UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA CENTRO DE CIÊNCIAS AGRARIAS DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA PLANO DE ENSINO I. IDENTIFICAÇÃO DA DISCIPLINA: CÓDIGO NOME DA DISCIPLINA FIT5507 Biotecnologia (5a Fase) NO DE HORAS-AULA SEMANAIS TEÓRICAS PRÁTICAS 02 TOTAL DE HORAS-AULA SEMESTRAIS 01 54 I.1. HORÁRIO TURMAS TEÓRICAS Terça-feira - 10:10 as 12:00 TURMAS PRÁTICAS Turma 08501A: 4.1510-1 / CCA-LBFIT8 Turma 08501B: 4.1010-1 / CCA-LBFIT8 Turma 08501C: 4.1100-1 / CCA-LBFIT8 II. PROFESSOR (ES) MINISTRANTE (S) Profs. Miguel Pedro Guerra, Rubens Onofre Nodari e Rosete Pescador Colaboradores: Dra. Gabriela C. Cangahuala-Inocente, Pós Graduandos: Hugo Fraga, Angelo Heringer, Liliana Pila, Dorival Almeida Silva, Leila N. Vieira, Sarah Agapito Tenfen, Gustavo Klabunde, Morgana Eli Lopes. II. PRÉ-REQUISITO (S): CÓDIGO NOME DA DISCIPLINA AGR5403 BOT5304 FIT5305 Vivência em Agricultura Familiar Anatomia e Fisiologia Vegetal Genética IV CURSO (S) PARA O QUAL(IS) A DISCIPLINA É OFERECIDA Agronomia V. EMENTA História, importância, bases e aplicações da biotecnologia. Totipotência celular e aspectos comparativos em plantas e animais. Cultura de células, tecidos e órgãos: princípios e aplicações. Haplóides e diaplóides. Fusões celulares. Criopreservação. Biorreatores. Sementes sintéticas e linhagens celulares. Marcadores Moleculares. Genômica e proteômica. ADN recombinante. Organismos Geneticamente Modificados (OGMs), Biossegurança. Biotecnologias e Bioética. VI. OBJETIVOS Proporcionar aos estudantes a compreensão dos fundamentos e da aplicabilidade das biotecnologias pertinentes ao setor agrícola e aos recursos genéticos vegetais. VII. CONTEÚDO PROGRAMÁTICO 1. Introdução - Conceitos e histórico das biotecnologias, cronologia das principais descobertas, laboratórios, equipamentos, instalações, rotinas. 2. Morfogênese in vitro - Determinação, competência da célula vegetal e animal, epigênese, papel dos reguladores de crescimento sobre a divisão e diferenciação celular; 3. Meios de cultura: componentes, formulações e técnicas de preparação; 4. Padrões de expressão morfogenética - Calogênese, organogênese e cultura de meristemas, embriogênese somática, linhagens e suspensões celulares; 5. Micropropagação e biofábricas - Estágios da cultura in vitro, protocolos, aclimatização. 6. Haplóides e duplo-haplóides . Obtenção e aplicações para o melhoramento genético; 7. Resgate de embriões e fertilização in vitro: obtenção e resgate de híbridos raros; 8. Conservação de germoplasma in vitro - Técnicas e Protocolos. 9. Análise dos ácidos nucleicos - Estrutura e propriedades dos ácidos nucleicos. Controle da expressão gênica. DNA recombinante, Bibliotecas genômicas, Aplicações. 10. Marcadores e mapeamento genético: tipos, propriedades, base genética. Marcadores morfológicos. 1 Eletroforese de proteínas e isoenzimas: protocolos, análise dos zimogramas. Marcadores moleculares: RAPDs, Microssatélites, AFLPs. Aplicações dos marcadores em genética e melhoramento genético. Genômica: fundamentos e aplicações. 11. Plantas transgênicas - Vetores, construções quiméricas, sistemas de transformação genética, genes engenheirados. Principais genes introduzidos em plantas. 12. Biossegurança – Impactos ambientais, de saúde e sócio-econômicos. Legislação sobre OGMs, Análise de risco, rastreabilidade e rotulagem. Protocolo de Cartagena sobre biossegurança. 13. Bioética: percepção pública. A visão dos diferentes setores. VIII. METODOLOGIA DE ENSINO / DESENVOLVIMENTO DO PROGRAMA Aulas teóricas e práticas IX. METODOLOGIA DE AVALIAÇÃO Duas provas teóricas sobre os conteúdos ministrados (peso 60%). Duas provas práticas sobre os conteúdos das aulas práticas, que, juntamente com os relatórios das referidas aulas práticas, terão peso de 40%. OBS: Os relatórios com conteúdos idênticos, bem como entregues fora do prazo terão nota zero. X. NOVA AVALIAÇÃO Provas de recuperação serão feitas de acordo com as normas vigentes da UFSC. XI. CRONOGRAMA TEÓRICO - Conceitos e histórico das biotecnologias/Células tronco/Morfogênese in vitro. - Organogênese e micropropagação. - Embriogênese somática. - Sistemas avançados de cultivo (sementes sintéticas, biorreatores). - Conservação in vitro de recursos genéticos vegetais. - Haplóides e duplo-Haplóides/Resgate de híbridos raros/Cultivo de embriões. - Prova Teórica I - Estrutura e propriedades dos ácidos nucléicos e controle da expressão gênica. Genômica e Proteômica: fundamentos e aplicações. - Bases genéticas dos marcadores moleculares. - Aplicações dos marcadores moleculares para a caracterização, conservação e melhoramento - Tecnologia do DNA recombinante e métodos de transformação de plantas. - Plantas transgênicas desenvolvidas e características e cultivo de OGMs no Brasil e no mundo. Animais transgênicos e vacinas transgênicas. - Regulamentação de OGMs: Legislação de Biossegurança e Protocolo de Cartagena sobre Biossegurança. - Análise de Risco e Impactos dos OGMs. - Bioética e Ciência precaucionária - Prova Teórica II - Avaliação III XI. CRONOGRAMA PRÁTICO - Aula 1 Introdução ao laboratório e preparo do meio de cultivo - equipamentos, instalações, rotinas, meios nutritivos, preparação e esterilização do meio de cultivo; - Aula 2 Organogênese I – Escolha da planta matriz, seleção, desinfestação e inoculação de explantes - Aula 3 Organogênese II – Multiplicação dos propágulos/Alongamento e enraizamento/Avaliação da introdução - Aula 4 Embriogênese somática direta e indireta /Suspensões celulares/Linhagens celulares - Aula 5 Semente sintética/Criopreservação/ Crescimento lento - Aula 6 Biorreatores de imersão temporária/Aclimatização 2 - Aula 7 Prova Prática I - Aula 8 Introdução ao laboratório – instalações, equipamentos e rotinas relacionadas aos ácidos nucléicos e proteínas (Genômica e Proteômica) - Aula 9 Extração de DNA - Aula 10 Quantificação de DNA em gel de agarose/espectrofotômetro - Aula 11 Reação de PCR - Aula 12 Eletroforese de agarose - Aula 13 Interpretação dos produtos amplificados - Aula 14 Sequenciamento dos produtos amplificados - Aula 15 Introdução a eletroforese bidimensional de proteínas - Aula 16 Prova Prática II XII. BIBLIOGRAFIA BÁSICA 1. Apostila elaborada pelos professores: http://www.cca.ufsc.br/lfdgv/ Laboratório de Fisiologia do Desenvolvimento e Genética Vegetal. Neste site encontram-se também outros textos selecionados. 2.TORRES, A.C.; CALDAS, L.S.; BUZZO, J.A. (eds). Cultura de Tecidos e Transformação Genética de Plantas. V.1. e 2. Brasília, Embrapa, 864p. 1998 e 1999. XIII. BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR 3. GEORGE, E.F. Plant Propagation by Tissue Culture. Exegetics, Edington. 1996. V.1,2. FERREIRA, M.E. & GRATTAPAGLIA, D. Introdução ao uso de marcadores RAPD e RFLP em análise genética. Brasília, EMBRAPA, 220p.1995. 4. ROCA, W.M. & MROGINSKI, L.A. Cultivo de Tejidos en la Agricultura. Cali, CIAT, 970p. 1993. 5. TEIXEIRA, P. & VALLE, S. Biossegurança, uma abordagem multidisciplinar. RJ, FIOCRUZ, 362p.1996. 6. ZAHA, A. (Coord.). Biologia Molecular Básica. Porto Alegre, Mercado Aberto, 336p. 1996. 3