associações entre marcadores microssatélites do cromossomo 13 e

Trabajos de Investigación: Otras Áreas
ASSOCIAÇÕES ENTRE MARCADORES MICROSSATÉLITES DO CROMOSSOMO
13 E CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO, CARCAÇA E ÓRGÃOS EM GALINHAS
C Boschiero1*, RLR Campos2, M Ambo2, MF Rosário2, K Nones2,
MC Ledur3, LL Coutinho2, ASAMT Moura1
1
Aluna do Programa de Pós-graduação em Zootecnia, Departamento de Produção Animal, Faculdade de
Medicina Veterinária e Zootecnia, UNESP, Câmpus de Botucatu. Botucatu, SP, Brasil. 2Laboratório de
Biotecnologia Animal, Departamento de Zootecnia, ESALQ/USP. Piracicaba, SP, Brasil.
3
Embrapa Suínos e Aves.Concórdia, SC, Brasil.
Abstract
Associations between five microsatellite
markers from chromosome 13 and
performance, carcass and organ traits were
investigated using the experimental F 2
population developed at Embrapa Swine and
Poultry (Concórdia, SC, Brazil). The
population was obtained from the
crossbreeding of seven males from a broiler
and seven females from a layer line,
originating 2,063 F2 chickens, from which 327
were involved in this study. Sixteen traits were
evaluated: body weight at 35, and 41 days,
weight gain, feed intake and feed conversion
from 35 to 41 days, haematocrit value,
intestine length, lungs, liver, heart and gizzard
weights, carcass percentage, and breast,
drums and thighs, wings and abdominal fat
percentages. Significant (P < 0.10)
associations of the five markers with 12 traits
were detected. Furthermore, marker
genotype x sex interactions were found (P <
0.10) for 10 traits. These associations should
be further investigated through Interval QTL
Mapping Analyses.
Introdução
A metodologia de marcas simples é uma opção
apropriada para a análise preliminar de QTLs
(locos de características quantitativas), pois não
requer a construção de mapas de ligação e
detecta possíveis associações entre os
genótipos dos marcadores e características
quantitativas. Esta metodologia, entretanto, não
permite mapear QTLs, nem estimar seus
efeitos. A Embrapa Suínos e Aves desenvolveu
duas populações experimentais F2 através de
cruzamentos recíprocos entre uma linhagem de
aves de corte e uma de postura com a finalidade
de desenvolver estudos de mapeamento de
QTLs para características de produção. Numa
XX Congreso Latinoamericano de Avicultura | Brasil 2007
Premio al Mérito Científico “Lauriston Von Schmidt”
Porto Alegre | del 25 al 28 de septiembre
destas populações, Rosário et al. (2006 a,b)
empregaram a análise de marcas simples e
identificaram marcadores associados ao
genótipo de marcadores cobrindo regiões dos
cromossomos 1, 3 e 4 para desempenho e
carcaça. Na outra população, foram mapeados
QTLs nos cromossomos de 1 a 8 para
características de peso, carcaça e órgãos,
utilizando o mapeamento por intervalo (Moura
et al., 2006; Nones et al., 2006; Ruy et al., 2007).
O objetivo deste trabalho foi identificar
marcadores microssatélites do cromossomo 13
associados a características de desempenho,
carcaça e órgãos nesta população
experimental brasileira.
Material e Métodos
População experimental e dados fenotípicos
A população experimental F2 foi desenvolvida
pela Embrapa Suínos e Aves a partir do
cruzamento de sete machos de uma linhagem
de corte e sete fêmeas de uma linhagem de
postura. A geração F2 totalizou 2063 aves,
produzidas em 17 incubações. Deste total, 327
animais pertencentes a quatro famílias de
irmãos-completos foram utilizados neste
estudo. As aves foram criadas como frangos
de corte até os 42 dias, quando foram abatidas.
As características avaliadas foram: peso ao
nascer (PN), peso vivo aos 35, 41 e 42 dias
(PV 35, 41 e 42), ganho de peso, consumo de
ração e conversão alimentar dos 35 aos 41 dias
(GP, CR e CA 35-41), hematócrito, comprimento
do intestino (CI), pesos dos pulmões, fígado,
coração e moela, pesos da gordura abdominal
e partes: peito, coxas (coxas e sobrecoxas) e
asas. Foram calculadas as características:
rendimento de carcaça (R car = peso da
carcaça/PV 42), porcentagem de peito (P% pei
= peso do peito/PV 42), rendimento de coxas e
sobrecoxas (R cox = peso de coxas e
| 255
Boschiero et al.
Resultados e Discussão
Foram encontradas associações significativas
dos genótipos dos cinco marcadores com 12
características: PV 35 (MCW0213 e LEI0251),
PV 41 (MCW0213, LEI0251, MCW0110 e
MCW0104), GP 35-41 (LEI0251 e MCW0110),
CA 35-41 (MCW0110), pesos do fígado
(MCW0110), coração (MCW0213, LEI0251,
MCW0110 e MCW0104), moela (LEI0251 e
MCW0110), pulmão (MCW0213 e MCW0110),
CI (LEI0251), R car (MCW0213, ADL0147,
LEI0251 e MCW0110), P% pei (MCW0213,
ADL0147, LEI0251 e MCW0110) e R cox
(ADL0147 e MCW0104). Na Figura 1 estão
ilustradas as associações dos marcadores com
as características de órgãos. Os marcadores
que foram associados significativamente a um
256 |
74
D is tâ n c ia (c M )
sobrecoxas/PV 42), rendimento de asas (R
asas = peso das asas/PV 42) e porcentagem
de gordura na carcaça (P% gord = peso da
gordura abdominal /PV 42). Amostras de
sangue de todos os animais foram colhidas e
armazenadas para posterior extração de DNA.
Genotipagens
Foram utilizados cinco marcadores
microssatélites do cromossomo 13: ADL0147,
LEI0251, MCW0213, MCW0110 e MCW0104,
amplificados por PCR. Inicialmente, foram
genotipados os animais parentais e F1 com o
intuito de verificar se os marcadores eram
informativos ou não. Depois foi realizada a
genotipagem de cerca de 90 animais F2 de cada
uma das quatro famílias de irmãos completos.
A genotipagem (análise dos fragmentos e
identificação dos alelos) foi realizada com o
MegaBACE (GE Healthcare).
Análises Estatísticas
As características foram divididas em três
grupos: desempenho, carcaça e órgãos. As
características PN e PV 42 foram utilizadas
somente como covariáveis. A covariável PN foi
utilizada para ajuste do PV 35 e 41. A covariável
PV 35 foi utilizada para ajustar: GP, CA e CR
35-41. A covariável PV 42 foi utilizada para as
características: pesos do fígado, coração,
moela, CI, pulmão e hematócrito. As análises
estatísticas foram realizadas pelo método dos
quadrados-mínimos, utilizando o procedimento
GLM (SAS, 1999). O modelo incluiu os efeitos
fixos de incubação, sexo, mãe e genótipo, além
da interação genótipo x sexo (GxS). Foram
considerados significativos todos os resultados
cuja probabilidade de erro do tipo I foi menor
que 0,10 (P < 0,10).
Pulmão
59
CI
Moela
47
Fígado
Coração
Hematócrito
32
22
0
0,5
1
1,5
2
2,5
Log (1/P)
Figura 1 - Associações entre as características
de órgãos e os marcadores do cromossomo
13. As setas indicam os marcadores
microssatélites (MCW0213, ADL0147,
LEI0251, MCW0110 e MCW0104). P =
probabilidade de erro do tipo I no teste F. A linha
vertical representa o limiar de significância
(P<0,10).
maior número de características analisadas
foram: MCW0110 (posicionado a 59 cM no
mapa Consenso) e o MCW0213 (a 22 cM). Isto
é uma indicação de que a região compreendida
entre eles possa conter QTLs para estas
características. Foram significativas também
as interações GxS para: GP 35-41 (MCW0213),
P% pei (MCW0110), R cox (MCW0104), R asas
(MCW0213), P% gord (MCW0213, LEI0251 e
MCW0110), pesos do coração (MCW0213 e
ADL0147), moela (LEI0251), pulmão
(MCW0213 e MCW0110), CI (MCW0110) e
hematócrito (MCW0213). As características: PV
41, peso do coração ajustado, rendimento de
carcaça e porcentagem de peito foram as que
foram associadas, simultaneamente, a quatro
marcadores. No cromossomo 13 foram
mapeados QTLs para características de
crescimento e peso do coração ajustado em
estudos anteriores (revisado por Abasht et al.,
2006). Um QTL significativo para peso do
coração foi mapeado entre os marcadores
ADL0147 (32 cM) e ADL0225 (70 cM) em aves
de 9 semanas (Navarro et al., 2005). No atual
estudo, o peso do coração ajustado foi
associado simultaneamente com: MCW0213,
LEI0251, MCW0110 e MCW004 (Figura 1).
Além disso, foi detectada interação GxS em dois
casos (MCW0213 e ADL0147). O peso do
coração é uma importante característica em
frangos de corte, pois a seleção intensa para
crescimento ocasionou redução proporcional
do sistema cárdio-respiratório, resultando numa
XX Congreso Latinoamericano de Avicultura | Brasil 2007
Premio al Mérito Científico “Lauriston Von Schmidt”
Porto Alegre | del 25 al 28 de septiembre
Trabajos de Investigación: Otras Áreas
maior incidência da síndrome ascítica e morte
súbita (Gaya et al., 2004). Estes resultados
confirmam a existência, neste cromossomo, de
uma região influenciando a característica de
peso do coração, além de uma possível
interação com o sexo dos animais, como já foi
evidenciado no estudo de Navarro et al. (2005)
em outra população. Além disso, a associação
dos marcadores com PV, GP, CA, R car e P%
peito, indicam regiões potenciais de QTL para
essas características.
Conclusão
As características que foram associadas aos
genótipos dos marcadores no cromossomo 13
são importantes para a indústria avícola, como:
peso vivo, ganho de peso, conversão alimentar,
rendimento de carcaça, porcentagem de peito
e peso do coração ajustado. Entretanto, há a
necessidade de prosseguir as análises com o
mapeamento por intervalo, visando confirmar
as associações encontradas com uma maior
precisão, detectar e mapear possíveis QTLs
neste cromossomo, bem como estimar seus
efeitos.
Referências Bibliográficas
Abasht B, Dekker SJCM, Lamont SJ. Poultry
Science, 85:2079-2096, 2006.
Gaya LG, Ferraz JBS, Mattos EC. et al. In: V
XX Congreso Latinoamericano de Avicultura | Brasil 2007
Premio al Mérito Científico “Lauriston Von Schmidt”
Porto Alegre | del 25 al 28 de septiembre
SIMPÓSIO DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE
MELHORAMENTO ANIMAL, 2004, Pirassununga.
Anais... Pirassununga: Sociedade Brasileira de
Melhoramento Animal, 2004.
Ikeobi CON, Woolimans JA, Morrice DR et al.
Livestock Production Sciences, 87:143-151,
2004.
Moura ASAMT, Boscheiro C, Campos RLR et al. In:
8th WORLD CONGRESS ON GENETICS APPLIED
TO LIVESTOCK PRODUCTION, 2006, Belo
Horizonte. Anais... Belo Horizonte: Instituto
Prociência, 2006.
Navarro P, Visscher PM, Knott SA. et al. British
Poultry Science, 46(4):430-442, 2005.
Nones K, Ledur MC, Ruy DC. et al. Animal
Genetics, 37(2): 95-100, 2006.
Rosário MF, Ledur MC, Moura ASAMT. et al. In: 43o
REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA
DE ZOOTECNIA, 2006, João Pessoa. Anais... João
Pessoa: Sociedade Brasileira de Zootecnia, 2006a.
Rosário MF, Ledur MC, Moura ASAMT. et al. In: 30th
INTERNATIONAL CONFERENCE ON ANIMAL
GENETICS, 2006, Porto Seguro. Anais... Porto
Seguro: Colégio Brasileiro de Reprodução Animal,
2006b.
Ruy DC, Moura ASAMT, Nones K, Baron EE, Ledur
MC, Campos RLR, Ambo M, Melo CMR, Coutinho
LL. In: XI QTLMAS, 2007, Toulouse. Anais...
Toulouse: Institut National de la Recherche
Agronomique (INRA), 2007.
STATISTICAL ANALYSIS SYSTEM - SAS. SAS/
STATTM. SAS user’s guide for windows environment.
Version 6. 11.ed. Cary: 1999.
| 257