Árvore filogenética do domínio Bacteria Filo Chlamydiae • contém 4 famílias; 5 géneros – O género Chlamydia é o mais estudado • Não móveis, cocos – A parede celular é típica de uma Gram-negativa – Têm genomas pequenos (0,5 a 1 Mb) – Têm capacidades bioquímicas simples • São parasitas intracelulares obrigatórios – Encontram-se em mamíferos e pássaros – Também foram isolados de aranhas e outros invertebrados aquáticos – Via principal de contágio: através do ar (dispersão dos corpos elementares) Lysis of host cell, 48 h after infection The infection cycle of Chlamydia Binary fission Two cellular types: - Elementary body; dense, small, infectious cell; function: dispersal (usually airborne). - Reticulate body: vegetative form; function: reproduction. Espécies patogénicas importantes • Chlamydophila pneumoniae – é o causador comum de pneumonia em humanos - Há evidências de que infecção pode estar associada ao desenvolvimento de artereoesclerose - infecção pode causar inflamações severas do coração • Chlamydia trachomatis –infecta humanos e ratos – causa tracoma (olhos), doenças genitourinárias (sexualmente transmissíveis) em humanos Human infected fallopian tube cell releasing elementary bodies Árvore filogenética do domínio Bacteria Filo Spirochaetes • Contém 13 géneros (mais comuns são Spirochaeta, Treponema, Cristispira, Leptospira e Borrelia) • Existem em ambientes diversos como lama, sedimentos, em associação com animais, térmitas e moluscos • Quimioorganoheterotróficas • Bactérias Gram-negativas com estrutura e mobilidade distintas – São células longas em forma de hélice – Movimento tipo parafuso devido a uma estrutura denominada filamento axial Spirochaeta plicatilis, 0.75 µm diâmeter; 250 µm lenght filamento axial = complexo de fibrilas axiais que podem ser em número superior a 100 (endoflagelo) • Algumas espiroquetas encontradas em sedimentos anóxicos e aguas doces; • ou que vivem em associações simbióticas com protozoários e no estômago de térmitas Fixam N2 (contém nitrogenases) – papel no ciclo do N; papel na nutrição de protozoários e de bactérias metanogénicas que vivem no estômago de térmitas. • Algumas vivem na cavidade oral de animais (ex. Treponema dentalis; T. oralis) • Algumas espécies são patogénicas Treponema pallidum causa sífilis O estudo deste organismo e o seu envolvimento na sífilis tem sido difícil devido à dificuldade de o cultivar fora das células do hospedeiro; Tratamento da infecção – com penicilina Borrelia burgdorferi causa a doença de Lyme Transmitido por picada de carraça 1ª fase- lesões da pele (“rush”), cansaço, dor de cabeça, febre 2ª fase- problemas neurológicos, artrite, inflamação do coração Domínio Bacteria Filo Bacteroidetes • Classe Bacteroides • São bastonetes gram-negativos • Anaeróbicos obrigatórios, quimioheterotróficos • Encontram-se na cavidade oral e intestinal de humanos e ruminantes – beneficiam o hospedeiro pois degradam celulose, pectina e outros hidratos de carbono complexos, contribuindo para a nutrição do hospedeiro – constituem até 30% das bactérias presentes nas fezes humanas – algumas espécies (Bacteroides fragilis) são encontradas em infecções abdominais, pélvicas, pulmonares e sanguíneas Árvore filogenética do domínio Bacteria Bactérias Gram Positivas (baixo conteúdo GC, ~25-55%) Classe Mollicutes (Micoplasmas) - Não têm parede celular e são pleiomórficas – Não sintetizam os percursores do peptidoglicano • Não são sensíveis à penicilina – A membrana plasmática é estabilizada por esteróis – A maioria das espécies é imóvel – Baixo conteúdo GC (< 40%) – Filogenéticamente relacionadas com Gram positivas Células de Mycoplasma mycoides Morfologia típica de colónias, em forma de ovo estrelado, em meio agarizado agar • Têm genomas muito pequenos (0,6 Mpb) • São quimiorganotróficos mas apresentam muitas deficiencias em vias metabólicas • São anaeróbios facultativos • Em animais, colonizam as membranas mucosas Patogénios importantes • Mycoplasma mycoides – pleuropneumonia bovina • Mycoplasma gallisepticum – doenças respiratórias em galinhas • Mycoplasma hyopneumoniae – pneumonia em suinos • Mycoplasma pneumoniae – pneumonia atípica em humanos • Spiroplasmas – patogénicas para insectos e algumas plantas Microfotografia (microscopia de campo escuro) de spiroplasma “sex ratio” isolada da hemolimfa da mosca Drosophila pseudoobscura. Nota: as fémeas infectadas só têm descendência feminina. Classe Clostridia: Género Clostridium São produtores de endósporos C. bifermentens C. cadaveris C. sporogens • Conhecem-se mais de 100 espécies • Habitat preferencial - nichos anóxicos no solo - Sedimentos aquáticos ou marinhos - Intestino de mamíferos (ex: Clostridium perfringens) • São anaeróbios estritos – Metabolismo: respiração anaeróbia ou fermentação • Ex. de metabolismo fermentativo (várias espécies não têm citocromos) – Fermentação de aminoácidos pela reacção de Strickland (Os produtos do metabolismo fermentativo estão associados ao mau cheiro da putrefação (p.ex. ácido butírico, isovalérico, capróico, cadaverina, putresceína, etc)) - Fermentação de açucares (→ butanol e acetona, produtos principais) Espécies importantes pertencentes ao género Clostridium • C. botulinum – contaminação de alimentos; botulismo (→ tratamento térmico de alimentos proteicos enlatados) • C. tetani – tétano • C. perfringens – gangrena gasosa • C. acetobutylicum – industrial; produção de butanol e acetona Classe Bacilli • Contém duas ordens, Bacillales e Lactobacillales; 16 famílias; ~ 59 géneros O género Bacillus • Habitam no solo • São produtores de endósporos • Incluem espécies aeróbias e outras anaeróbias • Produzem enzimas hidrolíticas (para degradar polissacários, ácidos nucleicos, lípidos) – Diversas espécies são fontes importantes de enzimas de interesse comercial (amilases, proteases, lipases, etc.) • B. subtilis – é um importante modelo experimental – genome está sequenciado • ≥10 profagos integrados no genoma • Algumas espécies são produtoras de antibióticos como a bacitracina e a polimixina (B. licheniformis e B. polymyxa, respectivamente) • B. cereus – contaminação de alimentos • B. anthracis – antrax (carbúnculo) – doença do gado, transmissível a humanos • B. thuringiensis, B. sphaericus, B. popilliae – são usados como insecticidas naturais contra larvas de insectos – Corpo parasporal – cristal sólido de toxina Bioinsecticidas (Prescott, Harley e Klein, “Microbiology”) Formação do cristal para-espórico numa célula em esporulação da bactéria Bacillus thuringiensis (Bt). Esta proteina cristalina, designada por toxina Bt é tóxica para certos insectos, causando lise das células intestinais das larvas. Ordem Lactobacillales • Também chamadas de bactérias do ácido láctico • Diversas morfologias (cocos, bastonetes) – Não formadoras de esporos – Anaeróbios aerotolerantes • Fermentam açúcares para obter energia – Não têm citocromos – Necessitam de aminoácidos, purinas, pirimidinas nos seus meios de cultura • Vivem em locais ricos em matéria orgânica • Crescem em meios levemente acídicos (pH 4.5 – 6.5) – são acidófilos • Usam açucares como fonte de C e energia • E realizam fermentação homoláctica (via da glicólise) ou heteroláctica (via das pentoses fosfato) (⇒) • Vasta distribuição na natureza – Na superfície de plantas (Leuconostoc mesenteroides) – Em produtos como o leite, a carne, água, frutos, e outros materiais (L. bulgaricus, L. lactis, L. casei, L. brevis) – Flora normal da boca, intestino (L. acidophilus, Bifidobacterium) • Geralmente não são patogénicos Fermentação homoláctica Fermentação heteroláctica Glucose-6-phosphate Glicólise Via das Pentoses-P (⇒) Ex. espécies dos géneros Lactobacillus, Lactococcus, Enterococcus, Streptococcus Ex. espécies dos géneros Lactobacillus, Leuconostoc Importância dos lactobacilos (género Lactobacillus) • ALIMENTOS FERMENTADOS – Fermentação de produtos vegetais (sauerkraut, pickles, e silage) – Fermentação de bebidas (sumos) – Pão ácido – Queijo Suiço, Ricotta, requeijão – Iogurte – Salsichas, chouriço, salami • São conservantes alimentares (associado à produção de ácido láctico – conservante natural) • Podem contaminar certos alimentos e causar a sua deterioração (p. ex. leite, carne, cerveja) → - produção de odores e aromas desagradáveis (produtos finais do metabolismo fermentativo); - alteração do aspecto (acidificação ⇒ precipitação de proteínas) Produção de IOGURTE Leite meio gordo ou magro Pasteurização Inoculação com culturas de Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus Incubação a 43ºC Inicialmente, S. thermophilus cresce mais rapidamente e cria condições ligeiramente ácidas e anaeróbias Em conjunto, ambas as bactérias fermentam quase toda a lactose do leite a ácido láctico - Acidificação ⇒ precipitação de proteínas do leite - Formação de produtos secundários ⇒ aroma, sabor (propriedades organolépticas) Diacetilo (S. thermophylus) Frutos e aromas adicionados são pasteurizados à parte. Acetaldeido (L. bulgaricus) O género Leuconostoc • Isolado de plantas, leite • Produção de “sauerkraut” e pickles • Producão de manteiga e queijo • Produção industrial de dextranos a partir de sacarose (por Leuconostoc mesenteroides) – Dextranos – polissacáridos de glucose com vastas aplicações biomédicas, devido à sua biocompatibilidade (p.ex. Aditivo em sangue – transfusões; anticoagulante; agentes de contraste em imagiologia médica, etc.) – Os dextranos com aplicação médica são derivados dos produzidos pela bactéria, com peso molecular mais baixo (parcialmente hidrolizados) • Algumas espécies envolvidas na deterioração de alimentos – toleram concentrações de açucar elevadas – crescem em xaropes concentrados (→ p. ex. causam problemas nas refinarias de açucar) O género Streptococcus • Células associadas aos pares ou em cadeias • A maioria das espécies são homofermentativas • Algumas espécies são patogénicas para o homem α-hemólise – Lise incompleta dos globulos vermelhos → Zona esverdeada à volta da colónia, em meio de sangue agarizado β-hemólise – Lise completa dos globulos vermelhos → Zonas transparentes à volta da colónia, em meio de sangue agarizado Algumas espécies importantes • Streptococcus pyogenes - causam faringite, escarlatina e febre reumática • S. pneumoniae – pneumonia, otites, meningite • S. mutans e S. salivarius – - cáries dentárias • S. faecalis, S. faecium – habitam no intestino (p.ex. indicadores de contaminação fecal da água) e usam a lactose do leite (podem causar a sua deterioração). Algumas estirpes são patogéneos oportunistas. • S. lactis (lactococos) – produzem ácido láctico e são importantes na indústria de lacticínios (queijo e manteiga) Género Sarcina Agregados de forma cubica com 8 ou mais células Têm celulose na parede celular Tolerância extrema a meio ácido Microfotografia contraste de fase (1 célula tem 2 µm de diâmetro) Unica bactéria capaz de crescer no estômago de diversos animais e humanos Sarcina ventriculi – encontrado no estômago de doentes com ulceras do piloro Microfotografia por microscopia electrónica de uma secção fina; o envolucro exterior é Constituido por celulose O género Staphylococcus • Células associadas em cachos • São anaeróbios facultativos; Swampie.worldpress.com podem realizar respiração pois têm cadeia de transporte de electrões S. aureus • Fermentam glucose, com formação de ácido láctico (fermentação láctica) • Toleram elevadas pressões osmóticas e baixa humidade • Colonizam secreções nasais, pele, alimentos salgados (presunto) Parede celular espessa (Gram+) Microfotografia por microscopia electrónica de transmissão de célula de S. aureus em divisão. Staphylococcus epidermidis • É um habitante normal da pele • Por vezes causa infecções em pacientes debilitados – e.g., infecções em feridas, infecções após cirurgias, e do aparelho urinário Staphylococcus aureus • • Existe no nariz, pele, aparelho gastrointestinal e urinário Pode causar abcessos, infecções em feridas, pneumonia (frequentemente, infecções secundárias), e intoxicações alimentares (por enterotoxinas) MRSA – “Methycilin resistant Staphylococcus aureus” Osteomyelitis of the foot (Thefootblog.org) • É uma espécie coagulase-positiva – causa coagulação do sangue • α-hemolíticos (produzem toxina α-hemolisina) – Causam lise completa dos glóbulos vermelhos – Colónias em meio “blood-agar” - vê-se uma zona clara à volta das colónias Género Listeria • Bastonetes curtos – Móveis por flagelos peritríquicos • Aeróbios ou facultativos – catalase positive • Largamente distribuido na natureza – Habitat comum: matéria em decomposição • e.g., L. monocytogenes – listeriose – Doença transmitida por alimentos contaminados Bactérias Gram Positivas (elevado conteúdo GC, ~60-75%) Filo Actinobacteria • Contém uma classe, Actinobacteria; cinco subclasses; seis ordens; 14 subordens; 40 famílias • É constituída pelas bactérias actinomicetas e outras Gram positivas de elevado G + C Propriedades gerais das Actinomicetas • • Bactérias Gram-positivas – Formam filamentos ou hifas – Formam esporos (função: disseminação da espécie) – Resistem à desidratação mas não ao calor – Sem mobilidade • Os esporos podem ter mobilidade por meio de flagelos Aeróbicos (metabolismo respiratório) Importância prática • Encontram-se no solo – Degradam uma grande variedade de compostos orgânicos – Importantes no processo de mineralização da matéria orgânica • Produzem a maior parte dos antibióticos naturais • Alguns são patogénicos para o homem, animais ou plantas conidiósporos = conídia Hifas aéreas micélio Estrutura geral dos Actinomicetes (in Prescott, Harley, Klein, “Microbiology”, 5th ed.) Conversão de uma hifa aérea em conídia Esporos aéreos de Kitasatosporia setae Género Streptomyces • Contém mais de 500 espécies – produzem geosminas • Substâncias voláteis que conferem odor à terra molhada – importantes no processo de mineralização • Metabolismo aérobio e degradam compostos de difícil degradação (e.g., pectina, quitina e até borracha) • Produzem grande variedade de antibióticos com acção antibacteriana • De uma forma geral não são patogénicas Ecologia e Isolamento de Streptomyces Solo Crescimento mais favorável em solos alcalinos e neutros Nutricionalmente versáteis Colónias de Streptomyces sp. e outras bactérias do solo resultante do espalhamento de amostra de solo na superficie de meio de caseína + amido agarizado. Colónias de Streptomyces coelicolor Antibióticos sintetizados por espécies de Streptomyces Acção de antibióticos sintetizados por Streptomyces sp. numa placa densa. Colónias pequenas rodeadas por halos de inibição são de espécies de Streptomyces. As colónias maiores são de Bacillus sp.. Antibiótico undecilprodigiosina (cor vermelha) excretado por células de Streptomyces coelicolor. A produção de antibióticos é despoletada pela falta de nutrientes Alguns antibióticos sintetizados por Streptomyces Estruturas contendo esporos em espécies do género Streptomyces Género Mycobacterium M. tuberculosis – morfologia da colónia (lado esquerdo) e crescimento do tipo corda (“cordlike”) típico de estirpe virulenta. M. Avium – patogéneo oportunista • Algumas espécies saprófitas ambientais; outras, patogénicas: • M. bovis – tuberculose em gado e outros ruminantes • M. tuberculosis – tuberculose em humanos • M. leprae - lepra • Bastonetes, não móveis que formam aglomerados • Aeróbios ocorrendo no solo como saprófitas • Requerimentos nutricionais simples • Lípidos na parede celular que só são encontrados nas espécies do género Mycobacterium – Ácidos micólicos – contêm cadeias alifáticas longas com 60 a 90 átomos de carbonos - que se encontram ligados ao peptidoglicano (aparência e consistência de cera) - Difícil penetração por compostos químicos (p.ex. Coloração “acid-fast” pode servir de diagnóstico - fucsina é o corante (vermelho); tratamento com fenol e calor para entrada da fucsina; não descoram facilmente após tratamento com solução ácida de alcool)) Resistência a drogas.