aula teórica 5-6 Crescimento e Nutrição

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UPCII M Microbiologia
Teórica 5-6
2º Ano
2015/2016
Sumário
Capítulo IV. Crescimento e Nutrição dos Microrganismos
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Crescimento
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Matemática do crescimento
Curva de crescimento
Factores que influenciam o crescimento
Aquisição de Nutrientes
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De que são feitas as células bacterianas?
Fontes de Nutrientes
Aquisição dos Nutrientes
Capítulo V. Diagnóstico Microbiológico

2

Produtos biológicos para análise

Colheita e transporte de amostras

Identificação do agente infecioso:

Métodos Fenotípicos (Culturais e Bioquímicos)

Métodos Genotípicos (Moleculares)

Métodos Imunológicos (Serológicos)
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Capítulo IV. Crescimento e Nutrição
dos Microrganismos
Matemática do crescimento bacteriano
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Curva de crescimento bacteriano
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Como se “vê” o crescimento no lab?
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De que é “feita” a célula bacteriana?
H2O é o mais abundante
Seguidas das proteínas
97% é orgânico
96% CHONPS
De cerca de 9 nutrientes:
• (NH4)2SO4
• FeCl2
• NaCl
• Glicose
• KH2PO4
• MgSO4
• CaHPO4
• H20
• Elementos vestigiais
• Faz 5000 compostos
•
•
•
•
•
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Onde é que a célula obtém esses
nutrientes?
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Aquisição de Nutrientes
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Aquisição de Nutrientes - Digestão enzimática
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Aquisição de Nutrientes – Transporte
Canais
Sem consumo de energia. Gradientes
Transportadores primários
Transporte ativo com hidrólise de ATP.
Transporte “contra gradiente”.
Transportadores secundários
(inclui uniporters, symporters
Transporte ativo com gradiente
e antiporters)
iónico. Transporte “contra gradiente”.
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Aquisição de Nutrientes – Transporte
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Sistemas Fosfotransferase (PTS)
http://www.youtube.com/watch?list=UUG5TBP
ANNSiKf1DpR5Dibg&v=7zwjnyphAHo&feature=player_deta
ilpage
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Factores que influenciam o crescimento
Ac. gordos insaturados ou saturados
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Factores que influenciam o crescimento
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Factores que influenciam o crescimento
Meios hipotónicos --› aquaporinas
Meios hipertónicos --› solutos
compatíveis
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Factores que influenciam o crescimento
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Factores que influenciam o crescimento
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Bibliografia
Capítulo 4 e 9
Capítulo 3
Capítulo 1
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Capítulo V. Diagnóstico
Microbiológico
Diagnóstico Microbiológico
Paciente
Pedido de Exame
Diagnóstico e Terapia
Colheita
Interpretação
Transporte
Resultado
Laboratório
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Colheitas a partir de:
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Excreções
Secreções
Tecidos
Órgãos
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Colheita e Transporte das amostras
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Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus
Psicrófilos / Mesófilos
Colheitas de locais com MI  Contaminação do
ambiente (Expetoração e saliva)
Meio de recolha  Eficácia
Meio de transporte
Antibioterapia precedente
Tempo da colheita /Rota de infeção e ciclo de infeção
Tempo de espera para processamento
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Métodos de diagnóstico
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Fenotípicos
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Morfológicos
Fisiológicos/Bioquímicos
Químicos
Genotípicos
Imunológicos
Baseados em cultura
Podem ser
independentes de cultura
Resultados preliminares e definitivos
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Métodos fenotípicos - Observação directa - MO
Ovos de helmintas
Espiroquetas
Cryptococcus neoformans
Preparação Tzanck (infecção por vírus
herpes simplex ou varicella-zoster)
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Métodos fenotípicos - Observação directa Colorações
A= Não acid fast
Fluido CerebroEspinal
Bacillus antracis
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B=Acid Fast
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Métodos fenotípicos - Observação directa - ME
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Métodos fenotípicos - Observação directa Imunocitoquímica
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Métodos fenotípicos - Bioquímicos
• Fermentação de vários hc
• Hidrólise de gelatina, amido e outros
• Catalase, oxidase, coagulase
• metabolitos
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Métodos fenotípicos - Outros
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Serotipagem
Biotipagem
Tipagem de fagos
Tipagem de bacteriocinas
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Cultura
Meios de Cultura: Função?
Meios de transporte: Função?
Incubação: (Temperatura e oxigénio)
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Cultura
Reacções com o meio de cultura
Streptococcus beta hemolítico
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Cultura-tipagem fenotípica e bioquímica

Após cultura segue-se identificação:
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Cultura-tipagem fenotípica e bioquímica
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Após cultura segue-se identificação:
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Cultura – Permite antibiograma
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Métodos genotípicos – sondas moleculares
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Métodos genotípicos
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PCR – gene 16sRNA
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Métodos genotípicos
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PCR
Visualização
Utilização noutras técnicas
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Métodos Imunológicos – indiretamente
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Métodos Imunológicos diretamente
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Métodos Imunológicos - Aglutinação
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Métodos Imunológicos - Precipitação
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Métodos Imunológicos – Western Blotting
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Métodos Imunológicos
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Métodos Imunológicos – Teste do Complemento
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Métodos Imunológicos – Anticorpos flourescentes

Diretos
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Métodos Imunológicos – Anticorpos flourescentes
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Indiretos
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Métodos Imunológicos - Elisa
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Métodos Imunológicos - Elisa
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Métodos Imunológicos – Elisa sandwich
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Sensibilidade e Especificidade
Presença do
Microrganismo
Ausência do
Microrganismo
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+
-
Verdadeiro
(V+)
Falso
(F-)
Verdadeiro
(V-)
Falso
(F+)
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Bibliografia
Capítulo 15-17
Capítulo 6
Capítulo 17
53
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