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50º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 50º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2004
Costão do Santinho • Florianópolis • Santa Catarina • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-04-6
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Palavras-chave: puberdade, SAGE, folículo ovariano, bovinos
Sider, LH1,2; Cunha, AF3; Marçon, ARC2; Siqueira, F2,4; Avelar, GA2,4; Souza Jr, MD2; Aoki, SM2,4; Garcia, JF2,5
1. Depto de Reprodução Animal, FMVZ, USP. 2. Faculdade de Odontologia de Araçatuba, UNESP, Araçatuba. 3. Hemocentro,
UNICAMP. 4. Depto de Genética, IBB, UNESP, Botucatu. 5. International Atomic Energy Agency, Vienna, Austria
Análise serial de expressão gênica
(SAGE) do folículo ovariano de fêmeas
bovinas Nelore (Bos primigenius indicus)
pré-púberes e púberes
O melhoramento das características fenotípicas de interesse produtivo em bovinos vem sendo alvo de grandes
empreendimentos em pesquisa no setor pecuário. Uma das áreas de grande potencial é a seleção assistida por
marcadores, que baseia-se na determinação de seqüências do genoma que possam estar relacionadas direta
ou indiretamente com algum aspecto da produção animal. Entre as abordagens utilizadas pela MAS está
o estudo da expressão gênica diferencial. A análise serial de expressão gênica (do inglês “Serial Analysis of
Gene Expression - SAGE”) é uma das técnicas desenvolvidas recentemente, que permite analisar rapidamente
vários transcritos, sejam eles derivados de genes conhecidos ou não, fornecendo de maneira qualitativa e semiquantitativa, informações sobre o padrão de expressão gênica de um determinado tipo celular. Dentre várias
características fisiológicas que despertam interesse econômico, está a manifestação da puberdade. O objetivo
do presente trabalho foi de analisar por meio da técnica de SAGE, a expressão gênica diferencial no folículo
ovariano de fêmeas bovinas Nelore (Bos primigenius indicus) pré-púberes e púberes, estabelecendo correlações
entre eventuais diferenças quantitativas e/ou qualitativas quanto a expressão gênica e a manifestação da
puberdade. Seis fêmeas bovinas da raça Nelore foram analisadas, sendo 3 bezerras pré-púberes com 6 meses de
idade e 3 novilhas púberes com 22 meses de idade. Os animais foram observados por ultra-sonografia transretal
diariamente para o acompanhamento das ondas foliculares. As bezerras foram abatidas no momento anterior
ao da regressão folicular e as novilhas foram abatidas em momento prévio à terceira ovulação monitorada.
Os folículos foram dissecados e o RNA extraído pelo método Trizol®(Invitrogen). Foi feito um “pool” dos
RNAs das três bezerras e com este construída a biblioteca SAGE “FOL” através do kit I-SAGE (Invitrogen).
Similarmente foi constituído um “pool” dos RNAs das novilhas púberes e construída a Biblioteca SAGE
“LOF”. Dados preliminares mostram o seqüenciamento de parte dos clones provenientes das duas bibliotecas.
A comparação com bancos de “tags” de bovinos mostra a identificação positiva das bibliotecas, uma vez que
os “tags” obtidos são de origem bovina. No futuro próximo será concluída a etapa de seqüenciamento e as
bibliotecas serão comparadas à procura de genes candidatos envolvidos com a puberdade.
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