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Camila Indiani de Oliveira
Seminário de Avaliação PRODOCs 1 e 2
Responsável Institucional: Mitermayer G. dos Reis
Instituição: CPqGM/FIOCRUZ
Departamento: LIP
Área/Subárea: Parasitologia/Parasitologia Humana
Título do Projeto:Caracterização dos componentes da glândula
salivar de Lutzomyia intermedia e de Lutzomyia whitmani e
caracterização de suas propriedades imunomoduladoras
Introdução I
Prioridade nos programas de controle da OMS
Fonte: WHO/TDR e MS/SVS
Introdução II
Introdução III
Lesão tecidual
Saliva
Hemostasia
Vasoconstrição
Coagulação
Agregação Plaquetária
Modificação do microambiente: estabelecimento da Leishmania?
Introdução IV
• Vacinação com proteína da saliva protege
contra a leishmaniose. (Valenzuela et al.,
2002).
• Vacinação com DNA que codifica a mesma
proteína protege contra a leishmaniose.
Objetivo do Projeto
• Estudar a saliva dos flebótomos Lutzomyia
whitmani e Lutzomyia intermedia, os principais
vetores da Leishmania braziliensis (espécie
causadora da leishmaniose tegumentar) na
Bahia.
• Identificar os componentes da saliva destes
vetores.
Hipótese: proteínas da saliva do vetor são
capazes de proteger contra a leishmaniose
causada por L. braziliensis.
Resultados alcançados
Utilizando um modelo experimental de LTA:
• Caracterização da resposta imune contra a saliva
de Lu. Intermedia.
• A pré-exposição à saliva protege contra a
leishmaniose.
• Quais os componentes da saliva responsáveis por
este fenômeno?
TR
%
CD8
0
SG
S
2
SG
S
10
TR
0
C
10
% de células CD4+
expressando IL10
20
TR
20
% de células CD8+
expressando IL10
SG
S
IL4
C
0
TR
IFN g
SG
S
10
C
0
TR
10
% de células CD4+
expressando IL4
20
C
20
% de células CD8+
expressando IL4
TR
SG
S
C
células
% de
% de
células
CD4
SG
S
C
%
% de células CD8+
expressando
IFN
células
de
A resposta imune contra a saliva é mista: indução de
mediadores pró-inflamatórios e anti-inflamatórios.
IL10
1
0
2
1
0
Resultados alcançados
Utilizando um modelo experimental de LTA:
• Caracterização da resposta imune contra a saliva
de Lu. Intermedia: Resposta mista.
• A pré-exposição à saliva protege contra a
leishmaniose?
• Quais os componentes da saliva responsáveis por
este fenômeno?
Tamanho da lesão (mm ± SE)
A imunização com saliva não protege contra a
leishmaniose.
2.0
CTR

Imunizado
SGS
1.5
1.0

0.5
0.0
0
2
4
6
8
10
12
Semanas após a infecção
14
16
18
Resultados alcançados
Utilizando um modelo experimental de LTA:
• Caracterização da resposta imune contra a saliva
de Lu. Intermedia: Resposta mista.
• A pré-exposição à saliva protege contra a
leishmaniose? Ñão.
• Quais os componentes da saliva responsáveis por
este fenômeno?
Massive Sequencing of Full-Length
Salivary Gland cDNA library
Sequence Analysis
Salivary gland cDNA database
Select candidates and clone into VR2001
Assembler output
Sequence
Best match to NR protein
database
LI-contig7-asb
LIM P5 B07
SL1 protein
Lu.longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig13-asb
LIL P3 B02
SL1 protein
Lu.longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig14-asb
LIS P9 E07
D7 salivary protein
Lu.longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig17-asb
LIS P9 F01
anticoagulant
Lu.longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig18-asb
LIS P9 F05
SL1 protein
Lu.Longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig25-asb
LIL P2 C06
SIG
VR2001
incomplete
LI-contig41-asb
Species
Average
Result
anticoagulant
Lu.longipalpis
SIG
antigen 5-related protein
Lu.longipalpis
SIG
Status
LI-contig43-asb
LIL P4 A03
LI-contig44-asb
LIM P6 F11
SIG
VR2001
LI-contig45-asb
LIL P2 H08
SIG
VR2001
LI-contig49-asb
LIM P6 G12
anticoagulant
Lu.longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig53-asb
LIL P2 E05
SL1 protein
Lu.longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig60-asb
LIS P8 B10
gastric mucin (clone PGM-2A)
putative yellow relatedprotein
LI-contig62-asb
LI-contig73-asb
SIG
Lu. longipalpis
LIS P9 C10
SIG
incomplete
SIG
VR2001
LI-contig85-asb
putative apyrase
Lu. longipalpis
SIG
incomplete
LI-contig100-asb
LIS P8 C09
putative yellow relatedprotein
Lu. longipalpis
SIG
VR2001
LI-contig103-asb
LIS P9 G07
SIG
VR2001
Conclusão I
• Divulgação: Publicações
de Moura TR, Novais, FO, Oliveira, F, Clarencio, J,
Noronha, A, Barral, A, Brodskyn C, de Oliveira CI. Toward a
novel experimental model of infection to study American
cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania braziliensis.
Infect. Immun. (2005) 73:5827-34.
Saliva de Lu. intermedia: Resposta imune em
camundongos e ausência de proteção contra desafio com
L. braziliensis.
Resposta inflamatória induzida pela saliva: modelo da bolsa
de ar.
Conclusão I
• Divulgação: Publicações
•Intraspecific polymorphisms of Brazilian isolates of Leishmania amazonensis revealed by DNA
sequencing, PCR-based analyses and molecular karyotyping. J.P.C. de Oliveira et al., enviado
para publicação. Acta Tropica.
•Involvement of TCR V12 in the human immune response against Leishmania amazonensis. J.
Clarêncio et al., aceito para publicação. Infec. Immun.
Conclusão II
• Impactos: Formação de recursos humanos
Iniciação Científica:
Fernanda Novais (concluído)
Marcia Weber (em andamento)
Renata Andrade (em andamento)
Mestrado:
Tatiana de Moura (concluído)
João Paulo S. C. de Oliveira (concluído)
Fernanda Novais (em andamento)
Maria José Menezes (em andamento)
Sarah Falcão (em andamento)
Doutorado:
Tatiana de Moura (em andamento)
Agradecimentos
• Fiocruz – Dra. Aldina Barral et al.
• FAPESB – Bolsa de Pos Doc.
• NIAID – Dr. Jesus Valenzuela.