Propriedades físico-químicas dos ácidos nucleicos
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Propriedades físico-químicas dos ácidos nucleicos Desnaturação • térmica • variações da constante dielétrica • variações extremas de pH Desnaturação térmica Conseqüencias • perda da viscosidade • aumento da absorbância da luz UV • aumento dos coeficientes de sedimentação Efeito hipercrômico Composição em bases Temperatura Média de Fusão DNA bacteriano DNA viral Centrifugação em gradiente de densidade • cloreto de césio – 8 M • sacarose (gradientes pré-construídos) – 20 a 30 % – 25 a 35 % – etc Eletroforese • migração de partículas é dependente de: – carga elétrica – tamanho das partículas – formato das partículas Migração eletroforética Hibridização molecular • pareamento de bases entre cadeias – DNA/DNA – DNA/RNA Hibridização Molecular Decorrências: • Análise genética visando o conhecimento do grau de homologia entre amostras de ácidos nucleicos • Construção de sondas moleculares que permitam a identificação de regiões específicas do genoma Aplicações práticas: • determinação de paternidade • estudos filogenia molecular Teste do DNA
