análise bacteriológica de formigas encontradas

Análise bacteriológica de formigas encontradas em um hospital de referência da cidade
de crato, ceará
Stephanie Martins Ferreira Bandeira1, Lívia Maria Garcia Leandro1, Vandbergue Santos
Pereira1, Edinardo Fagner Ferreira Matias1, Tassia Thaís de Alencar Martins Guedes1
1. Laboratório de Microbiologia Aplicada a Saúde, Faculdade Leão Sampaio- FALS, Juazeiro
do Norte, CE, Brasil.
* Autor correspondente
Stephanie Martins Ferreira Bandeira
Faculdade Leão Sampaio – FALS – Juazeiro do Norte – CE – Brasil. Endereço. Av. Leão
Sampaio, Km 3, s/n, CEP : 63.180-000. Tel: +55 (88) 21011000, Fax +55 (88) 21011000.
E-mail: [email protected]
RESUMO
As formigas são insetos que possuem uma grande capacidade de adaptação aos ambientes
urbanos e de se deslocarem com facilidade. Em ambientes hospitalares às formigas podem ser
transportadoras de bactérias que são os principais responsáveis pelos casos de infecções
hospitalares. Essas infecções são tratadas com antibióticos, que se não forem usados
corretamente levam ao desenvolvimento de resistência bacteriana, sendo necessário
antibioticoterapia com fármacos de maior espectro de ação. Considerando os aspectos
relatados, o estudo teve como objetivo realizar a análise bacteriológica de formigas
encontradas em um hospital de referência da cidade de Crato – CE. Trata-se de um estudo de
caráter analítico, descritivo, qualitativo e quantitativo. A coleta das amostras foi realizada em
diferentes setores hospitalares com swab umedecido em solução salina. A análise
bacteriológica foi realizada a partir do isolamento, identificação e determinação do perfil de
resistência seguindo as metodologias padronizadas pelo CLSI (Clinical and Laboratory
Standards Institute). Foi isolado e identificado os seguintes gêneros bacterianos:
Staphylococcus sp., Klebsiella sp., Acinetobacter sp., onde o gênero Staphylococcus sp.
apresentou maior ocorrência correspondendo a 45,4% dos gêneros isolados. O prontoatendimento foi o local de maior ocorrência e isolamento dos microrganismos, tendo
apresentado entre os gêneros bacterianos diferentes perfis de resistência, destacando que entre
as linhagens relatadas neste estudo mostraram-se com maior resistência para o antibiótico
amoxicilina. Diante dos resultados obtidos conclui-se que as formigas são capazes de carrear
bactérias, sendo necessário desenvolvimento de estratégias para erradicação desses insetos no
ambiente hospitalar.
Palavras–chave: Infecções hospitalares. Formigas. Resistência bacteriana.
BACTERIOLOGICAL ANALYSIS OF ANTS FOUND IN A HOSPITAL OF
REFERENCE CRATO CITY, CEARÁ
ABSTRACT
Ants are insects that have a great ability to adapt to urban environments and to easily move. In
hospital settings ants can be carriers of bacteria that are primarily responsible for cases of
nosocomial infections. These infections are treated with antibiotics, which if not used
correctly lead to the development of bacterial resistance that require antibiotic therapy with
drugs of broad spectrum of action. Considering these aspects, this study aimed to do a
bacteriological analysis of ants found in a reference hospital in Crato- CE. This study is
analytical and descriptive. The sample collection was performed in different hospital
departments using a moistened swab in saline. The bacteriological analysis was carried out
from the isolation, identification and determination of resistance profile following the
standardized methodologies by CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute). It was
isolated and identified the following bacterial genera: Staphylococcus sp, Klebsiella sp,
Acinetobacter sp., and the emergency care was the point of maximum occurrence and
isolation of microorganism, showing different resistance profiles among bacterial genera,
noting that the lines reported in this study are more resistance to the antibiotic amoxicillin.
Based on these results it is concluded that ants are capable of carrying bacteria, requiring
development strategies to eradicate these insects in the hospital.
Keywords: Nosocomial infections; Ants; Bacterial resistance.
1 INTRODUÇÃO
O avanço científico e tecnológico do século XXI mostra um cenário diferente com
relação ao cuidado da saúde, pois as infecções se apresentam com maior virulência e
morbidade devido à resistência desenvolvida pelos microrganismos (1).
As infecções hospitalares (IH) ou nosocomiais (IN) tratam-se de infecções que
acontecem depois que o paciente foi internado e a mesma ocorre nesse momento ou quando se
tem alta e existe uma relação com os procedimentos hospitalares ou com a internação (2).
Essas infecções são causadas por diversos fatores, assim é preciso que profissionais da
saúde juntamente com a comissão de controle de infecção hospitalar desenvolvam estratégias
para diminuir e controlar esse problema (3).
Diversas bactérias são causadoras de IH, dentre elas destacam-se como principais
responsáveis por essas infecções como Staphylococcus sp. (4), Klebsiella pneumoniae (5),
Escherichia coli (6), Pseudomonas aeruginosa (7).
Existem muitos animais que atuam como vetores de doenças, causando patogenias de
maneira direta ou indireta ao ser humano, à medida que a população cresce e o fluxo de
pessoas também, alguns problemas aumentam como a falta de limpeza que fazem com que
ocorra um maior número de doenças e uma maior disseminação de vetores, e assim o
transporte de microrganismos através deles seja maior (8).
A presença de vetores como insetos principalmente formigas em ambientes
hospitalares podem causar riscos para a saúde, quando carregam microrganismos patogênicos
(9), uma vez que são capazes de transportar diversas espécies de bactérias (10), sendo que a
maior parte dos isolados nesse tipo de vetor estão associados a infecções hospitalares, fazendo
com que os insetos que carregam esses microrganismos sejam prejudiciais para saúde já que
podem ser veiculadores de patógenos (11).
Para o tratamento das infecções bacterianas são utilizados vários tipos de antibióticos,
durante muito tempo esse tratamento foi utilizado com eficiência, entretanto a evolução das
bactérias está fazendo com que estas adquiram resistência a diferentes antimicrobianos, pois
as cepas estão se adaptando aos fármacos, esse mecanismo de resistência pode ser passado
para bactérias pertencentes à mesma espécie e também para espécies diferentes (12).
Assim a avaliação bacteriológica de formigas e o perfil de sensibilidade das bactérias
encontradas nestes insetos são relevantes, pois as medidas de controle e cuidados para que não
exista o contato com ambientes hospitalares serão mais rigorosas, diminuído os riscos de
contaminação por bactérias, uma vez que esses microrganismos são os maiores causadores de
doenças e a verificação do perfil de resistência que irá indicar quais os antimicrobianos que
servirão para tratamento dos casos de infecções bacterianas, visto que os casos de resistência
bacteriana aumentam cada vez mais. Diante disso, o objetivo deste estudo foi realizar a
análise bacteriológica de formigas encontradas em um hospital de referência da cidade de
Crato- CE, idenficando os gêneros bacterianos e seus respectivos perfis de resistência.
Material e Métodos
As análises das amostras foram realizadas no Laboratório de microbiologia da
Faculdade Leão Sampaio – FALS. O estudo é de caráter analítico e descritivo. Foram
analisadas 32 formigas, 10 encontradas na recepção, 10 encontradas na enfermaria, 6 na
cozinha e 6 na copa de um hospital de referência da cidade de Crato- CE. Quando não foi
possível encontrar formigas, as coletas foram feitas com o auxilio de isca sobre um papel,
colocados em locais estratégicos para que as formigas fossem atraídas (13).
A coleta foi realizada com o auxilio de um swab umedecido em solução fisiológica e
colocados dentro de um eppendorf com essa solução (14), foram utilizados equipamentos de
proteção individual (luvas, toucas e máscaras) para evitar contaminação.
Após a realização da coleta, os eppendorf foram armazenados em isopor e
transportados para o laboratório de microbiologia da Faculdade Leão Sampaio, onde
transferiu 100 microlitros da solução em que as formigas se encontravam para o caldo BHI
(Brain Heart Infusion) e incubados por 24 horas a 37°C em estufa. Após esse período as
amostras do BHI foram agitadas no vortex e semeadas no meio chrom ID
TM
CPS®
(Biomériex), incubado por 24 horas a 37°C, para a identificação dos gêneros bacterianos
baseando- se no aspecto e coloração das colônias desenvolvidas, seguindo as normas do
fabricante.
Após a identificação bacteriana foi preparada uma suspensão bacteriana na escala 0,5
de MacFarland (1,5 x 108 UFC/mL) para cada bactéria isolada. A partir dessa suspensão,
utilizando um swab estéril, foi feito um semeio em tapete em ágar Muller Hinton. Em seguida
foram adicionados os discos de antibióticos sulfazotrim 25mg, tetraciclina 30mg, gentamicina
10mg, amoxicilina 10mg, amicacina 30mg, ampicilina 10mg para efetuar a análise do perfil
de resistência através da medição do halo formado (15).
As placas de antibiograma foram incubadas em estufa à 37ºC ± 1ºC por 24 horas e
posteriormente realizou a medição dos halos de inibição com utilização de régua milimetrada,
sendo os valores de halo comparados com a tabela padronizada pelo Clinical and Laboratory
Standards Institute – CLSI (15).
Após a avaliação do perfil de resistência a análise dos resultados foi realizada através
da tabulação dos dados no Microsoft excel® 2010 e em seguida apresentados na forma de
gráficos e tabelas.
Resultados
Nos diferentes setores hospitalares foi verificado a presença dos seguintes gêneros
bacterianos: Staphylococcus sp., Klebsiella sp., Acinetobacter sp., isolados de formigas
coletadas em diversos locais como demonstrados na tabela 1.
Quando observado os resultados foi identificado que o pronto atendimento foi o local
mais acometido pelas bactérias, pois nas formigas encontradas nesse setor foram isolados
todos os gêneros bacterianos descritos no estudo.
A figura 1 demonstra o percentual de cada gênero bacteriano encontrado no estudo e a
quantidade de formigas que tiveram positividade para os gêneros bacterianos.
Quanto aos resultados referentes ao perfil de resistência Klebsiella spa
apresentou
resistência para os antibióticos amoxicilina e tetraciclina, Acinetobacter spa* apresentou
resistência para ampicilina e amoxicilina, Acinetobacter spa** apresentou resistência para
ampicilina, amoxicilina e amicacina. Klebsiella spb** apresentou resistência para gentamicina,
Staphylococcus spb* apresentou resistência para ampicilina, gentamicina, amoxicilina,
sulfazotrim. Staphylococcus spc* mostrou-se resistente para sulfazotrim. Staphylococcus spc**
apresentou resistência para ampicilina, amoxicilina e sulfazotrim, como demonstrado na
tabela 2.
Discussão
O estudo apresentou resultados semelhantes a pesquisas já realizados por diversos
autores, pois encontraram as mesmas linhagens bacterianas e confirmando que o gênero
Staphylococcus sp. também foi o mais prevalente (45,4 %) como pode ser observado na figura
1. Em alguns destes estudos as formigas também foram coletadas no pronto atendimento,
enfermaria e cozinha, dentre outros setores, isolando dessas formigas os gêneros
Staphylococcus sp. e Klebsiella sp. (10-13, 16).
O índice de ocorrência de Staphylococcus sp. apresentou um percentual maior de
contaminação quando comparado com o encontrado por outros autores 32,1 % (11) e outro
estudo obteve um índice de contaminação por Sthaphylococcus sp. maior 59,2 % (9) em
relação ao resultado encontrado nessa pesquisa.
Outros autores verificaram a presença de Staphylococcus sp. (11, 13, 16), Klebsiella
sp. (17, 18), Acinetobacter sp. (4, 17, 18) em formigas coletadas em diversos setores de
diferentes hospitais, corrobando com os resultados encontrados neste estudo.
As infecções hospitalares podem ser causadas por diversos microrganismos, entretanto
existem alguns que estão mais frequentemente presentes em infecções como Staphylococcus
sp., assim o transporte de bactérias que pertencem a este gênero por formigas dentro do
hospital pode representar riscos para saúde (16) assim como Klebsiella sp. que está associada
a casos de infecções hospitalares principalmente em pacientes que estão imunologicamente
comprometidos, podendo causar desenvolvimento de patologia como pneumonia, dentre
outras (12), e bactérias do gênero Acinetobacter sp. destaca- se também como agente de
infecção hospitalar por se apresentar resistentes a diversos antibióticos, os principais
hospedeiros para Acinetobacter sp. são as pessoas que encontram- se hospitalizadas,
debilitadas, quando infectados essas pessoas apresentam um índice elevado de gravidade e
mortalidade (17).
Diante dos resultados obtidos para perfil de resistência, observa-se que as linhagens
bacterianas isoladas e identificadas neste estudo apresentaram maior resistência para o
antibiótico amoxicilina, podendo ser explicado pelo fato da população ter maior acesso a este
fármaco, sendo utilizado muitas vezes sem prescrição médica e sem seguir dosagens e período
de tratamento correto, fazendo com que haja o desenvolvimento da resistência bacteriana
(19).
Quanto ao isolamento do mesmo gênero em várias formigas que apresentaram perfil
de resistência diferente pode tratar-se de espécies diferentes ou mesma espécie que tenham
passado pelos fatores relacionados ao processo natural de adaptação bacteriana aos fármacos
(18, 20).
Algumas pesquisas sobre o perfil de resistência apresentado por Staphylococcus
sp.(12); Klebsiella sp. (12, 18). e Acinetobacter sp.(18) isolados de formigas encontradas em
hospitais, corroboram com os resultados encontrados neste estudo.
A resistência bacteriana é um fenômeno que faz com que se tenha uma necessidade de
descoberta e desenvolvimento de novos antibióticos com amplo espectro de ação para tentar
eliminar ou impedir a multiplicação da população bacteriana já existente (21). Existem
diversos mecanismos pelos quais as bactérias desenvolvem resistência, na maioria dos casos
deve-se ao uso inadequado de antibióticos, assim é preciso diminuir esses riscos para
minimizar os índices de resistência apresentados por estes microrganismos (22).
Considera-se uma bactéria resistente a antibióticos quando o fármaco não consegue
impedir a multiplicação ou sua destruição(23). Os casos de infecções hospitalares tem se
tornado mais grave em decorrência de infecções causadas por bactérias resistentes a
antibioticoterapia tradicional, dificultando o tratamento do foco infeccioso (19).
Os gêneros bacterianos Staphylococcus sp., Klebsiella sp., Acinetobacter sp., isolados
e identificados neste trabalho correspondem aqueles que são descritos em infecções
hospitalares, entretanto é necessário novos estudos para estabelecer essa relação entre as
formigas e as infecções ocorrentes. O presente estudo demonstrou que formigas presentes em
ambientes hospitalares podem carrear bactérias pertencentes a diferentes gêneros e com
diversos perfis de resistência a antimicrobianos, assim o estudo contribui para informar sobre
as taxas de resistência, sendo estas informações necessárias para estabelecer estratégias para o
uso racional de antibióticos. Os resultados alertam para que sejam desenvolvidos mecanismos
de erradicação desses insetos no ambiente hospitalar.
Agradecimentos
A Faculdade Leão Sampaio e a coordenação do curso de Biomedicina pelo apoio e
disponibilização dos laboratórios de Microbiologia para realização das análises. A toda
direção e equipe do Hospital pela autorização da pesquisa nos setores hospitalares.
Conflitos de interesses
Todos os autores declaram que não há nenhum conflito de interesse na submissão e
publicação do artigo.
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Tabelas e Figuras
Tabela 1- Demonstrativo dos gêneros bacterianos isolados de formigas em diferentes
setores de um hospital de referência da cidade do Crato – CE.
Bactéria isolada
Setor hospitalar
Staphylococcus sp.
Klebsiella sp.
Acinetobacter sp.
+
+
+
Enfermaria
+
+
-
Cozinha
+
+
-
Pronto
atendimento
Presença (+); Ausência (-).
Staphylococcus spa
Klebsiella spa
Acinetobacter spa*
Acinetobacter spa**
Klebsiella spb*
Klebsiella spb**
Staphylococcus spb*
Staphylococcus spb**
Staphylococcus spc*
Staphylococcus spc**
Klebsiella spc
Tabela 2 - Perfil de resistência e sensibilidade de todas as bactérias isoladas frente aos
antibióticos testados.
Bactéria Isolada
Ampicilina
S
S
R
R
S
S
R
S
S
R
S
Gentamicina
S
S
S
S
S
R
R
S
S
S
S
Amoxicilina
S
R
R
R
S
S
R
S
S
R
S
Sulfazotrim
S
S
S
S
S
S
R
S
R
R
S
Antibacterianos
Tetraciclina
S
R
S
S
S
S
S
S
S
S
S
Amicacina
S
S
S
R
S
S
S
S
S
S
S
R: Resistente – S: Sensível; * Amostra 1; ** Amostra 2
(a): bactérias isoladas do pronto-atendimento
(b): bactérias isoladas da cozinha
(c): bactérias isoladas da enfermaria
Figura 1- Ocorrência de gêneros bacterianos isolados de formigas.
12
11
10
8
6
5
45,4%
4
2
4
36,4%
2
18,2%
0
Total
Staphylococcus sp.
Klebsiella sp.
Acinetobacter sp.