Padronização da técnica de isolamento de dna de células da

54º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Padronização da técnica de isolamento de
dna de células da mucosa oral
Silva, CDB1,2; Souza, CF1,2; Mattedi, HC1,2; Pereira, MC1,2; von Zeidler, SV3,4; Gouvêa, SA3,4; Oliveira, ZFL3,4
Graduando em Ciências Biológicas das Faculdades Integradas São Pedro (FAESA)
2
Aluno de Iniciação Científica - FAESA
3
Pesquisadores do Núcleo de Ensino e Pesquisa em Estomatologia (NEPE)
4
Professor das Faculdades Integradas São Pedro
[email protected]
1
Palavras-chave: DNA, mucosa oral, fenol clorofórmio, proteinase K, extração
A extração de DNA de leucócitos periféricos é o meio de obtenção de DNA mais amplamente utilizado. Entretanto,
a coleta de células a partir de raspado da mucosa bucal e a obtenção de saliva, têm sido pesquisadas como formas mais
simples e econômicas para obtenção de DNA genômico. A boa qualidade do DNA é fundamental para sua aplicação
nas várias ferramentas de biologia molecular, utilizadas como métodos de identificação de portadores de mutações,
estudo de alterações genéticas e testes de diagnóstico de várias doenças. O objetivo deste trabalho foi padronizar um
protocolo de extração de DNA a partir de células raspadas da mucosa oral utilizando a técnica de fenol-clorofórmio.
Foram analisadas 60 amostras de células da mucosa bucal obtidas com a utilização de escovas citológicas estéreis, de
indivíduos de ambos os sexos, acima de 40 anos. As amostras foram armazenadas em TES, acrescidas de proteinase K,
e incubadas a 42ºC por 2 horas. DNA de alto peso molecular foi isolado utilizando fenol-clorofórmio e precipitado
em séries decrescentes de etanol. O DNA obtido apresentou boa qualidade e quantidade suficiente para ser submetido
à amplificação e outras técnicas de biologia molecular, quando analisado após corrida eletroforética em gel de agarose
2%. Em conclusão, a técnica de extração de DNA a partir de mucosa bucal utilizando fenol-clorofórmio pode ser
considerada eficiente, obtendo DNA de boa qualidade e quantidade suficiente com baixo custo e fácil manejo para
realização de técnicas moleculares.
Apoio financeiro: FACITEC (PMV).
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