avaliação de citotoxicidade do sistema 2,4- pentanodiona

AVALIAÇÃO DE CITOTOXICIDADE DO SISTEMA 2,4PENTANODIONA/HORSERADISH PEROXIDASE/O2 ATRAVÉS DAS METODOLOGIAS
AZUL DE TRYPAN E IODETO DE PROPÍDEO
O sistema ADEPT (antibody-directed enzyme prodrug therapy), consiste em uma terapia
antitumoral que utiliza uma enzima conjugada a um anticorpo monoclonal com afinidade para
antígenos específicos em células alvo tumorais. A enzima converte uma substância inativa, o prófármaco, em um composto ativo tóxico no local de ação ou nas proximidades desse. O sistema
composto pela enzima Horseradish peroxidase (HRP) e ácido indol-3-acético (IAA) é o par mais
estudado para a terapia ADEPT e como consequência ocorre apoptose de células tumorais induzida
por espécies reativas de oxigênio (ERO) produzidas pela descarboxilação oxidativa do IAA
catalisada pela HRP. Com o objetivo de buscar novos substratos como alternativa ao IAA na terapia
ADEPT, utilizamos a 2,4-pentanodiona, que é um composto β-dicarbonílico que atua como
substrato de maneira semelhante ao IAA em reação catalisada pela HRP. Neste estudo, pode-se
avaliar o efeito citotóxico de compostos β-dicarbonílicos na ausência e na presença de HRP, assim
como ação citotóxica da reação IAA/HRP/O2, sendo que os testes de citotoxicidade foram
realizados com células isoladas do sangue (mononucleares) de indivíduos supostamente saudáveis,
utilizando o método de exclusão com azul de trypan e o teste de integridade da membrana celular
com iodeto de propídeo, que marca as células mortas que incorporam estes corantes. Os resultados
apresentados pelos métodos foram favoráveis em relação à citotoxicidade da reação completa
(substrato juntamente com a enzima), apesar de que aqueles apresentados pelo método utilizando
iodeto de propídeo demonstraram uma pequena porcentagem de morte celular utilizando o sistema
PD/HRP/O2.
Palavras-chave: Citotoxicidade. Horseradish peroxidase. 2,4-Pentanodiona. Ácido indol-3-acético
JÉSSICA ROBERTA DA CONCEIÇÃO ALVES