Giovanna Canato Toloi
Propaganda
Diagnóstico do carcinoma gastrointestinal pela detecção plasmática da heparanase VII CICI – VII Congresso de Iniciação Científica do IAMSPE Ac. Giovanna Canato Toloi Orientador: Prof. Dr. Jaques Waisberg INTRODUÇÃO Introdução • Carcinomas gastrointestinais – Alta incidência – Alta morbidade – Alta mortalidade • Principais causas de morte relacionadas ao câncer – Metástases • Principal causa de morte em doentes com tumor Introdução Metástase • Mecanismo – Interação entre matriz extracelular e membrana basal • Membrana basal: colágeno tipo IV, laminina e proteoglicanos de heparan sulfato • Invasão: metaloproteinases e enzimas (heparanase) Introdução • Heparanase – Endo-beta-glucuronidase – Degradação da cadeia de proteoglicanos de heparan sulfato – Efeito modulador multifuncional das células neoplásicas – Papel na progressão de tumores do esôfago, estômago e cólon – Expressão relacionada ao prognóstico do carcinoma gastrointestinal Introdução • Heparanase-1 (HPSE1) e Heparanase-2 (HPSE2) – Codificadas por genes diferentes – Distribuição tecidual e celular distintas – Identidade global: 35% Introdução – HPSE1 • Associada ao aumento potencial dos tumores e metástases • Formas – Superficie celular » 65kDa » Proteína percusora sem atividade enzimática aparente – Enzima ativa » 50kDa » Enzima madura Introdução – HPSE2: papel clínico pouco elucidado • Sem atividade enzimática • Poucos dados sobre funções no desenvolvimento tumoral Introdução • Catepsina B – proteinase cisteina lisossômica – alguns estudos: superexpressão desta enzima em tumores malignos – pode facilitar a invasão por dois processos: • degradação direta dos componentes da matriz extracelular • ativação de outras proteases MÉTODO Critérios de elegibilidade • Idade ≥ 18 anos • Diagnóstico histopatológico confirmado de carcinoma gastrintestinal • Sem quimioterapia ou radioterapia • Sem tratamento prévio de outra neoplasia • Ausência de doença aguda associada Pacientes – Grupo Paciente: 21 indivíduos operados de carcinoma gastrointestinal primário sem doença metastática • 16 (76,2%) homens e 5 (23,8%) mulheres • Média de idade: 68,7 ± 10,0 anos (50 a 82 anos) – Grupo Controle: 43 indivíduos saudáveis • 32 (74,4%) homens e 11 (25,6%) mulheres • Média de idade: 52,9 ± 5,0 anos (46 a 65 anos) Distribuição pela localização Distribuição pelo grau de diferenciação Método • Amostras de plasma e de células mononucleares de ambos os grupos de indivíduos • Proteínas HPSE1 e HPSE2 identificadas e quantificadas pelo método Western Blot • Expressão de mRNA analisada com PCR tempo real • Atividade enzimática da HPSE1 mensurada com heparan sulfato biotinilado e ensaio de ELISA-like • Atividade da Catepsina B foi mensurada por espectrofluorometria e os estudos foram feitos triplicados RESULTADOS Resultados Resultados Atividade Catepsina B Resultados CONCLUSÃO Conclusão • Houve um aumento significativo na atividade enzimática da HPSE1 e Catepsina B no plasma do grupo paciente. • Este estudo com teste de plasma e sangue não invasivo demonstrou a superexpressão das isoformas combinadas de HPSE1 e HPSE2 no carcinoma gastrointestinal como também um aumento da atividade da HPSE1 e da Catepsina B. • Estes resultados, combinados com os resultados de outros estudos são encorajadores para investigar sua possível contribuição para diagnóstico e tratamento do carcinoma gastrointestinal.
