51º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005 Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4 [email protected] Palavra chave: miosina V, desenvolvimento embrionário Gaebler, N; Rancura, KGO; Montaño, MR; Rocchetti, TT; Ishi, TH; Martins, C; Wasko, AP; Azevedo, A Instituto de Biociências de Botucatu - Departamento de Morfologia - UNESP. Expressão da miosina Vc em embriões de galinha em diferentes estágios do desenvolvimento As miosinas-V compõem uma das classes de miosinas não-convencionais mais bem caracterizada atualmente. Através da análise do fenótipo de mutantes e das características bioquímicas tem-se sugerido sua participação no transporte de organelas e outros componentes celulares, na orientação do fuso mitótico e participação em via de transdução de sinal do cálcio. Esta classe é composta de vários membros identificados em leveduras e amebas, metazoários invertebrados, e em vertebrados. Ainda, estudos indicam que em mamíferos existem três parálogas da miosina V conhecidas como miosinas Va, Vb e Vc. Embora tenha sido demonstrada a essencialidade das miosinas-V nos mecanismos de motilidade celular, sua participação no desenvolvimento embrionário e fetal permanece ainda pouco explorada. Estudos recentes têm demonstrado, através de “imunoblots” e imunohistoquímica a presença da miosina-Va em tecidos embrionários de galinha e sua localização preferencial em tecido neural. Quanto às outras isoformas (Vb e Vc), nada se conhece sobre sua presença ou localização tecidual durante o desenvolvimento embrionário. O objetivo deste trabalho foi o de detectar a presença do RNAm responsável pela expressão da miosina Vc em embriões de galinha. Para tanto foram desenhados “primers” para amplificação de regiões da miosina Vc em galinha com base na seqüência parcial depositada no Gen Bank (n.a. XM427584). Embriões de galinha com 33, 48, 72 e 120 horas de desenvolvimento foram coletados e submetidos à extração de RNA. O RNA extraído foi submetido à reação de RT-PCR para produção de cDNAs e a seguir submetido à amplificação com o uso de “primers” específicos para miosina Vc de galinha. Os resultados mostraram a amplificação de um fragmento de 736 pb em embriões com 33, 48, e 72 horas de desenvolvimento. A análise da seqüência nucleotídica destes fragmentos mostraram sua identidade com a miosina Vc de galinha. Estes estudos mostram que além da miosina Va, a miosina Vc também é expressa durante o desenvolvimento embrionário indicando sua participação como motor molecular nos diferentes mecanismos de motilidade celular. Estudos de localização tecidual embrionária deverão trazer contribuições para o entendimento da função desta isoforma no desenvolvimento embrionário. 134