1ª aula 2ª aula - Biologia Molecular e Genética

FCUL-DBV- Secção de Genética e Dinâmica de Populações
GENÉTICA e BIOLOGIA MOLECULAR
PROGRAMA PRÁTICO
A- Noções básicas e gerais sobre a observação das moléculas da Biologia
Molecular
B- Mapa físico do plasmídio pBR322
C- Detecção de polimorfismos humanos por PCR
1ª aula
A- PROTOCOLO: Noções básicas e gerais sobre a observação das moléculas da
Biologia Molecular
I-
Observação do DNA
. géis de agarose
. % agarose
. brometo de etídio
. azul de bromofenol, azul de cianol, “orange G”
. marcador de pesos moleculares
II- Digestão do DNA
. como se obtém o(s) DNA(s)
. DNA plasmídico e DNA cromossómico
. enzimas de restrição
III- Como se observa o RNA.
Prática:
IV- Gel de agarose
V- Digestão de DNA plasmídico A
VI- Digestão de DNA plasmídico B
VII- Digestão de DNA cromossómico
VIII- Observação de um gel de proteínas.
2ª aula
B- PROTOCOLO: Mapa físico do plasmídio pBR322
I-O que é um mapa físico, como se constrói e qual a sua utilidade.
II- Resolução de problemas de construção de mapas físicos de moléculas de DNA circulares e
lineares.
Prática:
III- Execução do protocolo
3ª aula
C- PROTOCOLO: Detecção de polimorfismos humanos por PCR
I-Revisão da noção de polimorfismo e da técnica de PCR
Prática:
II- Execução do protocolo (até ao fim ponto II)
III- Discussão dos resultados obtidos no protocolo do “Mapa físico do plasmídio pBR322”.
Construção do mapa físico.
4ª aula
I- Esclarecimento de dúvidas das aulas práticas.
Prática:
II- Gel de agarose para observação das amostras do protocolo, “Detecção de polimorfismos
humanos por PCR”. Análise, interpretação e discussão dos resultados obtidos.
5ª aula (TP)
I- Algumas técnicas de análise da expressão génica
6ª aula
AVALIAÇÃO (2 valores ⇒ 1,5 valores Práticas + 0,5 valores TP)- 1h 30 mim
Bibliografia
Sambrook, J. and Russel,B. W. 2001. Molecular cloning: a laboratory manual. 3rd ed.
Cold Sring Harbor Laboratory Press.
Bloom, M. V., Freyer, G.A. and Micklos, D. A. 1996. Laboratory DNA Science.
Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc.