VISITECT DENGUE Ref OD136 Teste rápido para a detecção de

Fabricado por: Omega Diagnostics LTD.
Importado e Distribuído por: BioSys Ltda
Rua Coronel Gomes Machado, 358, Centro, Niterói, RJ
Cep: 24020-112
CNPJ: 02.220.795/0001-79
MS – 10350840159
Responsável técnico:
Vera Lúcia Alves Janoni – CRF: 2848
SAC: (21) 3907-2534 –
[email protected] www.biosys.com.br
VISITECT® DENGUE Ref OD136
Teste rápido para a detecção de anticorpos IgG e IgM da Dengue em Soro Humano,
Plasma ou Sangue Total.
Armazenar de 4ºC a 30ºC. NÃO CONGELAR.
Somente para uso diagnóstico in vitro.
INTRODUÇÃO E FINALIDADE DE USO
O vírus da Dengue (sorotipos 1 – 4) pertence à Família Flaviviridae, e
tem sido observado em mais de 100 regiões tropicais e subtropicais do
mundo ameaçando 2/5 da população mundial. A infecção pelo vírus da
Dengue é considerada significante em termos de incidência da
enfermidade nas regiões, mortalidade e custo econômico associado com
os 100 milhões de casos estimados de dengue que ocorrem anualmente
em todo o mundo. O vírus da Dengue é transmitido pela espécie de
mosquito Aedes aegypti e Aedes albopictus. A Dengue se apresenta
tipicamente como uma febre de início súbito com dor de cabeça, dor
retro-orbitária, dor nas costas e nos membros (febre quebra-ossos),
linfoadenopatia e manchas máculo-papular. Os pacientes diagnosticados
com dengue em áreas endêmicas geralmente têm infecção secundária,
considerando que pacientes em áreas não endêmicas são comumente
diagnosticados com infecção primária. A resposta do anticorpo específico
para o vírus da Dengue permite o sorodiagnóstico, a diferenciação entre
as infecções de dengue primárias e secundárias, e a detecção de
condições potencialmente ameaçadoras à vida, como a Febre
Hemorrágica do Dengue (FHD) e Síndrome do Choque do Dengue
(SCD).
O VISITECT DENGUE é um teste imunocromatográfico qualitativo para a
detecção rápida e simultânea de anticorpos IgM e IgG para todos os
quatro sorotipos do vírus da Dengue em soro, plasma ou sangue total
humano dentro de 20 minutos. O teste pode ser usado como um teste de
triagem para a infecção viral por Dengue e como um auxílio para o
diagnóstico diferencial de infecções primárias de Dengue auto-limitantes
e de infecções secundárias de Dengue potencialmente fatais, em
conjunto com outros critérios.
O VISITECT DENGUE é um teste imunocromatográfico rápido que utiliza
antígenos recombinantes imunodominantes altamente específicos do
envelope do vírus da Dengue “Env”, como um auxiliar para o diagnóstico
diferencial da infecção pelo vírus da Dengue.
Somente para uso profissional.
PRINCÍPIO DO TESTE
O VISITECT DENGUE utiliza o princípio da Imunocromatografia, um
imunoensaio de dois sítios em uma membrana. Os anticorpos
monoclonais anti-IgM e anti-IgG humanas estão retidos na membrana de
nitrocelulose como duas linhas de teste individuais, denominadas como
G (IgG) e M (IgM) dentro da janela de teste. Como a amostra do teste
corre ao longo da membrana que está dentro do CASSETE de teste, o
conjugado formado de envelope recombinante do vírus da Dengue
revestido com ouro coloidal se liga com os anticorpos específicos (IgG
e/ou IgM) contra o vírus da Dengue, se eles estiverem presentes na
amostra. Esse complexo se desloca ao longo da membrana para a
região de teste onde é retido pelos anticorpos anti-IgG humana e/ou antiIgM humanos monoclonais revestidos na membrana, levando à formação
de uma linha de cor vermelha, que confirma um resultado positivo do
teste. A ausência dessas linhas vermelhas indica um resultado negativo.
Uma linha vermelha na região de Controle (C) aparece quando o teste foi
realizado corretamente, pois a IgG anti-dengue (coelho) revestida com
conjugado de ouro coloidal se liga com o anticorpo anti-IgG de coelho
que está retido na membrana de nitrocelulose, independente da
presença ou ausência de anticorpos anti-dengue na amostra, servindo
assim para validar o desempenho do teste.
CONTEÚDO
(para 25 testes)
REF
OD136
Test
Device
25 unidades
Cassete composto por uma membrana pré-dispensada com uma
proteína recombinante imunodominante do envelope do vírus da Dengue
revestida com conjugado de ouro coloidal e IgG anti-dengue (coelho)
revestida com conjugado de ouro coloidal. Anti-IgG humana monoclonal
na região de teste ‘G’, Anti-IgM humana monoclonal na região de teste
‘M’ e anticorpo anti-IgG de Coelho na região de controle ‘C’.
Saco dissecante.
Buf
Tampão Diluente. Solução de tampão fosfato.
Pipeta Capilar
(10 μL de volume indicado pela linha preta)
Instrução de Uso
5mL
25 unidades
1
MATERIAIS REQUERIDOS MAS NÃO FORNECIDOS
Pipeta de microtitulação (10 μL).
PRECAUÇÕES
Os reagentes VISITECT não contêm substâncias perigosas de acordo
com as regulamentações atuais da UK Chemicals (Informações
Perigosas e Embalagem para Fornecimento). Todos os reagentes
devem, entretanto, serem tratados como potenciais riscos biológicos
para utilização e descarte. O descarte final deve ser realizado de acordo
com a legislação local. Não ingerir.
VISITECT DENGUE. O tampão diluente contém Azida Sódica 0,095%
como conservante, que pode ser tóxica se ingerida. A Azida Sódica pode
reagir com encanamentos de chumbo e cobre e formar sais altamente
explosivos. No descarte, utilize grandes quantidades de água.
ARMAZENAMENTO
Os reagentes devem ser armazenados em temperaturas entre 4oC e
o
30 C.
O kit apresentará o desempenho de acordo com as especificações até a
data de validade indicada pelo fabricante, determinada a partir da data
de fabricação do produto, e indicada no kit e componentes. A data de
validade é o último dia do mês indicado nos rótulos da embalagem e do
kit. Não utilize reagentes após o prazo indicado na embalagem.
A exposição dos reagentes as temperaturas excessivas deve ser evitada.
Não expor à luz solar direta.
NÃO CONGELE O CASSETE pois isso irá causar danos irreversíveis.
COLETA E PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
Soro: Coletar uma amostra de sangue venoso do paciente e deixar a
formação e retração do coágulo. Centrifugar a amostra de sangue
coagulado e coletar soro límpido. São necessárias amostras de soro
frescas.
O soro deve ser armazenado entre 2 oC e 8 oC por até 48 horas antes do
teste. Se as amostras tiverem que ser armazenadas por um período
maior, as mesmas devem ser armazenadas à – 20ºC por até 6 semanas.
As amostras descongeladas devem ser misturadas para assegurar a
homogeneização antes do teste.
Evite congelar e descongelar repetidas vezes as amostras, pois isso
pode provocar falsos resultados.
Plasma: Coletar uma amostra de sangue venoso do paciente e colocar
no frasco de coleta de plasma. Centrifugar a amostra e coletar o plasma
límpido. São necessárias amostras de plasma frescas.
A amostras de plasma devem ser armazenadas entre 2 oC e 8 oC por até
72 horas antes do teste.
Amostras de sangue total frescas podem também serem usadas com
esse kit.
Não usar amostras contaminadas ou lipêmicas para o teste, pois podem
afetar os resultados.
PREPARAÇÃO DO REAGENTE
Os cassetes e amostras devem estar na temperatura ambiente (20 – 25
ºC). Homogeinizar as amostras e o tampão suavemente antes do uso.
No caso da embalagem ter sido armazenada entre 4 e 8 oC, deixe o
cassete em repouso por pelo menos 30 minutos para que o mesmo fique
na temperatura ambiente.
LIMITAÇÕES DE USO
A utilização de outras amostras que não sejam soro, plasma ou sangue
total não foi validada nesse teste.
Não existe protocolo de reutilização para esse produto.
Reação sorológica cruzada dentro do grupo flavivírus (vírus da Dengue,
encefalite de St. Louis, encefalite Japonesa, febre do Nilo Ocidental e
febre Amarela) é comum.
Um resultado baixo ou suspeito de ser positivo deve ser reavaliado. O
diagnóstico não deve ser feito somente com base em um único teste
clínico. Ao realizar a interpretação do teste é altamente recomendado
levar em consideração todos os dados clínicos.
1.
2.
3.
4.
PROCEDIMENTO DO TESTE
Abra a embalagem e retire o cassete. Uma vez aberto, o cassete
deve ser usado imediatamente.
Usando uma pipeta capilar não usada e limpa ou uma pipeta de
microtitulação, adicione 10 µL no local quadrado de amostra
marcado com “S”. O volume de 10 µL é indicado na pipeta capilar
através de uma linha preta.
Adicione 4 gotas (100 µL) de Tampão no local circular segurando o
frasco conta-gotas de plástico verticalmente.
Leia os resultados ao final de 20 minutos. Não leia os resultados
após 20 minutos, pois leituras tardias podem gerar falsos
resultados.
O kit deve ser manuseado apenas por pessoal qualificado.
Não utilize componentes do kit danificados ou contaminados.
DADOS DE AVALIAÇÃO
Em um estudo, 100 amostras positivas conhecidas e 300 amostras
negativas conhecidas, definidas pela condição clínica, pela HI e pela EIA
foram testadas com o VISITECT DENGUE. Os resultados obtidos foram
os seguintes:
HI Positivo
EIA Positivo
Total
HI Negativo
Dengue
Clínico
Negativa
Adicional
Encefalite
Japonesa
Positiva
Febre
Amarela
Positiva
Malária
(P.
falciparum)
Positiva
Malária
(P. vivax)
Positiva
Total
RESULTADOS E INTERPRETAÇÃO
G
M
C
↑
S
Resultado Negativo:
A presença de somente uma única linha de cor vermelha na região de
controle “C” indica a ausência de anticorpos específicos contra o vírus da
Dengue ou que a quantidade de anticorpos está abaixo do limite de
detecção do teste.
Resultado Positivo:
Amostras
Totais
Sensibilidade
168
22
190
94,64%
100%
95,26%
VISITECT
DENGUE
+
14
225
Amostras
Totais
Especificidade
239
94,1%
0
18
18
100%
0
25
25
100%
0
25
25
100%
0
25
25
100%
0
25
25
100%
14
343
357
96,08%
G
↑
S
Sensibilidade 159/168 + 22/22 = 181/190 = 95,26%
Especificidade Total 343/357 = 96,08%
M
C
VISITECT
DENGUE
+
159
9
22
0
181
9
GARANTIA
Estas instruções de uso devem ser lidas atentamente antes da utilização
do produto e as instruções nela contidas devem ser rigorosamente
cumpridas. A confiabilidade dos resultados do ensaio não poderá ser
garantida em caso de desvio às instruções.
GERENCIAMENTO DE RESÍDUOS
Seguir as disposições da resolução sobre o regulamento técnico para
gerenciamento de resíduos de serviços de saúde bem como outras
práticas de biossegurança equivalentes, revisão em vigor
1.
G
M
C
↑
S
1) Se, além da linha vermelha de controle “C”, aparecerem linhas teste
na região “G” (IgG) e na região “M” (IgM) significa que existem anticorpos
IgG e IgM específicos para o vírus da Dengue. (Infecção secundária
aguda)
A Reprodutibilidade do VISITECT DENGUE é de 100% (+/- uma dupla
diluição).
G
M
C
↑
S
2) Se, além da linha vermelha de controle “C”, aparecer uma linha teste
na região “M” (IgM) indica a presença de anticorpos IgM específicos para
o vírus da Dengue. (Infecção primária aguda)
3) Se, além da linha vermelha de controle “C”, aparecer uma linha na
janela de teste somente na região “G” (IgG) indica a presença de
anticorpos IgG específicos para o vírus da Dengue. (Infecção secundária
aguda / Infecção passada)
O teste deve ser considerado inválido se a linha de controle não
aparecer. Repita o teste com um novo cassete.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
REFERÊNCIAS
Technical advisory group on dengue haemorrhagic fever/dengue
shock syndrome (1986). Dengue Haemorrhagic fever diagnosis,
treatment and control. Geneva, Suíça: Organização Mundial de
Saúde.
Monath, T. P. and Heinx F. X. (1996). Em B. N. fields, Knipe, D. M.
e Howley, P. M. (Eds),
Virology, Lippincott-Raven, NY.Flaviviruses. 1016-1021.
Mikano Y et al. (1994). Studies on Serological cross-reaction in
sequential Flavivirus infections. Microbiol. Immunol., 38(12). 951955.
Clarke, D. H. and Casals, J. (1958).
Techniques for
Hemagglutination
and
hemagglutination
inhibition
with
arthropodborne viruses. Am. J. Trop. Med. Hyg. 7:561-573.
Sutherst, R. W. (1993). Arthropods as disease Vectors in a
changing environment. In environmental change and human health.
CIBA foundation symposia 175: 124-145.
Innis, B. L., Nisilak, A., Nimmannitya S. et al. (1989). An enzymelinked immunoabsorbent assay to characterise dengue infections
where dengue and Japanese encephalitis cocirculate. Am. J. Trop.
Med. 40:418-427
Ruechusatsawat, K. et al. (1993). Daily observation of antibody
levels among dengue
patients detected by enzyme-linked
immunosorbent assay (ELISA). Jpn. J. Trop. Med. Hyg. 22(1):9-12.
Dependendo da concentração dos anticorpos para a Dengue na amostra,
os resultados positivos podem começar a aparecer logo em 2 minutos;
os resultados negativos devem ser confirmados somente ao final de 20
minutos.
Não leia os resultados após 20 minutos pois leituras tardias podem gerar
falsos resultados.
8141 ISSUE 7 Revised DecemberMarch 2010/
BS Rev 00 ago2012
RECOMENDAÇÕES
Use uma alça de amostra separada para cada amostra para prevenir
contaminação cruzada.
Antes de iniciar o teste todos os reagentes devem estar a temperatura
ambiente ( 20 – 25 ºC).
OMEGA DIAGNOSTICS LTD.
Omega House, Hillfoots Business Village
Alva FK12 5DQ, Escócia, Reino Unido
[email protected]
www.omegadiagnostics.co.uk
EMPRESA CERTIFICADA ISO 9001:2000