54º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008 Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2 CO2 inibe a ativação de ovários e expressão de genes ligados à reprodução em operárias Apis mellifera Macedo, LMF1; Guidugli-Lazzarini, KR1; Laure, MAFB2; Simões, ZLP1 Departamento de Biologia, FFCLRP- USP Departamento de Genética, FRMRP - USP [email protected] 1 2 Palavras-chave: abelha, vitelogenina, perfil protéico, expressão gênica, status reprodutivo Em Apis mellifera a rainha é a única fêmea na colônia com capacidade de acasalar e botar ovos fecundados. As operárias, facultativamente estéreis, arcam com as tarefas não-reprodutivas. Ambas sintetizam vitelogenina (Vg), principal proteína do ovo, porém, a modulação da expressão do gene codificador dessa proteína, a função exercida por ela, diferem nas castas. Inúmeros agentes podem estimular ou reprimir a síntese da Vg. Sabe-se que a exposição ao dióxido de carbono (CO2) afeta o processo reprodutivo em ambas as castas. O tratamento das rainhas com CO2 eleva os títulos de Vg na hemolinfa e acelera o desenvolvimento ovariano. Nas operárias o efeito é antagônico. Dentro deste cenário, os nossos objetivos foram: analisar os títulos de proteínas na hemolinfa de abelhas operárias (órfãs) controles e tratadas com CO2 e verificar diferenças na expressão de genes relacionados à reprodução. O tratamento foi realizado no quarto e quinto dia após a emergência. No décimo dia, foram extraídos corpo gorduroso e ovário (para análises moleculares) e hemolinfa (para análise protéica por meio da técnica SDS-PAGE). Os genes selecionados para a análise de expressão, por RTPCR semi-quantitativa, foram os codificadores de: Vg, Lipoforina (Lp) e seus receptores, Transferrina, Hexamerina 70a e Buffy. O tratamento inibiu o desenvolvimento ovariano e também modificou o padrão protéico, causando uma diminuição nos títulos de Vg e hexamerinas 70a, 70b e 70c presentes na hemolinfa de operárias com dez dias de idade. Também observamos um harmônico aumento tanto da expressão da Lp (ligante) quanto do seu receptor. Nos demais genes, a expressão foi maior no grupo controle, cujos ovários apresentavam-se predominantemente ativados. Acreditase que a hexamerina 70a tenha função associada ao desenvolvimento dos ovários e reprodução. A principal função da transferrina nos ovários é o fornecimento essencial de íons de ferro necessários para o desenvolvimento dos ovócitos e embriões. O buffy é inibidor de morte celular programada e a maior expressão deste gene é esperada nos tecidos que não entraram em processo de morte celular. Sugerimos que os genes estudados possam fazer parte da rede que regula a esterilidade funcional em operárias. O aumento observado na expressão de Lp pode compensar a diminuição de Vg, já que, estas duas proteínas compartilham funções como transporte de lipídios e de estocagem. A análise conjunta dos nossos resultados mostra que o tratamento com CO2 afeta genes importantes em processos reprodutivos e através deste tratamento podemos ampliar os conhecimentos nesta área de estudo. Apoio Financeiro: FAPESP, CAPES. 264