Antibiograma

Microbiologia, Fundamentos & Aplicações - Métodos em Microbiologia - © 2007 Paulo E. Moretti
Antibiograma
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Conteúdo
Tópicos complementares
1 - Introdução
Ágar de Mueller Hinton
Antimicrobianos
Plasmídios bacterianos
Resistência a antimicrobianos
2 - Material
3 - Procedimento
4 - Resultados
1 - Introdução
Um antibiograma é um ensaio que mede a susceptibilidade/resistência de uma bactéria a um ou mais agentes
antimicrobianos. Seu objetivo é tanto a análise do espectro de sensibilidade/resistência a drogas de uma
bactéria quanto a determinação da concentração mínima inibitória.
O Ágar de Mueller Hinton é recomendado pelo U.S. Food and Drug Administration (FDA) e pela Organização
Mundial da Saúde (OMS) para o teste de sensibilidade/resistência a antibióticos de bactérias Gram positivas e
Gram negativas, aeróbicas ou anaeróbicas facultativas, comumente encontradas em alimentos e espécimes
clínicos. O teste, denominado antibiograma, é feito utilizando-se discos de difusão antibióticos depositados
sobre a superfície do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra de uma cultura bacteriana
previamente crescida em meio líquido.
2 - Material
Pipetador com volume fixo de 100 µl, ponteiras esterilizadas, alça de Drigalski esterilizada, placas de Petri
contendo meio Mueller Hinton, discos de difusão de antibióticos, cultura bacteriana em Caldo Nutriente ou meio
LB.
3 - Procedimento
Semear, por espalhamento com alça de Drigalski ou com uma zaragatoa esterilizada, uma alíquota de 100 µl da
cultura bacteriana em uma placa de Petri contendo meio Ágar de Mueller Hinton. Em seguida, depositar discos
de papel filtro impregnados, separadamente, com quantidades determinadas de um antibiótico específico sobre
a superfície do meio em disposição ordenada. Incubar a placa, invertidas, a 37ºC por cerca de 24 horas.
4 - Resultados
A formação de um halo transparente sobre a superfície do meio, ao redor de um disco de antibiótico, indica uma
região com ausência de crescimento bacteriano, revelando a ação inibitória do agente antimicrobiano sobre a
bactéria ensaiada. A figura 1 mostra um antibiograma realizado com a bactéria Enterobacter sakazakii.
Figura 1
JJ Farmer 1978 CDC Public Health Image Library; imagem de
domínio público
Tabela de resultados
Os resultados obtidos no teste devem ser organizados em uma tabela como a exemplificada:
Tabela de Resultados
Bactérias
Antibióticos
antibiótico 1 - C= X µg antibiótico 2 - C= X µg antibiótico 3 - C= X µg antibiótico 4 - C= X µg
bactéria 1
+
+
bactéria 2
+
+
bactéria 3
+
+
+
+
bactéria 4
C: concentração do antibiótico no disco
+ : resistência ao antibiótico na concentração testada
- : sensibilidade ao antibiótico na concentração testada
Procedência dos discos:
Fontes
CDC - Centers for Disease Control and Prevention: http://www.cdc.gov/
Public Health Image Library: http://phil.cdc.gov/phil/home.asp