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UPCII M Microbiologia Teórica 6-7 2º Ano 2012/2013 Sumário Capítulo V. Diagnóstico Microbiológico Produtos biológicos para análise Colheita e transporte de amostras Identificação do agente infeccioso: 2 Métodos Fenotípicos Métodos Genotípicos Métodos Imunológicos T6-7 MJC 10-11-2012 Diagnóstico Microbiológico Paciente Pedido de Exame Diagnóstico e Terapia Colheita Interpretação Transporte Resultado Laboratório 3 T6-7 MJC 10-11-2012 Colheitas a partir de: Excreções Secreções Tecidos Órgãos 4 T6-7 MJC 10-11-2012 Colheita e Transporte das amostras Anaeróbios / Fastidiosos / Vírus Psicrófilos / Mesófilos Colheitas de locais com MI Contaminação do ambiente (Espectoração e saliva) Meio de recolha Eficácia Meio de transporte Antibioterapia precedente Tempo da colheita /Rota de infecção e ciclo de infecção Tempo de espera para processamento 10-11-2012 T6-7 MJC Métodos de diagnóstico Fenotípicos Morfológicos Fisiológicos/Bioquímicos Químicos Genotípicos Imunológicos Baseados em cultura Podem ser independentes de cultura Resultados preliminares e definitivos 6 T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos fenotípicos - Observação directa - MO Ovos de helmintas Espiroquetas Cryptococcus neoformans Preparação Tzanck (infecção por vírus herpes simplex ou varicella-zoster) 10-11-2012 T6-7 MJC Métodos fenotípicos - Observação directa - Colorações A= Não acid fast Fluido CerebroEspinal Bacillus antracis 8 B=Acid Fast T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos fenotípicos - Observação directa - ME 9 T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos fenotípicos - Observação directa Imunocitoquímica 10 T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos fenotípicos - Bioquímicos • Fermentação de vários hc • Hidrólise de gelatina, amido e outros • Catalase, oxidase, coagulase • metabolitos 11 T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos fenotípicos - Outros Serotipagem Biotipagem Tipagem de fagos Tipagem de bacteriocinas 12 T6-7 MJC Cultura Meios de Cultura: Função? Meios de transporte: Função? Incubação: (Temperatura e oxigénio) 13 T6-7 MJC 10-11-2012 Cultura Reacções com o meio de cultura Streptococcus beta hemolítico 14 T6-7 MJC 10-11-2012 Cultura-tipagem fenotípica e bioquímica Após cultura segue-se identificação: 15 T6-7 MJC 10-11-2012 Cultura-tipagem fenotípica e bioquímica Após cultura segue-se identificação: 16 T6-7 MJC 10-11-2012 Cultura – Permite antibiograma 17 T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos genotípicos – sondas moleculares 18 T6-7 MJC Métodos genotípicos 19 PCR – gene 16sRNA T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos genotípicos PCR Visualização Utilização noutras técnicas 20 T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos genotípicos Detecção de ácidos nucleicos 21 RT-PCR (Real Time) RT-PCR (Reverse Transcription) Multiplex PCR Nested PCR T6-7 MJC 10-11-2012 Métodos Imunológicos 10-11-2012 T6-7 MJC Métodos Imunológicos 10-11-2012 T6-7 MJC Métodos Imunológicos - Aglutinação 24 T6-7 MJC Métodos Imunológicos - Precipitação 25 T6-7 MJC Métodos Imunológicos – Western Blotting 26 T6-7 MJC Métodos Imunológicos 27 T6-7 MJC Métodos Imunológicos – Teste do Complemento 28 T6-7 MJC Métodos Imunológicos – Anticorpos flourescentes Diretos 29 T6-7 MJC Métodos Imunológicos – Anticorpos flourescentes Indiretos 30 T6-7 MJC Métodos Imunológicos - Elisa 31 T6-7 MJC Métodos Imunológicos - Elisa 32 T6-7 MJC Métodos Imunológicos – Elisa sandwich 33 T6-7 MJC Sensibilidade e Especificidade Presença do Microrganismo Ausência do Microrganismo 10-11-2012 + - Verdadeiro (V+) Falso (F-) Verdadeiro (V-) Falso (F+) T6-7 MJC 35 T6-7 MJC Bibliografia Capítulo 6 Capítulo 17 36 T6-7 MJC 10-11-2012
