DESENVOLVIMENTO DE UM SISTEMA DE ANÁLISE EM FLUXO CONTROLADO POR PLACA ARDUÍNO PARA TESTES DE DISSOLUÇÃO DE FUMARATO DE TENOFOVIR DESOPROXILA Alan Carlos Correa, Suzana Lucy Nixdorf, Carlos Alberto Paulinetti da Camara, [email protected] Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Exatas Área e subárea do conhecimento: Química/Química Analítica. Palavras-chave: Instrumentação; dissolução; FIA. Resumo A síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS) representa um dos maiores problemas da atualidade devido ao seu caráter pandêmico e sua gravidade. Um dos medicamentos utilizados em seu tratamento é o fumarato de tenofovir desoproxila (FTD) apresentando também resposta positiva no tratamento da Hepatite B. Apesar de estar presente nos protocolos de tratamento preferencial e proposto pelo Ministério da Saúde, não há monografia oficial para o controle de qualidade do medicamento na farmacopéia brasileira e nem em outros compêndios oficiais. Também não há literatura apresentando resultados do teste de dissolução para o FTD, teste essencial para garantir a equivalência de qualidade entre os genéricos e similares, especialmente considerando que são distribuídos nas unidades básicas de saúde (UBS) como parte do coquetel da AIDS na forma de genérico. Neste sentido o objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema baseado na análise por injeção em fluxo (FIA) aplicado a testes de dissolução automatizado do fumarato de tenofovir desoproxila em comprimidos, utilizando a plataforma Arduino. Introdução A síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS) é uma doença que ataca o sistema imunológico das pessoas infectadas, causando sérios problemas de saúde. O antirretroviral utilizado no Brasil desde julho de 2003 para o tratamento da AIDS é o fumarato de tenofovir desoproxila (FTD). O FTD pertence à classe dos inibidores da transcriptase reversa, destacando-se na terapia contra a infecção pelo HIV-1, além de apresentar resposta positiva para a supressão do vírus da hepatite B (BERG et al., 2010). 1 Poucos métodos encontram-se descritos na literatura em relação à quantificação do FTD, sendo a maioria aplicada à determinação em fluidos biológicos ou associação com outros fármacos. Devido à importância deste medicamento faz-se necessário o desenvolvimento de métodos analíticos simples, precisos e rápidos para a quantificação e controle de qualidade deste fármaco. Neste sentido, a análise por injeção em fluxo surge como uma alternativa viável, por ser automatizada, prática, de fácil manuseio, e evitar contaminações por ser um sistema fechado, que apresenta ainda baixo consumo de reagentes, com alta demanda analítica. Dentre os métodos de controle de qualidade empregados na determinação do teor de fármacos, destaca-se o teste de dissolução, cujo intuito é quantificar e avaliar a extensão da liberação do fármaco a partir de suas formas farmacêuticas sólidas em cápsulas e comprimidos (SIEWERT et al., 2003). O dissolutor trabalha em um ambiente que simula as condições do estômago ou do intestino humano. Em virtude da importância deste medicamento, este trabalho tem por objetivo o desenvolvimento de um sistema de análise por injeção em fluxo (FIA) aplicado a testes de dissolução automatizado do fumarato de tenofovir desoproxila em comprimidos, utilizando a plataforma Arduino. Materiais e Métodos O sistema automatizado consistiu de válvulas solenóides de três e quatro vias equipadas com tubos de polietileno, uma bomba peristáltica MINIPULS 3 Gilson, um espectrofotômetro FEMTO 700S equipado com uma cubeta de fluxo de quartzo 283-QS - volume de 80 µL e caminho óptico de 10 mm (Hellma), uma placa Arduino Uno, um microcomputador, e filtros de papel quantitativo. O acionamento das válvulas solenóides, assim como o controle e a aquisição dos dados foram realizados por meio de um software “lab-made” controlados por um microcomputador PC, através do envio de macrocomandos utilizando a ferramenta Monitor Serial presente no Arduino IDE para comunicação com a placa Arduino Uno. O sistema de injeção em fluxo foi empregado para os testes de dissolução (perfil) de comprimidos de fumarato de tenofovir acoplado a um dissolutor comercial Erweka. Foi realizado também o perfil de dissolução do FTD de forma convencional para comparar com o proposto. Nas cubas, o volume do meio dissolutor (ácido clorídrico 0,1 mol L-1) foi de 900 mL e as leituras das absorbâncias foram realizadas em comprimento de onda de 260 nm. Como o sistema ainda se encontra em fase de desenvolvimento, utilizou-se apenas uma cuba para os testes para avaliar seu potencial. 2 Resultados e Discussão A Figura 1A apresenta o perfil de dissolução de comprimidos de FTD obtido com o sistema em fluxo desenvolvido e a Figura 1B o perfil de dissolução do FTD realizado de forma convencional. Observa-se que ambos os perfis apresentam total dissolução do fármaco a partir do tempo de 10 minutos. Observando os sinais transientes obtidos no experimento (Fiagrama – Fig. 1A) verificam-se pequenas variações, devido à saturação do filtro utilizado e a microbolhas formadas no decorrer do experimento. Apesar das pequenas variações nos dados, o desempenho do sistema FIA desenvolvido e aplicado à dissolução de TDF mostrou-se adequado, considerando que não houve diferenças significativas quando comparado aos obtidos pelo método espectrofotométrico convencional. O software para aquisição de dados, assim como os macrocomandos desenvolvidos apresentaram grande versatilidade, podendo ser aprimorados e empregados neste tipo de sistema com êxito, especialmente para fármacos com baixa solubilidade que envolve maior tempo de dissolução, e portanto, maior mão-de-obra. Figura 1- (A) Perfil de dissolução do FTD utilizando o sistema em fluxo desenvolvido. (B) Perfil de dissolução do FTD realizado de forma convencional manualmente. B A 0,7 1,4 0,6 1,2 0,5 Absorbância 1,4 1,2 0,8 Absorbância Absorbância 1,0 0,6 1,0 0,8 0,6 0,4 0,4 0,4 0,3 0,2 0,2 0,0 0 0,2 1000 2000 3000 4000 5000 6000 0,1 nº pontos 0,0 0,0 0 10 20 30 40 Tempo (min) 50 60 0 10 20 30 40 50 60 Tempo (min) Conclusões O sistema em fluxo automatizado desenvolvido pelo grupo de pesquisa mostrou-se bastante versátil com baixo custo de implementação para ser 3 empregado em testes de dissolução de fármacos em comprimidos. O mesmo se encontra em fase de desenvolvimento e esta sendo aprimorado para se adequar as normas e especificações estabelecidas na Farmacopéia Brasileira. Agradecimentos Agradeço ao grupo de pesquisa em que faço parte e à Fundação Araucária pela bolsa de iniciação científica. Referências BERG T, et al. Tenofovir Is Effective Alone or With Emtricitabine in AdefovirTreated Patients With Chronic-Hepatitis B Virus Infection. Gastroenterology v.139, n. 4, p.1207-1217, 2010. SIEWERT, M. et al., FIP/AAPS guidelines for dissolution/ in vitro release testing of novel/special dosage forms. Dissolution Technologies. V. 10, n. 15, p. 1013, 2003. 4