ATUALIDADES EM CITOTECNOLOGIA PATOLOGIA DIGITAL Davy Rapozo, PhD Instituto Nacional de Câncer Centro de Pesquisas Patologia Molecular • Como tudo começou? Interesse em aperfeiçoar e entender a visão • Grécia 500 a.c. – Teorias da luz • Euclides 300 a.c. – Indícios da ótica • Al-Hazen 65 d.c. – Globos de vidro para aumentar imagens e concentrar a luz • Ptolomeu 150 d.c. – Mediu os índices de refração da luz • Roger Bacon 1267 – Refração em lentes influenciando a invenção dos óculos. • Século XIV – Lentes começam a ser usadas para corrigir defeitos da visão e aumento de objetos. Leeuwenhoek – Uso do microscópio simples. Primeiro microscópio planejado meados de 1590. • Século XVII – O desenvolvimento do telescópio propiciou a invenção do microscópio composto (lente ocular + objetiva). • 1609 – Galileu fez seu 1° microscópio. • 1750 – Recomendação de usar lente simples para observação das curiosidades das ciências naturais. Rudolf Virchow (1821-1902) – Considerado o pai da patologia moderna. • 1930 – Invenção do radar e da televisão despertou o interesse dos microscopistas. • 1935 – Aplicação do conceito da relação objeto/imagem/tempo Desenvolvimento do microscópio eletrônico de varredura • 1938 – Microscópio eletrônico de transmissão. • 1952 – Resolução de 50 nm. Nas últimas duas décadas o acoplamento de câmeras digitais a microscópios Evolução da patologia digital Evolução da patologia digital Evolução da patologia digital Bônus: • Arquivo digital • Análise de imagem • Softwares de quantificação de colorações Ônus: • Imagem estática • Softwares de análise com base na contagem de pixels • Manipulação de imagem Nova era da patologia digital Lâminas digitais Nova era da patologia digital Digitalizadores Nova era da patologia digital Digitalizadores • Capacidade • Campo claro e/ou fluorescência • Suporte de TI • Usuário capacitado • Universalização • Economia massiva de tempo Nova era da patologia digital Qualidade da imagem • Focalização Nova era da patologia digital Qualidade da imagem • Qualidade do tecido • Montagem da lâmina de vidro Nova era da patologia digital Qualidade da imagem • Técnica de aquisição da imagem Nova era da patologia digital Qualidade da imagem • Pós-processamento das lâminas digitalizadas • Controle da qualidade • Associação com arquivo do caso • Integralidade da digitalização • Compressão do arquivo digital • Localização Nova era da patologia digital Qualidade da imagem • Questões de manipulação de imagem Infra-estrutura de TI Disponibilização para usuários Infra-estrutura de TI Infra-estrutura de armazenamento Infra-estrutura de TI Qualidade dos monitores Infra-estrutura de TI Velocidade de rede Aplicações • Ensino Aplicações • Ensino Aplicações • Ensino Aplicações • Ensino • Ensino Hamilton et al., 2012 • Ensino Hamilton et al., 2012 • Ensino Aplicações • Diagnóstico • Salto de obstáculos • Imagens estáticas e ao vivo Aplicações • Diagnóstico INCA - HCI Rio de Janeiro Aplicações • Diagnóstico • Tele-diagnóstico • Tele-revisão Aplicações • Diagnóstico • Análise de imagem Quantificação de área Aplicações • Diagnóstico • Análise de imagem Reconhecimento de padrões histológicos Aplicações • Diagnóstico • Análise de imagem Quantificação de “objeto” Aplicações • Diagnóstico • Análise de imagem Quantificação celular total Aplicações • Pesquisa • Laboratório virtual de análise de TMA Aplicações • Pesquisa • Laboratório virtual de análise de TMA Aplicações • Pesquisa • Análise de fluorescência Aplicações • Arquivo digital Citologia digital Wilbor et al., 2011 Wilbor et al., 2011 Wilbor et al., 2011 Wilbor et al., 2011 Wilbor et al., 2011 ATUALIDADES EM CITOTECNOLOGIA DIAGNÓSTICO MOLECULAR PARA CITOTECNOLOGIA Davy Rapozo, PhD Instituto Nacional de Câncer Centro de Pesquisas Patologia Molecular Citologia em meio liquido • Melhora a sensibilidade • Permite automação • Somente um dispositivo de coleta • 100% das células serão analisadas Coleta e processamento Impossibilita o uso de técnicas de biologia molecular Possibilidade para uso de técnicas de biologia molecular Reação em cadeia da Polimerase - PCR Reação em cadeia da Polimerase - PCR Lee et al., 2015 Sequenciamento direto do DNA Rossi et al., 2015 Imunohistoquímica Rossi et al., 2015 Hibridação in situ Hesselink et al., 2004 • Aplicações • Tele-diagnóstico • Tele-revisão • Proficiência • Onde estamos? • Implantação do Laboratório de Patologia Molecular • Patologia digital • Automação do diagnóstico do painel de biomarcadores para câncer de mama • Validação de TMA • Validação de algoritmos de quantificação O Grupo: Dr Davy Rapozo – PI Priscila Valverde – MSc Vanessa Barbosa - IC Colaboradores: Dra Claudia Bessa – INCA Dra Sheila Coelho – INCA Dra Tatiana Simão – UERJ Dr Max Robinson - UK Obrigado!!!