microbiota presente em canais radiculares de dentes decíduos com

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MICROBIOTA PRESENTE EM CANAIS RADICULARES DE DENTES DECÍDUOS
COM NECROSE PULPAR
Raíssa Quaresma Tobias (Voluntária/ICV, UFPI), Lucia de Fátima Almeida de Deus Moura
(Orientadora, Departamento de Patologia e Clínica Odontológica, UFPI)
Introdução: Molares decíduos apresentam complexidade anatômica que dificultam a realização de
intervenções endodônticas convencionais quando acometidos por necrose pulpar. Infecções pulpares
são polimicrobianas com predominância de bactérias aeróbias e anaeróbias de baixa virulência,
porém, quando atuam coletivamente, ocorre aumento da ação patogênica (PRIYA, BHAT, HEDGE,
2010; de SOUSA et al., 2011). O propósito deste estudo foi determinar a microbiota presente em
canais radiculares de dentes decíduos com polpa necrosada. Metodologia: Estudo observacional
transversal, aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa- CEP da Universidade Federal do PiauíUFPI (CAAE: 15680813.6.1001.5214). Foram selecionados 15 pacientes (3 a 10 anos), da Clínica
Odontológica Infantil da UFPI. Os responsáveis assinaram Termo de Consentimento Livre e
Esclarecido e os participantes Termo de Assentimento. Os critérios de inclusão foram: diagnóstico de
necrose pulpar e a aceitação em participar do estudo. Cada paciente possuía um dente decíduo que
necessitava de tratamento endodôntico, confirmados clínica e radiograficamente, e a opção foi
pulpectomia com pasta CTZ. O estudo foi composto por dois grupos: grupo A, molares decíduos com
necrose pulpar e ausência de abscesso; grupo B, molares decíduos com necrose pulpar e presença
de abscesso. Após abertura coronária, o material necrótico do interior dos canais foi colhido através
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de pontas de papel absorvente estéril e passaram por diluições seriadas até 10 em solução salina.
Posteriormente, as amostras eram inoculadas 100 microlitros (µL) em meios de cultura específicos
(Agar Sangue (AS), Agar Mac Conkey (MC), Sabourraud (SB), Tryptic Soy Ágar (TSA), Bile Esculina
Agar (BE), Agar Mitis Salivarius (MI), Agar Baird-Parker (BP) e Agar Rogosa (RO) e incubadas a
°
35 C, em aerobiose, microaerofilia e anaerobiose. Após crescimento, as colônias foram isoladas e
obtidas culturas puras. Todos os micro-organismos foram congelados em duplicata. Dentre as
amostras congeladas, selecionou-se aquelas que apresentavam morfotipos distintos. Essas foram
descongeladas e inoculados 200 (µL) em tubos com 5 mililitros (mL) de caldo TSB (Tryptic Soy Broth)
enriquecido com 1% de extrato de levedura, em seguida incubados em atmosfera de microaerofilia e
°
anaerobiose, a 35 C por 48 horas. Foram realizados segundos repiques iguais ao método anterior.
Depois do segundo repique, foram feitas colorações de Gram, a fim de confirmar a pureza das
culturas e definir meios seletivos para determinação de gêneros. Para identificação de gênero os
micro-organismos foram inoculados 50 (µL) em meios específicos: Enterococcus (para bactérias do
gênero Enterococcus sp.), Agar Mitis Salivarius (bactérias do gênero Enterococcus sp. e
Streptococcus sp.), ambos foram incubados por 48 horas em microaerofilia. E o Meio BD Chromagar
Candida Medium, para determinação de espécies de Candida sp. e Pseudomonas
aeruginosa
colocados em aerobiose por até 48 horas. Após identificação dos gêneros, cada morfotipo foi
transferido para kits de identificação de espécies. Estes são formados por bandejas empilháveis com
10 dispositivos que, após a incubação por 24 horas em aerobiose, sofrereram reações cromogênicas
e fluorogênicas. Após 24 horas, foi gerado um perfil numérico para cada bandeja, posteriormente
digitados no BD BBL Crystal MIND Software . Os códigos foram lidos e gerado as identificações das
espécies de bactérias. Os dados foram digitados e analisados no programa Excel 2007. Resultados
e discussão: O conhecimento sobre os padrões microbiológicos de infecções endodônticas assume
papel relevante na compreensão da etiopatogenia das doenças, além de estabelecer e determinar a
terapêutica adequada para o tratamento (BAUMOTTE, BOMBANA, CAI, 2011). Nesse estudo, foram
isoladas e congeladas 1.000 amostras de micro-organismos coletados de 15 dentes decíduos. Dentre
essas, 234 foram identificadas. O número de espécies bacterianas presentes em canais radiculares
infectados é variável e a quantidade é determinada através de Unidade Formadora de Colônias
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(UFC) que pode variar de <10 até >10 por amostra (BAUMOTTE, BOMBANA, CAI, 2011). O
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presente estudo encontrou 14 espécies distintas e máximas >10 UFC. As diferentes bactérias
envolvidas nas infecções endodônticas de dentes decíduos são relatadas na literatura, no entanto,
dados microbiológicos de dentes que apresentam abcessos crônicos são escassos. A presença de
sinais e sintomas clínicos tem sido associada à presença de bactérias Gram-negativas e
consequentes teores mais elevados de endotoxinas. O lipopolissacarídeo (LPS) é o maior contituinte
da parede celular e um dos mais importante fatores de virulência envolvidos na inflamação (GOMES
et al., 2012). Dos dentes avaliados neste estudo, 9 apresentavam abcessos e 6 necrose sem
abcesso. Os dentes necrosados com fístula apresentaram maiores quantidades de espécies
microbianas (n=11), porém apenas cocos gram-positivos foram encontrados no estudo. Nos dentes
sem fístulas o número de espécies microbianas foi menor (n=4). As condições anaeróbias no interior
dos canais radiculares são resultantes das mudanças na nutrição, e diminuição quase completa da
concentração de oxigênio, que limitam o crescimento de anaeróbios facultativos, e favorece o
crescimento de bactérias anaeróbias (BAUMOTTE, BOMBANA, CAI, 2011). Os achados deste estudo
mostraram maior crescimento de micro-organismos, quando as amostras eram incubadas em
anaerobiose (43%). E, menores em microaerofilia (36,6%) e aeróbiose (20,3%).Cocos Gram-positivos
e bacilos Gram-negativos são mais prevalentes em dentes decíduos com necrose (FABRIS,
NAKANO, AVILA-CAMPOS, 2014). Esses morfotipos foram encontrados neste estudo juntamente
com grandes quantidades de leveduras (Gráfico 01).
Entretanto, a literatura relata pequena
ocorrência de leveduras no interior dos condutos radiculares de dentes necrosados (PRYA, BHAT,
HEDGE, 2010).
Gráfico 01: Morfotipos dos micro-organismos identificados nos canaisradiculares de dentes
decíduoscom polpanecrosada.
57,8%
30,8%
15,4%
Cocos Gram positivos
Bacilos Gram negativos
Leveduras
Os gêneros Streptococcus sp. e Enterococcus sp., apresentam alta prevalência nos dentes deciduos
com polpas necrosadas (PRYA, BHAT, HEDGE, 2010). Além desses, Candida sp., Lactococcus sp.e
Pseudomonas sp. também foram identificados na amostra estudada (Gráfico 02).
Gráfico 02: Prevalência de gêneros dos micro-organismos identificados nos canaisradiculares
de dentes decíduoscom polpanecrosada.
Lactococcus sp.
Enterococcus sp.
Pseudomonas sp.
Candida sp.
Streptococcus sp.
7,7%
11,5%
15,4%
23,1%
42,3%
As espécies bacterianas prevalentes nos dentes decíduos com necrose pulpar e lesões periapicais
foram os Streptococcus salivarius, e pouca prevalência de leveduras (PRIYA, BHAT, HEDGE, 2010).
Porém, estudos apontam predomínio da espécie Streptococcus mutans em infecções endodônticas
(PAZELLI et al., 2013). No presente estudo, Candida tropicalis ( 23,2%) foi a espécie microbiana mais
prevalente, seguida de Pseudomonas aeruginosa (15,4%).
Conclusão: Os micro-organismos
prevalentes em canais de dentes decíduos com necrose pulpar e lesão periapical foram anaeróbios e
do gênero Streptococcus sp.
Palavras–chave: Odontopediatria. Canal radicular. Fístula.
Referências:
BAUMOTTE, K.; BOMBANA, A. C.; CAI, S. Microbiologic endodontic status of young traumatized
tooth. Dent Traumatol., v. 27, p. 438–41, 2011.
AMERICAN ACADEMY OF PEDIATRIC DENTISTRY. Guideline on pulp therapy for primary and
immature permanent teeth. Pediatr Dent., v. 33, n. 6, p.212-119, 2012.
FABRIS, A. S.; NOKANO V.; AVILA-CAMPOS M.J. Bacterialogical analysis is of necrotic pulp and
fistula in primary teeth. J Appl Oral Sci, v. 22, n. 2, p. 118-24, 2014.
GOMES, B. P. F. A. et al. Comparison of Endotoxin Levels Found in Primary and Secondary
Endodontic Infections. J Endod., v.38, n. 8, p. 1082-1086, ago. 2012.
PAZELLI, L. C.; FREITAS A.C.; ITO I.Y.; SOUZA-GUGELMIN M.C. M.; MEDEIROS A.S.; NELSONFILHO P. Prevalence of microorganisms in root canals of human deciduous teeth with necrotic pulp
and chronic periapical lesions. Pesqui Odontol Bras, v. 17, n. 4, p. 367-71, 2003.
SOUSA, D. L. S. et al. Antibacterial Effects of Chemomechanical Instrumentation and Calcium
Hydroxide in Primary Teeth With Pulp Necrosis. Pediatr Dent., v. 33, n. 04, p. 307-12, 2011.