Avaliação das aulas TP04

Avaliação das aulas TP
Microbiologia 2012-2013
Questões -TC
1. Quais as moléculas salivares identificadas
como responsáveis pela adesão de
streptococci à saliva?
Prps, aglutininas e alfa amilase.
No caso da alfa amilase parece estar ligada à
actividade catalitica da enzima
Questões -TC
2 – Quais as espécies de streptococci que têm
estruturas de adesão? Que estruturas são essas?
S. pyogenes, S.agalactiae e S.pneumoniae.
Sobretudo pili filamentosos com subunidades
ligadas convalentemente à superfície da célula.
Questões -TC
3 – Qual a importância dos pili na formação do
biofilme nesta espécie? Que dados o demonstram?
É essencial na figura 1 os poços sem com o mutante
sem saliva não tinham filme.
Os poços com mutante e saliva tinham um filme
defeituoso tal como os poços com saliva e bactéria
normal
Só nos poços com wt e saliva houve biofilme eficaz.
Questões -TC
4 – Das proteínas estudadas quais tinham maior
capacidade de se ligar às proteinas salivares?
liga-se a todas mas mais a pilC e pilB. A
pilA não liga muito eficientemente.
Figura 3b
Questões -TC
5 – Quais os controlos usados na experiência
anterior?
Foram usadas a FNBP e a BSA. Estas
proteínas não ligaram à saliva.
Questões -TC
6 – Que técnica foi usada para estudar a
estrutura dos pili?
criaram-se anticorpos contra as
recombinantes pilA, pilB e pilC. Estes anticorpos
foram testados contra os pili das bactérias
nativas e mutantes.
Nas culturas bacterianas os pili foram libertados
para a solução pondo as bacterias em contacto
com mutalisina
Questões -TC
7 – Quais os resultados?
Estão na figura 4 B. e mostram que pilA é o
maior constituinte dos pili de S.sanguinis.
Na figura 4 C vê-se a localização do pilA
Questões -TC
8 – Qual é especificamente a molécula salivar à
qual se liga pilC?
Liga-se especificamente à alfa amilase um
proteína de 50 kD na saliva. Figura 5
Questões TA
1. A ligação Às moléculas dos pili pilB e pilC é a
única que existe? Como se sabe?
Figura 6. A.
Questões TA
2 – Na literatura aparece descrita a ligação da
alfa amilase a proteínas bacterianas
dependentes da sua atividade catalítica. Este
estudo confirma isso? Como sabe?
Não confirma pois mesmo com a alfa
amilase desnaturada se dá a ligação. Fig 7
Questões TA
3 – Qual é especificamente a zona de pil C à qual
se liga a alfa amilase? Como se sabe?
Analisou-se a ligação a 3 fragmentos de pilC e
verificou-se que havia mais ligação à zona do
terminal C. Figura 7
Questões TA
4– A zona de pilC com mais afinidade para a
amilase alfa partilha sequencia com outra
proteína. Qual?
Que importância tem isto? Foi testado?
Collagen binding protein B domain. Há domínios
de ligação conservados.
Questões TA
5–Qual a importância, no geral da adesão a
moléculas da saliva?
Permite a colonização inicial e persistência no
biofilme oral.
Questões TA
6 – Que proteínas ligadoras da saliva são
encontradas noutros streptococci?
SsP5 da SspA/B de S.gordonii
Pac/AgI/II/Spac de Strep mutans
Fim A de S.parasanguinis
AbpA e AbpB de Strep. gordoni
Questões TA
7 – O que se sabe sobre a sequência de
aminoácidos destas outras proteínas ligadoras
de amilase?
Isso é importante? Porquê?
Nalguns casos não se sabe a sequência. Se se
soubesse poderia procurar-se no genoma de
novas espécies sequenciadas por exemplo em
projectos como o do HMP.
Questões TA
8 – Quais as conclusões principais do estudo?
Que há estruturas de adesão à saliva em Strep sanguinis.
Que essas estruturas estão nos pili
Que são 3 proteínas diferentes A,B,eC
Que não são as únicas responsáveis pelo biofilme
Que têm preponderâncias e funções diferentes no
processo de adesão.
Questões TB
1 –Quais as moléculas salivares identificadas
como responsáveis pela adesão de streptococci
à saliva? A que estruturas se ligam?
Prps, aglutininas e alfa amilase.
S. pyogenes, S.agalactiae e S.pneumoniae.
Sobretudo pili filamentosos com subunidades
ligadas convalentemente à superfície da célula.
Questões TB
2 – Faça a análise das figuras 1 e 2. O que
demostram?
Questões TB
3 – Explique a figura 3 B.
Questões TB
4 – O que mostra a figura 4?
Questões TB
5 – Que resultados são apresentados na figura
5?
Questões TB
6 – Que conclusões se tiram da figura 6?
Questões TB
7 – O que mostra a figura 7?
Questões TB
8 – Que proteínas ligadoras da saliva são
encontradas noutros streptococci?
SsP5 da SspA/B de S.gordonii
Pac/AgI/II/Spac de Strep mutans
Fim A de S.parasanguinis
AbpA e AbpB de Strep. gordoni
Questões TB
9 – O que se sabe sobre a sequência de
aminoácidos destas outras proteínas ligadoras
de amilase?
Isso é importante? Porquê?
Nalguns casos não se sabe a sequência. Se se
soubesse poderia procurar-se no genoma de
novas espécies sequenciadas por exemplo em
projectos como o do HMP.
Questões TB
10 – Quais as conclusões principais do estudo?
Que há estruturas de adesão à saliva em Strep
sanguinis.
Que essas estruturas estão nos pili
Que são 3 proteínas diferentes A,B,eC
Que não são as únicas responsáveis pelo biofilme
Que têm preponderâncias e funções diferentes no
processo de adesão.