Efeito de uma desintegrina RGD na migração do câncer de células

C.3.1 – Bioquímica.
Efeito de uma desintegrina RGD na migração do Câncer
âncer de células escamosas de origem
bucal.
1
2
3
4
Cyntia de F. Montenengro *, Heloisa S. Selistre
elistre-de-Araujo , Rick Horwitz , Marcelo L. Lamers .
1. Estudante de Doutorado da Universidade Federal de São Carlos, UFSCar *[email protected]
2. Professora Dra da Universidade Federal de São Carlos, UFSCar, São Carlos, SP.
3. Professor Dr da Universidade da Virginia, Charlottesville, Virginia, EUA.
4. Professor Dr da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, UFRS, Porto Alegre, RS.
Palavras Chave: Migração, Integrinas, Desintegrinas.
Desintegrinas
Introdução
O microambiente tumoral é um meio complexo, que conta
com a participação de diversos tipos celulares, assim
como, diferentes fatores de crescimento
nto liberados pelas
células tumorais e por células não tumorais associadas ao
tumor. À medida que o tumor cresce, mais células migram
através do tecido conectivo, rico em colágeno e
fibronectina, para chegar aos vasos e em seguida ao sítio
metastático. Durante a migração celular, as integrinas são
os principais receptores de adesão envolvidos nesse
processo. Elas interagem com proteínas
teínas presentes na
matriz extracelular (MEC),, conectando as células ao meio
externo e possibilitando sua locomoção.. As
A integrinas
envolvidas na adesão das células a fibronectina são a
αvβ3 e a α5β1 que se ligam a fibronectina através do
d
motivo RGD (Arginina/Glicina/Ac. Aspartico) presente na
proteína da MEC. Nesse contexto, foi utilizada uma
desintegrina RGD recombinante, DisBa-01 com o objetivo
de investigar os efeitos na migração de células normais
(fibroblastos) e tumorais (câncer
câncer de células escamosas
esca
de
origem oral) sobre a fibronectina.
Resultados e Discussão
Filmes de time-lapse
lapse foram realizados utilizando as
linhagens BJ (fibroblastos humanos) e SCC25 (câncer de
células escamosas de origem oral) em placas de 3cm
contendo fibronectina (2µg/mL) como substrato,
substrato durante 8
horas. Foi observado (figura 1) que a DisBa-01
Dis
inibiu
tanto a velocidade de migração, quanto a direcionalidade
das células tumorais mas nenhum resultado significativo
foi encontrado na linhagem de células primárias de
fibroblastos humanos.
B
Para analisar se o efeito dos resultados sobre a inibição
da migração estaria relacionado a mudanças nas adesões
das células, um Western blotting para os receptores de
fibronectina foi realizado. Na figura 2, pode-se observar
que os níveis de expressão das subunidades α5, αv e β3
foram semelhantes, enquanto que a subunidade β1 está
presente em menor quantidade
uantidade na SCC25. Esse perfil
pode indicar uma possível preferência da DisBa-01
Dis
pela
subunidade β3 dado que, o bloqueio dessa subunidade
pela DisBa-01 faz com que a célula tumoral fique
fi
impossibilitada de migrar sobre a fibronectina.
fibronectina
Figura 2. Perfil de integrinas ligantes a fibronectina α5,β1,
αv e β3 e caderinas presentes nas células BJ e SCC25.
Figura 1. Ação das DisBa-01 sobre a velocidade de
migração (A) e direcionalidade (B) nas
as linhagens BJ e
SCC25. As células foram tratadas com a DisBa-01
Dis
adicionada ao meio ou ao substrato nas concentrações de
1 e 2µM.
A
Conclusões
Conclui-se
se que o efeito seletivo da DisBa-01
Dis
na
migração das células tumorais é devido a modulação
modulaç das
propriedade adesivas das células.
Agradecimentos
Apoio financeiro: CAPES, CNPq, FAPESP.