DENGUE Seminário Rede DENGUE: desafios para Políticas Integradas de Ambiente, Atenção e Promoção da Saúde Rita M R Nogueira , PhD Laboratório de Flavivirus, IOC/FIOCRUZ [email protected] VÍRUS DENGUE Família Flaviviridae Gênero Flavivirus Possui 4 sorotipos distintos (DENV-1, 2, 3, 4) Causa DC e FHD É um arbovirus, transmitidos por mosquitos Organização da Partícula e Genoma Virais Nucleocapsídeo M Bicamada Lipídica E prM 30-50nm RNA fita simples (+) 3 ptns estruturais 7 ptns não- estruturais Introdução dos Vírus Dengue no Brasil Roraima 1982 - DENV-1 DENV-4 Agosto de 2010- DENV-4 Belém 1989- DENV-2 Caso Importado Rio de Janeiro São Paulo 1998- DENV-3 Caso Importado 1986 - DENV-1 1990 - DENV-2 2000 - DENV-3 Casos de Dengue, FDH, Óbitos e sorotipos circulantes no Brasil, 2010* RR Isolamento DENV-4 DEN 1 DEN 2 DEN 3 Casos NOTIFICADOS : 942.153 Casos CONFIRMADOS: 482.284 FHD: 2.271 Óbitos : 367 Predomínio DENV-1 Isolamento DENV-4 DEN 1, DEN 2 DEN 2, DEN 3 DEN 1, DEN 2, DEN 3 Sem positivvos sem circulação Até a 22º SE Fonte: SVS-MS Rede Nacional de Diagnóstico de Dengue *5 Laboratórios de Referencia Regional AP RR (IAL/SP, FIOCRUZ/RJ, LACEN/DF, LACEN/PE e IEC/PA) ** Laboratorio de Referencia Nacional AM PA** (IEC/PA) CE RN MA PI AC TO RO SE BA MT Isolamento de Virus 18 estados GO DF-* (RR, AP, PA, TO, CE, RN, PE, AL, BA, MG, ES, RJ, SP, DF, GO, MS, PR e RS) MS SP* Sorologia: 118 labs em estados RT-PCR: 4 estados (CE, PE, AL, GO) e 3 instituto PE* MG ES RJ* PR SC (IEC/PA, IAL/SP e RS FIOCRUZ/RJ) SOURCE: SES/FUNASA Unidades Sentinelas que utilizam o NS1 como Triagem: 59 Sorotipos de Dengue circulantes no Rio de Janeiro, 2001-2009 Re-emergência do Dengue tipo 2 160 DENV-1 DENV-2 DENV-3 8 140 7 120 6 100 5 80 4 60 3 40 2 20 1 0 0 70 J F M A M J J A S O N D J F M A M J J A S O N D J F M A M J J A S O N D 2001 2002 J F M A M 2003 60 J J A S O N D J F M 2004 Abril/2007 40 30 20 DENV-1 Dezembro/2009 10 0 J M M J S 2006 N J M M J S 2007 N J M M J S 2008 N J M J J A 2005 DENV-2 50 A M M J 2009 S N J M M 2010 J S O N D Diagnóstico Laboratorial do Dengue Isolamento Viral • Cultura de células de mosquito A. albopictus clone C6/36 Detecção de ácido nucléico viral • RT-PCR, PCR em tempo real Sorologia • Mac-ELISA,IgG-ELISA,Captura de antígeno NS1, Kits comerciais, PRNT Histopatologia e Imunohistoquímica RESPOSTA IMUNE NAS INFECÇÕES POR DENGUE Infecção Secundária (início dos sintomas) (início dos sintomas) Níveis de anticorpos e antígeno Infecção Primária IgG Vírus Vírus IgM NS1 NS1 Tempo IgM Sensibilidade dos testes de captura de NS1 de acordo com o número de dias de sintomas (n=220) 90 Detecção de virus 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0-1 2 3 4 5 6 7 Número de dias após o início dos sintomas 8 9 10 Desconhecido Diagnóstico de Dengue, Rio de Janeiro LABFLA, IOC/FIOCRUZ 2010* * Preliminares até 13/09/2010 Diagnóstico Positivo/ Testado(%) Sorotipo 29/106 (27,4) - 76/254 (30,6) 23 DENV-1 52 DENV-2 1 DENV-3 170/381 (44,6) 33 DENV-1 134 DENV-2 3 DENV-3 NS1 Platelia (Biorad) 26/85 (30,6) - NS1 AG STRIP (Biorad) 26/73 (35,6) - MAC-ELISA (Panbio) Isolamento Viral RT-PCR Weaver & Vasilakis (2009) V Filipinas (1956), Japão (1973), China (1980) América do Sul (2002-2004) 53 33 BR76012/ES/2002 33 BR69221/RJ/2001 59 BR75103/RJ/2002 51 BR77395/ES/2003 100 BR72308/RJ/2001 66 Análise filogenética de 25 amostras de DENV-2 baseada na seqüência dos genes C/prM/M/E , 1991-2010 BR67955/RJ/2000 BR63291/RJ/98 BR48578/CE/94 7 93 BR55803/BA/96 22 BR44298/BA/91 BR64625/RJ/99 63 17 19 Linha g e m I BR51222/RJ/95 BR55769/RS/96 BR52477/RJ/95 31 92 86 BR58448/RN/97 BR59382/RN/97 66 51 AF489932.1/BR64022/1998 BR66985/RJ/2000 86 DQ364497.1/Col/1997 96 91 S ud e ste Asiá tico DQ364511.1/EC/2000 GQ868540.1/VE/1990 M20558.1/Jamaica/1983 100 GQ868640.1/BR/2003 Método de neighbor-joining, modelo Tamura Nei e bootstrap de 1000 pseudoréplicas. 97 99 GQ199895.1/NI/1999 GQ199868.1/NI/2007 EU482726.1/US/BID-V595/2006 97 EU687216.1/PR/2005 100 61 84 82 AB122022.1/DR59/2001 AB122020.1/DR/2001 93 51 BR0030/RJ/2008 Linha ge m I I BR0199/RJ/2010 GU131885.1/BR/2008 98 BR0832/RJ/2008 45 BR0145/ES/2009 84 BR88034/RJ/2007 53 100 BR0066/BA/2009 44 BR86977/RJ/2007 31 66 BR0023/RJ/2010 AF204177.1/China/1989 100 100 AY858036.2/Indo/2004 100 100 Asiático II AF038403.1/NG/1944 Asiático I AB189124.1/Indo/1998 AF100467.1/Peru/1995 AF100469.1/Mexico/1992 100 63 EF457904.1/DakAr/1991 100 Americano EU056812.1/PR/1977 Selvagem EF105387.1/NIQ/BH/1966/DENV-3 AF289029.1/CHN/2000/DENV-4 GU370049.1/SGE/2008/DENV-1 78 82 AB111077.1/Thai/02 AB178040.1/Mic/04 99 DQ193572.1/FJ/04 EF508206.1/Shantou/Chi/06 64 90 Análise filogenética de 7 amostras de DENV-1 baseada na seqüência do gene E EF113152.1/GzChi/06 AY732482.1/Thai/01 AY732418.1/Thai/97 18 99 AY732422.1/Thai/96 19 Genótipo I / Ásia AY732408.1/Thai/00 45 AB111071.1/Cam/01 40 50 100 AY732458.1/Thai/99 AY732413.1/Thai/91 73 60 AY732378.1/Thai/82 AF350498.1/China/80 100 AF425630.1/Thai/80 AB074760.1/Mochizuki/43 100 95 100 82 Método de neighbor-joining, modelo Tamura Nei e bootstrap de 1000 pseudoréplicas. EU848545.1/Hawai/US/44 AY630407.1/FP/01 AB074761.1/Indo/88 Genótipo IV / Pacífico Sul AB232666.1/Indo/02 100 AF425627.1/Phil/74 99 100 42 82 U88535.1/Naur/74 AF425629.1/TH/63 Genótipo II / Thailandia AF180817.1/TH/64 AF425622.1/Mala/72 Genótipo III / Malásia AF298807.1/IvCo/99 AF425624.1/Mexi/83 39 63 99 88 AF513110.1/BR/01 74342/Mosq/RJ/BR/2001 99 AF425614.1/BR/97 Genótipo V / América/ África 31768/RJ/BR/1986 77 98 Linhagem I AF226685.2/Den1BR/90 83 78 1986/Mosq/RJ/BR/1986 GU131863.1/DENV-1/BR/2008 55 2009/ES/BR/2009 100 19 2010/RJ/BR/2010 92 Linhagem II 1435 09/RJ/BR/2009 65 97 1433 09/RJ/BR/2009 FJ850094/DENV-3/BR/2008 FJ850091.1/DENV-2/BR/2007 100 EU478410.1/DENV-4/MYA/H27/2006 Investigação de casos fatais (n=29) por dengue Rio de Janeiro, 2002 RESPOSTA IMUNE EM MENORES DE 15 ANOS COM AMOSTRAS PAREADAS EM 2007, HMSF n= 49 14 Primária Secundária Nº CASOS 12 10 8 6 4 2 0 DENV-2 DENV-3 Se m ide nt CASOS FATAIS DE DENGUE CONFIRMADOS LABORATORIALMENTE NO RIO DE JANEIRO DE ACORDO COM A IDADE 10 9 8 2007 2008 7 Nº CASOS 6 5 4 3 2 1 0 <5 6--15 16--30 31--45 46--60 >60 IGN FAIXA ETÁRIA 2007 n = 22 2008 n = 15 Laboratório de Flavivírus, Departamento de Virologia, IOC - FIOCRUZ Casos Fatais confirmados de Dengue em 2007-2008 no Estado do Rio de Janeiro, de acordo com sorotipo e resposta imune 35 30 25 20 15 10 5 0 DENV-2 DENV-3 Se m ide nt Primário Secundário Total: 94/195 (48,2%) Presença de sinais de gravidade de acordo com o sorotipo, Rio de Janeiro, 2007-2008 (plaquetopenia < 50.000/mm3; choque; sangramento digestivo; derrame cavitário; insuficiência renal, respiratória ou hepática) 35 (9,6%) Graves (DHF/DSS) Clássicos DENV-3 (n = 364) 329 (90,3%) 70 (37%) DENV-2 (n = 189) 119 (63%) Risco relativo = 3,85 (IC 95% = 2,67 – 5,55) p < 0.001 Obrigada !