternativo • Transporte do RNAm • Captura do RNAm • Degradação do RNAm Genes possuem promotores, ativadores e repressores que regulam a sua transcrição • • O promotor é a região de DNA que inicia a transcrição de determinado gene É no promotor que a RNA polimerase se liga junto com outros fatores que promovem a transcrição Início da transcrição em eucariotos • O início da transcrição em eucariotos depende da moilização de diversos fatores no promotor Múltiplos enhancers podem estar envolvidos na regulação da transcrição • O DNA acima do gene possui regiões regulatórias chamadas enhancers (às vezes no início do gene) • Os enhancers podem se ligar a ativadores ou repressorese podem se ligar em ambas fitas É necessário que o DNA esteja desenrolado da cromatina para o gene ser expresso • A acetilação de histonas tem importante papel neste processo
